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Leica TCS SP8 SP8 Configurable Confocal Leica Leica Microsystems

HyVolution 的 140 纳米横向分辨率

 

超灵敏 HyD 探测器和Huygens反卷积可以分辨出 140 纳米的结构。
样品:确定140 纳米间距的单分子 DNA折纸。HyVolution 和共聚焦成像效果比较

通过光子计数得到的最大动态分辨率

卓越的信噪比

光子计数的信噪比远高于传统的强度平均。强度平均是市面上所有采用多碱阴极光电倍增管或磷砷化镓光电倍增管的商业化共聚焦显微镜的实际使用标准。

徕卡 HyD 是唯一一款具有高时间分辨率的光电探测器。即使在通常成像所需的高光字计数率情况下,也可分辨到单个光子。您用徕卡 HyD 从图像中获得的信息将比其他集成在共聚焦显微镜中的任何探测器都更为可靠。

大动态范围

徕卡 HyD 的一个探测器即可覆盖从光子计数到成像的整个频率范围。一次成像即可包含完整的信息。这意味着您的共聚焦实验具有高度的灵活性,同时也减少了数据处理的失真。

光子计数系统的采样率与信噪比密切相关。常规低采样率的光子计数系统(例如 15 MHz),只能检测到少量光子,噪声相对较高。如采用更高的计数率,则其信号会饱和,无法实现定量测定。然而,生物样品中的典型染料其光子发射率为 15 40 MHz

凭借其快速的采样率,徕卡 HyD 的光子检出率高、成像噪声少,图像质量比光电倍增管或雪崩光电二极管更好。在光子计数模式下,HyD 的线性采样率可达60MHz,在标准模式下,其线性采样率高达300MHz

光子计数能够根据统计分析的需要积累尽可能多的信息。

STED 超高分辨

分辨率高达 30 纳米

 Leica TCS SP8 STED 3X 具备真正的超高分辨率,能够分辨细微至 30 纳米的细节。它完全集成于TCS SP8共聚焦平台,能够快速、直观地呈现出远超衍射极限的纯光学结构细节,快到足以胜任活细胞成像。

 

 

 

45 nm DNA折纸的脉冲775nmSTED成像
-两峰间距45nm
-单峰半高波宽FWHM不到30nm

AOBS – 灵活、高效分光器

可对光谱接近的染料进行成像,效率提高 30%

在共聚焦显微镜中,激发光入射和发射光采集都发生在样品的同一侧。激发和发射光依靠分光器进行分离。

AOBS (声光分光器) 是完全透明的活性二氧化碲晶体,具有最高的光子效率。通过改变波的射频,与晶体耦合的声波可在数微秒内改变其透射性质。这使得AOBS成为一种极度灵活、高效和快速的分光器。

AOBS 反射带斜率陡峭,带宽较窄,能够多收集 30% 的发射光。

AOBS 最多可容纳八个反射带。您可以使用距离接近的激发谱线对,如 GFP 和 YFP 等独特的染料组合进行同时成像。这样可以很容易地进行染料分离,而免去消串色处理和由此产生的假象。

上图:AOBS使得所有波长具有最大的灵活性,可使用如GFP和YFP等激发波长特别接近的荧光染料,这是任何滤片系统都无法实现的。
下图:AOBS 的陡峭边缘使透光率提高 30%

徕卡HyD的超灵敏检测

敏感的活体样品成像需要在弱光和高增益的条件下。

徕卡 HyD 具备出众的信噪比,有助于呈现样品中的精细细节 - 即使是棘手的对象(例如高散射的组织切片)也是如此。

徕卡 HyD通过减少暗噪声来自动提高图像的反差,让您立即获得出版级的图像。

点击这里进一步了解混合检测技术的详情。.

