Aplicación de FCS: mapeo de concentración

La combinación de FCS y obtención de imágenes APD (fotodiodo de avalancha) proporciona una forma rápida y eficiente de mapear concentraciones en una célula u otra estructura.

Las mediciones de FCS son mediciones de puntos. Ofrecen información local sobre puntos individuales en la muestra. Para obtener la información de concentración en una imagen de orificio, FCS y la obtención de imágenes APD se pueden combinar utilizando el mismo detector. Esto permite al científico calibrar la intensidad de la imagen APD en función del número de partículas obtenido de la medición de FCS. De esta forma es posible cuantificar los niveles de expresión que se muestran como una intensidad de imagen.

El asistente de SMD FCS es totalmente compatible con la adquisición de mapeo de concentración.

Ejemplo: mapeo de concentración de TIF1a-GFP en células HeLa. La calibración de la imagen APD se ha llevado a cabo con la medición de puntos de FCS. Las regiones de interés de mediciones de FCS se muestran como cruces negras. La concentración se ha calculado a partir de curvas de autocorrelación (gráficos rojo y azul). Se obtiene un mapa espacial de concentraciones intracelulares. Las curvas de correlación ofrecen información sobre la motilidad de las partículas en los puntos medidos.

Nuestro agradecimiento para el Dr. Matthias Weiss, el Dr. Jedrzej Szymanski y Nina Malchus, DKFZ, Heidelberg, Alemania

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