Interaktionen zeigen sich eindeutig durch Kreuzkorrelationen zwischen zwei spektral unterschiedlichen Kanälen. Das Verhältnis von freien und gebundenen Anteilen in Gleichgewichtsreaktionen kann quantifiziert werden. FCCS Messungen werden mit dem SMD FCS -Wizard durchgeführt.
Beispiel:
Caspase6, ein downstream Effektor der TNF-Apoptose-Signaltransduktion, dimerisiert bei Aktivierung (siehe Graph rechts). Ein GFP-gelabeltes Konstrukt und ein mCherry-Konstrukt wurden in HeLa-Zellen exprimiert. 50% des doppelt-gelabelten Dimers (grau unterlegt) werden im Kreuzkorrelations-Signal detektiert. Die auch vorhandenen Homo-Dimere erscheinen in der Autokorrelation. FCCS weist demnach die aktive Form von Caspase nach.
Wir danken Prof. Dr. Roland Eils und Dr. Joel Beaudouin, Universität Heidelberg, Deutschland.