无缝光子效率

无滤光片的光谱检测系统可以同时检测多个无缝可调的发射频带,没有任何间隙。

棱镜的专利设计代表了最高效色散的理念。与基于光栅的设计相比,没有光子浪费,因而也没有必要进行回收循环。

自适应动态范围

与基于阵列的光谱检测设计不同,徕卡光谱检测器能够在最高灵敏度和最大动态范围之间达到定制的平衡。独立检测器设计可以为各个检测器设置不同的增益,而不是强制所有阵列元件都采用相同的增益。每个点检测器分别适应不同染料的动态范围,没有光子浪费。这使得区分染料可通过线性分离进行而无需数学还原。

光谱检测器的自适应动态范围。使用单点探测器的光谱检测设计避免了多阳极阵列的两个固有缺点:动态丢失和光谱间隙。

活标本高速检测

串联扫描系统集合了可切换的全视野扫描镜和共振扫描镜

  • 22 毫米视场  - 点扫描系统中最大视场
  • X2Y 三镜扫描系统,实现均匀照明
  • 可切换的全视野扫描与 8 kHz 12 kHz 共振扫描系统的独特组合
  • 12 kHz 的频率扫描,速度达40 fps512 × 512 像素)或 428 fps512 ×16 像素)
  • 扫描速度与SuperZ GalvoFlow功能相结合,采集 4D 层切比同类系统速度快50%
  • 使用高数值孔径物镜和徕卡灵敏的HyD RLD,保证了系统的分辨率、灵敏度和对比度

 

 

 

 

 

1800 Hz Conventional -> 12 khz Resonant -> SuperZ GalvoFlow

Leica HyD

活标本解决方案

活细胞在成像时会受到固有的光毒性影响。

高灵敏度的徕卡 HyD可直接减少样品的光照射量。这样可以提高样品的存活力。即使是酵母或蠕虫等娇弱的生物体,也可以用出色的共焦分辨率进行HyD检测。

活酵母细胞的核膜和端粒EGFP双标记。

光谱检测

发射光谱带同时的无缝检测

为区分样本的不同发光谱带,必须使用光谱检测系统,同时记录多个通道。

每个徕卡 TCS SP8 的光谱检测器都能够通过棱镜色散元件和可调滑动镜片的级联排布来同时检测五个不同的通道。

棱镜色散和光谱检测。通过棱镜 (1) 的发射光分解成为光谱构成组分。可以通过机械缝隙插入(滑动镜片)(2) 来选择波长中的一条窄频带。光谱的其余部分由高反射镜片反射到之后的检测器 (3)。高反射滑动镜片内置的机械狭缝级联结构能够实现同时记录多达五个通道,而不损失光子。

 

 

 

Graphic Prism Dispersion and Spectral Detection

AOBS 及白激光

自由可调的共聚焦成像

TCS SP8 X 使用的 WLL(白激光) ,覆盖了 470 nm 670 nm 光谱范围的白色光源。

AOBS 是从白色光谱中选择任意波长并最大限度利用 WLL 优势的关键。可从光谱中选择多达八条谱线。每一种激光的颜色和强度都可自由调节,也即可产生 8!= 40320 种组合。

照明和分光连续可调,加上光谱检测器的连续可调,堪称完美。光谱检测器能够采集激发谱线之间的透光谱段 - 以最大的透光率同时检测五种染料的真实发射谱带,实现真正的多色应用。

 

 

 

上图:白激光可检测多达 8 条激光线,波长和强度均可自由调节。
下图:AOBS 可灵活使用所有波长,因此可以使用 如GFP 和 YFP 等非常接近的激发谱线。
每台徕卡 TCS SP8 加 LAS X 3D 可视化套装均配备4K 显示器

内部选项

我们的软件平台Leica Application Suite X (LAS X) 可以根据您的要求个性化定制,并帮助您规划、执行和分析您的实验。

探索和分析

以工作流程为导向设计的直观软件向导,能够一步步引导您完成图像采集、处理和分析。您可以根据您的需要用 3D 可视化和分析等附加软件包来定制 LAS X,这些工具可以帮助您了解您的 3D 图像的拓扑结构并量化细胞内结构的各个方面。

徕卡 TCS SP8 LAS X 会使您的实验检测和分析变得轻而易举。

不用 CAM(上图):可能错过重要事件。使用 CAM(下图):时间分辨率按需要暂时提高。对过程细节的研究更深入,结果更丰富。

从大处着眼

突破性的发现诞生于合适的时间、合适的地点。徕卡 HCS A 可以通过高内涵筛选加快发现的过程,并帮助您标准化生物学应用,快速获取可重复的结果。

计算机辅助显微技术(CAM) 可使用 ImageJ Cell Profiler 等外部图像分析软件来检测罕见事件。数据通过连续流传输到外部存储,图像分析与数据获取同步进行。徕卡 HCS A 根据分析软件的反馈作出回应,从而简化了大规模筛选的流程。