HyVolution으로 140나노미터의 측면 해상도 제공

초고감도 HyD 감지기와 Huygens 디콘볼루션은 140nm의 구조를 분해할 수 있습니다. 표본: 140nm의 간격으로 지정된 단일 분자 DNA 오리가미입니다. HyVolution 및 공초점 이미징을 사용하여 결과를 비교합니다.

광자 계측에 의한 최대 동적 해상도


우수한 신호 대 노이즈 비율

광자 계측은 기존의 강도 평균화보다 훨씬 더 높은 신호 대 노이즈 비율을 제공합니다. 강도 평균화는 multialkaline 또는 GaAsP PMT를 사용하는 모든 상용 공초점 제품에 대한 사실상의 표준입니다.

Leica HyD는 이미징에 일반적으로 사용되는 높은 계측 속도에서도 단일 광자를 분해할 수 있는 유일한 하이 타임(High Time) 분해능의 광감지기입니다. Leica HyD를 사용하면 공초점 현미경으로 완벽히 통합된 여타의 감지기보다 더욱 신뢰할 만한 정보를 이미지에서 얻을 수 있습니다.

뛰어난 동적 범위

Leica HyD는 광자 계측에서 이미징에 이르기까지 하나의 감지기에서 전체 가시광 영역을 감지합니다. 완벽한 정보가 하나의 이미지에 포함되어 있습니다. 따라서 공초점 실험에서 유연성이 뛰어나며 데이터 처리 시 노이즈가 적습니다.

광자 계측 시스템의 샘플링 속도는 신호 대 노이즈 비율과 매우 연관되어 있습니다. 샘플링 속도가 낮은 종래의 광자 계측 시스템(예: 15MHz)은 소수의 광자만 탐지할 수 있으며, 이는 비교적 높은 노이즈의 원인이 됩니다. 더 높은 계측 속도에서, 신호는 포화되며 더 이상 정량적으로 재현되지 않습니다. 그러나 생물학적 표본의 일반적인 염료는 15MHz에서 40MHz 사이의 속도로 방출합니다.

빠른 샘플링이 특징인 Leica HyD는 낮은 노이즈로 높은 광자 속도를 탐지하므로 PMT 또는 APD보다 우수한 이미지를 제공합니다. 광자 계측 모드에서 HyD는 최대 60MHz까지 선형이며, 표준 모드에서는 선형성이 최대 300MHz까지도 보장됩니다.

광자 계측은 통계적 분석에 필요한 만큼의 정보를 충분히 모을 수 있습니다.

STED Super-Resolution

30나노미터까지 분해 가능

Leica TCS SP8 STED 3X는 진정한 고품질 초고도 분해능을 제공하여 30nm까지 세부적인 정보를 분해할 수 있습니다. Leica TCS SP8 공초점 플랫폼으로 완벽히 통합되며, 회절 한계를 넘어 구조적인 세부 정보에 대한 빠르고 직관적이면서 광학 전용의 액세스를 제공하고, 생세포 이미징을 위해서도 충분히 빠른 속도를 제공합니다.

45nm DNA 오리가미의 775nm에서 펄스 STED
- 45nm 피크 간 거리
- 30nm 이하 단일 피크의 FWHM

AOBS – The Most Versatile Beamsplitter

스펙트럼상으로 인접한 형광소의 이미징 효율성 30% 향상

공초점 현미경에서 여기 광선은 발광이 수집되는 쪽과 동일한 측면의 표본에 들어갑니다. 빔 분배기가 여기와 발광을 분리합니다.

AOBS(Accousto Optical Beam Splitter: 음향 광 빔 분배기)는 완전히 투명한 활성 TeO2 결정이므로 최대 광자 효율을 제공합니다. 결정과 연결된 음파는 해당 투과 속성을 바꿉니다. 간단히 파동의 고주파를 변경하여 몇 마이크로초 내에 전환합니다. 이러한 기능 덕분에 AOBS는 유례없이 유연하고 효율적이며 빠른 빔 분배기로서 명성을 얻고 있습니다.

AOBS 반사 대역에는 예리한 컷오프와 좁은 대역폭이 있어 30% 이상의 추가 발광을 수집할 수 있습니다.

AOBS는 최대 8개의 반사 대역을 수용할 수 있습니다. GFP 및 YFP와 같은 고유한 염료 조합의 동시 이미징에 밀접하게 배치한 여기 라인을 사용할 수 있습니다. 따라서 언믹싱 및 관련 인공산물 없이 염료 분리를 쉽게 수행할 수 있습니다.

