Détecteur SP

De nos jours, l'imagerie de fluorescence multicolore est établie comme une norme en recherche des Sciences de la Vie, et constitue généralement la première étape vers la microscopie multiparamétrique. Elle est d'autant plus importante pour garantir l'efficacité et la flexibilité de la séparation spectrale de la lumière de fluorescence émise en différents canaux de détection.

Les microscopes confocaux de Leica Microsystems s'appuient sur une disposition semblable à celle d'un spectrophotomètre. La lumière émise depuis l'échantillon est dispersée par un prisme particulièrement transparent. Contrairement aux modèles grillés, cela empêche la perte de photons. Chaque canal est enregistré avec un détecteur de point individuel. Ce concept permet une large plage dynamique pour tous types d'échantillons, car chaque détecteur peut être réglé sur un gain individuel et différents types de détecteurs, tels que les PMT et HyD, peuvent être combinés. Les colorants et couleurs des protéines fluorescentes ayant des luminosités moléculaires inégales, le système peut ainsi procéder à un ajustement optimal en fonction de l'échantillon (voir Figure 1). Pour plus d'informations sur le détecteur spectral (SP) de Leica, veuillez consulter le Leica Science Lab.


Figure 1 : Plage dynamique adaptative du détecteur SP Le modèle de détection SP utilisant des détecteurs de point individuels évite deux des inconvénients inhérents aux matrices multianodes : la perte de dynamique et les fossés spectraux. Les éléments d'une matrice spectrale sont tous typiquement contrôlés à l'aide du même gain. Le paramétrage du gain doit par conséquent faire un compromis entre la sous-exposition et la saturation au cas où différents canaux auraient des luminosités moléculaires différentes. Les fossés spectraux entre les éléments de matrice peuvent provoquer jusqu'à 20 % de perte de lumière, sans quoi l'excitation croisée entre les canaux pourrait devenir grave. Les détecteurs de point individuels s'adaptent aux exigences variées des différents échantillons de façon dynamique.