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Leica M205 FCA & Leica M205 FA Research stereos

Leica M205 FCA: semiautomática con zoom manual

Hasta ahora, probablemente tuviera que cambiar entre dos sistemas diferentes: uno para screening con zoom manual de uso intuitivo y una solución de gama alta para ver y capturar en la imagen las señales más débiles.

El microscopio estereoscópico de fluorescencia Leica M205 FCA cumple ambos objetivos y combina el screening manual superrápido con las máximas prestaciones posibles en imagen.

Vídeo de faringe de C. elegans con mCherry. Cortesía del doctor Martin Gamerdinger, Jefe de Proyecto Científico, Microbiología Molecular, Universidad de Constanza (Alemania)

Ahora puede tenerlo todo:

  • Obtenga resultados de máxima fiabilidad y publicables, dado que todos los parámetros son automáticamente almacenados y pueden ser recargados.
  • Elimine las interrupciones en el flujo de trabajo gracias al cambiador de filtros codificado de cuatro posiciones
  • Añada un pedal para controlar fácilmente los filtros, el enfoque y la iluminación durante el screening, manteniendo ambas manos libres

Descubra el universo automatizado de la investigación

Microscopio estereoscópico de fluorescencia totalmente automático Leica M205 FA

El microscopio Leica M205 FA abre un nuevo universo de investigación en el ámbito de la microscopía de fluorescencia al trabajar, por ejemplo, en una cabina estéril.

  • Realice de forma sencilla complejos procedimientos de imagen multicanal 
  • Realice experimentos exigentes con el zoom motorizado, el cambiador de filtros, el gestor de la intensidad de fluorescencia (FIM) y el diafragma iris
  • Obtenga una platina de alta resolución: la platina de escaneado Leica LMT 260 posiciona la muestra con precisión submicrométrica y permite usar sistemas de incubación para muestras vivas.

Señales de fluorescencia siempre brillantes.

Para detectar incluso las señales más débiles de su muestra, necesita una luz de excitación de alta energía que proporcione una señal brillante de los fluorocromos. No obstante, la luz de excitación puede ocasionar reflexiones que generen fondo y dificulten la detección de señales de fluorescencia.

La tecnología TripleBeam de Leica elimina completamente este «ruido» de fondo con la introducción de un tercer zoom óptico. De este modo, se separa la luz de excitación de fluorescencia de los dos canales de observación  y se evita tener que utilizar un espejo dicroico. El resultado es una señal de fluorescencia clara y potente sobre un fondo negro sin ruido.

Hasta el más mínimo detalle en 3D

¿Cree que la alta resolución y la máxima profundidad de campo son conceptos opuestos e irreconciliables en microscopía? ¡Le demostramos que no! La tecnología FusionOptics de Leica Microsystems supera las limitaciones ópticas utilizando dos rutas ópticas para diferentes tareas:

  • el canal derecho ofrece una imagen de alta resolución a la apertura numérica más grande posible, mientras que
  • el canal izquierdo presenta una imagen con una profundidad de campo elevada.

Como resultado, se percibe una imagen con una riqueza de detalles sobresaliente y una profundidad de campo excepcional

Resolución microscópica en un microscopio estereoscópico

El reconocimiento del más mínimo detalle resulta fundamental en el ámbito de la investigación, en especial cuando se trabaja con organismos pequeños. La Leica M205 FA y M205 FCA pueden alcanzar una resolución de 1279 lp/mm o 0,78 µm según la definición del límite de resolución de la norma ISO18221*.

El objetivo apocromático plano 2.0x es una obra maestra de la óptica. Tiene una apertura máxima de 0,35, la apertura numérica más elevada (NA) conseguida con un microscopio estereoscópico.

*M205 FA, objetivo PlanAPO 2x, adaptador de cámara 0,63x, cámara DMC4500 en modo full frame, monitor Apple 5K de 27".

