Análisis de unión molecular en células vivas con FCCS

Las interacciones son directamente evidentes por la presencia de una correlación cruzada entre dos canales espectralmente característicos. Además, se puede cuantificar la proporción de fracción libre frente a fracción ligada en reacciones de equilibrio. Las mediciones de FCCS se llevan a cabo con el asistente de FCS.

Ejemplo
Caspasa6, un efector descendente de la vía de apoptosis dependiente de TNF, se dimeriza tras la activación (mostrado en el gráfico). Un artefacto con marcado GPF y un artefacto con marcado mCherry se expresaron en células HeLa. El 50% de los dimeros con marcado doble resultantes (cuadro gris) se detectan en una señal de correlación cruzada. Así, FCCS permite probar la forma activa de Caspasa.

Nuestro agradecimiento al Prof. Dr. Roland Eils y al Dr. Joel Beaudouin, Bioquant, Universidad de Heidelberg, Alemania.

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