상단: AOBS를 통해 GFP 및 YFP와 같이 밀접하게 배치된 여기 라인을 사용할 수 있어(필터 휠 시스템에서는 불가능) 모든 파장이 완전히 유연합니다.
하단: AOBS의 가파른 대역폭 가장자리로 투과 효율을 30%까지 증가시킵니다.

Leica HyD의 초고감도 탐지 기능

예민한 생물 표본은 광도는 낮고 게인은 높은 상태에서 촬영해야 합니다.

Leica HyD는 최고의 신호 대 노이즈 비율을 제공하므로 어떤 표본에서도 특히 심하게 흩어진 조직 절편과 같이 상당히 까다로운 경우에도 최상의 세부 정보를 제공하는 데 도움이 됩니다.

Leica HyD는 다크 노이즈를 줄임으로써 이미지 대비를 자동으로 개선하므로 즉시 논문 개재 수준의 이미지를 확보할 수 있습니다. 

하이브리드 탐지 기술에 관해 자세히 알아보려면여기를 클릭하십시오.

무간격 광자 효율성

무필터 스펙트럼 탐지 시스템은 간격 없이 원활하게 조정 가능한 발광 대역의 동시 탐지를 제공하도록 설계되었습니다.

프리즘을 사용하여 특허를 획득한 디자인은 가장 효율적인 분산 개념을 나타냅니다. 격자 기반 디자인과 대조적으로 광자 낭비가 없으므로 루프를 통해 재활용할 필요가 없습니다. 

적응형 동적 범위

배열 기반 스펙트럼 탐지 디자인과 달리 Leica SP 감지기는 최고의 민감도와 최고의 동적 범위 간의 균형을 맞춤형으로 설정할 수 있습니다. 독립된 감지기는 모든 배열 요소에 동일한 게인을 사용하도록 강제하지 않고 각 감지기에 대해 개별 게인을 설정할 수 있도록 허용합니다. 각각의 점 감지기는 광자 낭비 없이 서로 다른 염료의 동적 범위에 맞게 개별적으로 조정됩니다. 이는 수학적 복원 없이 선형 언믹싱을 통해 염료를 분리하는 기준입니다.

SP 감지기의 적응형 동적 범위. 개별적인 점 감지기를 사용하는 SP 탐지 디자인은 다중 산화전극 배열의 내재된 두 가지 문제점 즉, 역동성의 상실과 스펙트럼 간격을 방지합니다.

살아 있는 표본을 위한 고속 기능 제공

탠덤 스캐너가 전환 가능한 갈바노미터(galvanometric) 미러를 기반으로 하는 공진 스캔 시스템과 FOV 스캐너를 통합했습니다.

  • 22mm FOV - 시야 넓이가 가장 넓은 점 스캔 시스템
  • 균질 조명을 위한 X2Y 세 개의 미러
  • 전환 가능한 갈바노미터(galvanometric) 미러를 갖춘 8kHz 또는 12kHz 공진 스캔 시스템과 FOV의 고유한 조합
  • 최대 12kHz의 주파수에서 스캔하므로, 약 40fps(512 x 512px) 또는 428fps(512 x 16px) 가능
  • SuperZ GalvoFlow와 결합하여 경쟁 시스템보다 최대 50% 더 빠르게 4D 스택 확보
  • 고개구수 대물렌즈 및 민감한 Leica HyD RLD를 사용하여 해상도, 민감도 또는 대비의 손상이 없음
1800 Hz Conventional -> 12 khz Resonant -> SuperZ GalvoFlow

Leica HyD

표본의 생존력을 높여주는 솔루션

생세포는 이미징의 결과로 내재하는 광독성 영향을 받습니다.

Leica HyD의 우수한 민감도 덕분에 샘플에 전달되는 광 조사량을 줄일 수 있습니다. 그러면 표본의 생존력이 향상됩니다. 이스트 또는 유충과 같은 연약한 유기체도 탁월한 공초점 해상도를 갖춘 하이브리드 탐지를 통해 연구/관찰할 수 있습니다.

핵 외피 및 말단 소립 모두에 EGFP 표지된 살아 있는 이스트 세포

Spectral Detector

무간격 발광 대역의 동시 탐지

표본의 다양한 발광을 구별하려면 여러 채널의 동시 기록이 가능한 스펙트럼 탐지 시스템을 갖추는 것이 매우 중요합니다.

모든 Leica TCS SP8의 스펙트럼 감지기를 사용하면 프리즘 기반 분산 요소 및 조정 가능한 슬라이딩 미러의 연속 배열을 통해 5개의 다른 채널을 동시에 탐지할 수 있습니다.

