Haut : Une nanorègle (par exemple, un origami ADN avec un espacement de 140 nm entre les fluorochromes) peut-être affichée avec HyVolution, mais pas par imagerie confocale traditionnelle.
Bas : Augmentation de la résolution axiale : Membranes mitochondriales marquées par GFP TOM20. Échantillon fourni par Urs Ziegler, ZMB, Université de Zurich, Suisse

Microscopie confocale ultra haute résolution jusqu'à 140 nm

L'observation des structures intracellulaires en vue de mieux comprendre la structure des réseaux de signalisation peut nécessiter une résolution inférieure à 200 nm. Cela dépasse la capacité d'un microscope confocal standard.

HyVolution offre une ultra haute résolution allant jusqu'à 140 nm en combinant l'imagerie confocale avec la technologie leader de SVI en matière de déconvolution : Huygens. La résolution est même doublée dans la direction axiale.

Résultat : un rendu des détails avec une haute fidélité

Vous pouvez doter tous vos Leica TCS SP8 de la technologie HyVolution et combiner cette dernière avec des méthodes d'imagerie de pointe, comme l'imagerie multiphotonique ou l'imagerie par laser blanc.

Technologie SVI https://svi.nl/

Plusieurs couleurs en simultané

HyVolution vous permet de voir des détails plus précis dans plusieurs cellules vivantes colorées. 

L'interaction entre les protéines dans les processus dynamiques rapides devient visible grâce à une véritable imagerie multicouleur simultanée. 

Avec le système de détection spectrale sans filtre du Leica TCS SP8, vous pouvez imager jusqu'à cinq fluorochromes de votre spécimen en simultané. 

Ceci constitue une avancée remarquable : vous ne perdez plus de temps à prendre les images une par une, comme avec les systèmes à détecteur unique

Image multicouleur HyVolution, avec des cellules vivantes. Les trois couleurs ont été obtenues simultanément (pas de balayage séquentiel) en 5D. Cellules HeLa Kyoto. GPI-YFP (jaune), H2B-mCherry (bleu), tubuline-SiR (rouge). Échantillon fourni par Sabine Reither, EMBL Heidelberg, Allemagne.
Acquisition multicouleur d'un Leica TCS SP8 doté de plusieurs détecteurs HyD haute sensibilité par rapport à un photomultiplicateur GaAs monocanal à fibre couplée.

Affichez plusieurs couleurs simultanément via cinq canaux

HyVolution permet une acquisition multicouleur à grande vitesse. Le système de détection spectrale sans filtre du Leica TCS SP8 peut récupérer jusqu'à cinq canaux simultanément.

Cela permet une récupération des données en parallèle, beaucoup plus rapide que celle offerte par les solutions monocanal : à durée égale, le Leica TCS SP8 doté de la technologie HyVolution permet d'obtenir 8 images multicouleur quand les solutions à un seul détecteur n'en fournissent qu'une seule, en monochrome.

Pas de compromis sur la vitesse

Les systèmes confocaux standard sacrifient souvent la vitesse au profit de la résolution.

HyVolution ne limite pas la vitesse d'acquisition d'images et fournit l'entière fréquence d'image du Leica TCS SP8 (40 fps à 512-512 pixels) avec une ultra haute résolution multicouleur.

Vous pouvez ainsi capturer des événements qui se produisent en quelques millisecondes et observer la dynamique cellulaire en détail avec une netteté sans précédent.

Image multicouleur HyVolution, avec des cellules vivantes. Les trois couleurs ont été obtenues simultanément (pas de balayage séquentiel) en 5D. Cellules HeLa Kyoto. Golgi-GFP(vert), GPI-YFP (jaune), H2B-mCherry (blanc). Échantillon fourni par Sabine Reither, EMBL Heidelberg, Allemagne.
Le bruit est néfaste pour les résultats de la déconvolution : l'image bruitée générée par un photomultiplicateur est moins susceptible de séparer les taches sur une nanorègle à origami ADN de 140 nm. Données simulées.

Déconvolution avec détecteur HyD : reconstruction supérieure

Le bruit est néfaste pour la déconvolution. Le bruit de fond habituellement généré par les photomultiplicateurs est susceptible de produire plus d'artéfacts et de réduire la résolution.

Le Leica TCS SP8 vous permet de détecter la fluorescence à partir d'échantillons faiblement marqués, et ce, pratiquement sans bruit de fond, grâce :

  • À un excellent rapport signal/bruit du détecteur HyD de comptage de photons de Leica
  • À la haute efficacité photonique du Leica TCS SP8

Pour vous, cela représente moins d'artéfacts, une précision d'imagerie inégalée et une confiance absolue dans ce que vous publiez.

Assistant HyVolution – Des résultats reproductibles avec des valeurs optimales

L'Assistant HyVolution intégré dans le logiciel Leica Application Suite X facilite la génération d'images avec optimisation de la résolution.

  1. Vous choisissez le niveau de résolution grâce à un simple curseur
  2. LAS X prend en compte tous les réglages du microscope, de la taille du pinhole aux nombre de moyennages
  3. Appuyez sur un seul bouton pour échanger des données entre le logiciel de déconvolution Huygens et LAS X
  4. Comparez directement les images déconvoluées aux données brutes et analysez-les quantitativement avec les outils de la suite LAS X
Logiciel Leica Application Suite (LAS) X

Architecture parallèle - Accélération par GPU

La déconvolution implique des calculs sophistiqués et complexes.

Ces derniers peuvent être considérablement accélérés grâce aux processeurs graphiques CUDA hautes performances de NVIDIA.

Ceux-ci augmentent considérablement les performances de calcul en traitant des processus informatiques intensifs en parallèle.

Résultat : vous pouvez accéder à vos données jusqu'à 10 fois plus rapidement.