Cultivo de neuronas marcadas con DAPI, beta tubulina III-Cy2, nestina-Cy3 (LMS Bioanalytik GmbH, Magdeburg, Germany). Los núcleos celulares aparecense ven en azul, las neuronas que expresan beta tubulina III aparecen verdes y en rojo las células madre que expresan nestina. La imagen se adquirió con un microscopio estereoscópico M205 FCA, platina motorizada LMT260, cámara DFC 3000 G y Fluocombi III a 400x.
Pez Cebra, transgénico mpx e-GFP: time-lapse de neutrófilos en resección de la cola. Cortesía del Dr. Carl Tucker, The Queen’s Medical Research Institute, University ofEdinburgh, Reino Unido. En este modelo in vivo se muestra la respuesta inflamatoria en una línea de pez cebra transgénico que expresa GFP bajo el promotor de mieloperoxidasa específico de neutrófilos. Se pueden generar datos cuantitativos a partir de este modelo mediante el recuento de células fluorescentes o por análisis de imagen (Renshaw et al Blood 2006) DOI 10.1182/blood-2006-05-024075

La velocidad importa y la codificación ayuda

La codificación de imágenes proporciona ajustes prácticos y reproducibles para una documentación rápida y sencilla.

La codificación integrada transmite al software en tiempo real tanto el aumento como la posición del diafragma iris. Una barra de escala se superpone a la imagen en vivo y se actualiza cuando cambia el aumento. Cuando se captura una imagen, todos los ajustes se guardan con la imagen y pueden recuperarse en cualquier momento.

  • Los componentes codificados ofrecen facilidad de uso y resultados fiables, incluso en el caso de operadores sin formación
  • El microscopio está vinculado de forma inteligente al software para poder modificar los ajustes sin tener que ajustar manualmente la calibración
  • La base de diascopía TL5000 Ergo adapta automáticamente la apertura a la posición del zoom para ofrecer un contraste óptimo

Objetivo 2 x CORR: ¡todo claro!

Con el objetivo Leica PLAN APO 2.0x CORR, es posible ajustar el índice de refracción para obtener imágenes nítidas incluso aunque entre la muestra y el objetivo haya una columna de agua de 5 mm. El objetivo permite a los usuarios observar y documentar las muestras como si el agua no existiera.

Al observar muestras sumergidas en una solución acuosa, las estructuras tienden a desdibujarse, en particular a un aumento elevado. Esto se debe al diferente índice de refracción del aire (índice = 1) y el agua (índice = 1.3). Estructuras potencialmente interesantes o importantes se pueden malinterpretar fácilmente debido a las aberraciones esféricas que pueden producirse, puesto que los objetivos normales están pensados para utilizarse únicamente con muestras rodeadas de aire.

Video en fluorescencia de una larva de pez cebra expresando GFP, en medio líquido. Las imágenes se capturaron con un microscopio estereoscópico M165FC con objetivo Plan Apo 2x con collarín de corrección (imagen de la derecha) y sin él (imagen de la izquierda). El corazón del pez puede verse latiendo en ambos vídeos. La larva se ve borrosa en la imagen de la derecha, no corregida. Cortesia de M. J. Hamm y W. Herzog, Angiogenesis Laboratory, Max Planck Institute for Molecular Biomedicine and Westfälische Wilhelms University en Münster, Germany.
Sistema nervioso de una larva de Solea senegalensis. Máxima proyección de un mosaico de 6 campos x 33 planos. Corrección de paralaje y creación del mosaico en LAS X tras deconvolución en Huygens profesional. Cortesía del Dr. Marco A. Campinho, CCMAR-Centre for Marine Science, Universidade do Algarve, Portugal

Explore el software LAS X para Biología y Medicina

LAS X es la plataforma de software para todas las soluciones de microscopios Leica. Lleve a cabo de forma sencilla experimentos complejos con fluorescencia. LAS X le guiará paso a paso a través del flujo de trabajo de análisis completo.

  • Live Data Mode: diseñe patrones para experimentos y controle su entorno
  • Profundidad de campo ampliada (ED(O)F)
  • Cree grandes, incomparables imágenes panoramicas combinando stacks en Z deconvolucionados con XY