프리즘 분산 및 스펙트럼 탐지. 방사된 빛이 해당 스펙트럼 구성 요소로 빛을 분산시키는 프리즘을 통과합니다(1). 협대역의 파장은 기계식 슬릿의 삽입으로 선택할 수 있습니다(슬라이딩 미러)(2). 나머지 스펙트럼은 높은 수준의 반사 미러를 통해 이후의 감지기로 전달됩니다(3). 높은 수준으로 반사하는 슬라이딩 미러에서 생성된 순차적인 기계식 슬릿으로 최대 5개의 채널을 동시에 손실 없이 기록할 수 있습니다.

Graphic Prism Dispersion and Spectral Detection

AOBS and WLL

자유롭게 조정 가능한 공초점 이미징

TCS SP8 X 에서 사용된 WLL(백색광 레이저)은 470nm에서 670nm까지의 스펙트럼 범위를 포괄하는 백색 광원을 특징으로 합니다.

AOBS는 백색 스펙트럼의 파장을 선택하는 키이며 WLL의 이점을 극대화합니다. 스펙트럼에서 최대 8개의 선을 선택할 수 있습니다. 그리고 색상과 강도 면에서 각 선은 자유롭게 조정 가능하므로, 8! = 40320 조합의 결과가 나옵니다.

지속적으로 조정 가능한 조명 및 빔 분할에 SP 감지기를 사용하는 지속적으로 조정 가능한 탐지 기능이 더해져서 완벽한 이미징을 구현할 수 있습니다. 즉, 조정 가능한 스펙트럼 광도계 대역별로 여기 라인 간 투과 대역을 최고의 투과 효율로, 5개의 진정한 동시 염료 배출 채널에서 수집할 수 있습니다. 따라서 진정한 다색 적용이 가능합니다.

상단: 백색광 레이저를 통해 스펙트럼에서 최대 8개의 레이저 선을 탐지할 수 있으며, 이 선은 파장 및 강도 면에서 자유롭게 조정 가능합니다.
하단: AOBS를 통해 GFP 및 YFP와 같이 밀접하게 배치된 여기 라인을 사용할 수 있어 모든 파장에 완전히 유연하게 대응합니다.
모든 Leica TCS SP8에는 LAS X 3D 시각화 패키지와 4K 모니터가 기본 제공됩니다.

LAS X Software

옵션 이외의 특징

소프트웨어 플랫폼LAS X(Leica 애플리케이션 제품군 X) 는 연구 요구에 따라 맞춤화할 수 있으며 실험을 계획, 시행 및 분석하는 데 활용할 수 있습니다.

원활한 탐구 및 분석 지원

워크플로우 지향 디자인과 직관적인 소프트웨어 마법사가 이미지 획득, 처리 및 분석을 단계별로 안내해 줍니다. 3D 시각화 및 분석과 같은 추가 소프트웨어 패키지를 통해 연구 요구에 맞게 LAS X를 맞춤화할 수 있으므로 3D 이미지의 토폴로지를 이해하고 세포 내 구조의 다양한 측면을 정량화할 수 있습니다.

Leica TCS SP8 및 LAS X를 사용하면 실험의 검사 및 분석이 매우 쉬워집니다.

CAM이 없는 경우(상단): 중요한 이벤트를 놓칠 수 있습니다. CAM이 있는 경우(하단): 필요에 따라 일시적으로 시간 분해능이 증가합니다. 프로세스를 더욱 자세히 연구할 수 있으며 더욱 우수한 결과를 얻을 수 있습니다.

넓고 크게 사고할 수 있는 기반 제공

적절한 순간에, 적절한 장소에 있을 때 획기적인 발견이 가능합니다. Leica HCS A를 사용하면 HCS(High Content Screening) 기술을 통해 발견 과정의 속도를 높일 수 있으며, 신속하고 재현 가능한 결과를 위해 생물학적 적용을 표준화할 수 있습니다.

CAM(Computer Aided Microscopy)을 통해 ImageJ 또는 Cell Profiler와 같은 외부 이미지 분석 소프트웨어를 사용하면 희귀한 이벤트를 탐지할 수 있습니다. 데이터가 끊임없이 외부 스토리지로 스트림되며, 데이터 획득과 동시에 이미지 분석을 수행할 수 있습니다. Leica HCS A는 분석 소프트웨어의 피드백에 대응할 수 있으므로 대규모 스크리닝 캠페인을 간소화할 수 있습니다.