Escáner en tándem de 12 kHz

Campo de visión y alta velocidad en sinergia

 

La observación de procesos biológicos rápidos requiere sistemas de obtención de imágenes de alta velocidad. Sin embargo, la microscopía de escaneado confocal tiene una dificultad inherente: la grabación de elementos de imagen en serie. En consecuencia, suelen aplicarse los sistemas basados en cámaras y otros enfoques de adquisición rápida. Con el escáner en tándem, Leica ofrece una alternativa confocal de alta velocidad (figura 1). El escáner en tándem une el escaneado de FOV con un sistema de escaneado resonante basado en espejos galvanométricos intercambiables.

Eso permite frecuencias de exploración de línea de hasta 12 kHz y, como consecuencia, unos 40 fps con un formato de exploración de 512 x 512 píxeles o 428 fps a 512 x 16 píxeles. Un aumento importante de más del 30 % respecto a la implementación previa de Leica con la frecuencia de línea de 8 kHz, aún disponible. Estas altas velocidades de escaneado son útiles para varias cuestiones biológicas, como las imágenes rápidas de segundos mensajeros como Ca2+, mediciones cinéticas, flujo de líquidos o motilidad de células (figura 2). Para controlar esas altas frecuencias de escaneado sin comprometer la calidad de la imagen y con alta fidelidad geométrica, se necesita un complejo sistema de control en tiempo real.

Junto a la imagen de alta velocidad, el sistema de exploración resonante reduce la dosis de fotones que se administra a la muestra. El mecanismo por el que se consigue esto también se conoce como relajación anti-triplete. Así, las muestras vivas se benefician de la escasa fotodecoloración y de la mayor viabilidad de la célula. Para obtener más detalles sobre la relajación anti-triplete, consulte también el correspondiente artículo en Leica Science Lab de Rolf Borlinghaus.