Visualización de redes celulares

Dra. Andrea Pfeifer, Leica Microsystems

Una causa común de las enfermedades que suponen las mayores amenazas para la vida es la alteración de redes biológicas complejas. La importancia de las conexiones intercelulares es una característica incipiente del cáncer y las enfermedades neurológicas e inmunológicas. Por eso, un número cada vez mayor de proyectos de investigación se centra en redes celulares intactas. Las muestras utilizadas para estos estudios son cortes de tejidos gruesos o animales completos. La obtención de imágenes de redes celulares con una profundidad de resolución alta en tejidos biológicos es una tarea exigente. La luz visible se disemina en gran medida por las muestras y no puede excitar los fluoróforos en cortes de tejidos de profundos. En este caso, la microscopía multifotónica es la herramienta perfecta ya que utiliza luz infrarroja para la excitación, que es menos proclive a diseminarse en los tejidos. El nuevo Leica TCS MP5 está diseñado para satisfacer las necesidades de la obtención de imágenes multifotónicas. Una transmisión óptima de hasta 1.300 nm y una solución de oscilador paramétrico óptimo (OPO) integrada permite a los investigadores profundizar aún más en las muestras.

Obtención de imágenes intravitales de tejidos blandos

Conseguir acceder al tejido de interés sin interrumpir el proceso estudiado es fundamental para el éxito de la obtención de imágenes intravitales. En neurociencias, las conexiones e interacciones entre neuronas y otros tipos de células del sistema nervioso se estudian periódicamente en animales vivos mediante microscopía multifotónica. Más recientemente, la obtención de imágenes intravitales de tejidos blandos proporciona nuevas y emocionantes perspectivas de la biología del cáncer. La observación frecuente de metástasis tumorales y de la formación de vasos sanguíneos durante varios días es posible con ventanas de obtención de imágenes implantadas en la piel del animal.

Obtención de imágenes multifotónicas: configuradas individualmente

Como microscopio multifotónico dedicado, el Leica TCS MP5 es la plataforma perfecta para la obtención de imágenes intravitales. En combinación con el microscopio de platina fija Leica DM6000 CFS, ofrece la mayor estabilidad mecánica y electrónica posible para aplicaciones exigentes como la electrofisiología. El Leica TCS MP5 equipado con el microscopio invertido Leica DMI6000 B resulta óptimo para la observación a través de ventanas de obtención de imágenes
ventrales. Muchos procesos en organismos vivos son muy dinámicos y deben supervisarse con una resolución temporal alta. El Leica Tandem Scanner combina dos escáneres para ofrecer la gama completa de velocidades de escaneado en un sistema Leica TCS MP5. El escáner resonante permite el registro de dinámicas rápidas y una adquisición más rápida de pilas z detalladas mediante escaneado de alta velocidad. Para lograr una resolución espacial óptima, el escáner convencional se puede utilizar con un campo visual excepcionalmente grande de 22 mm.

Explore la gama completa de proteínas fluorescentes

Las interacciones de proteínas y distintos tipos de células se supervisan utilizando marcadores fluorescentes específicos para cada especie. El Leica TCS MP5 puede incorporar hasta siete detectores externos para la adquisición multicanal simultánea. Esto incluye detectores de espectro amplio (NDD) para detección de luz transmitida y reflejada de señales fluorescentes y un detector de campo claro y contraste alto para ofrecer a los investigadores la imagen completa de su muestra. La excitación de hasta 1300 nm con un oscilador paramétrico óptico (OPO) permite a los investigadores explorar la gama completa de proteínas y tintes fluorescentes mediante microscopía multifotónica. Con la solución OPO de Leica, la excitación multifotónica simultánea de fluoróforos verdes y rojos es posible. Las longitudes de onda más largas del OPO permiten profundizar más en el tejido y son menos perjudiciales para las muestras. Leica Microsystems ofrece una solución OPO que está completamente integrada en la interfaz de software del LAS AF para permitir un ajuste y configuración sencillos de longitudes de onda de láser. Una transmisión alta de hasta 1.300 nm de la óptica de escaneado del Leica TCS MP5 traslada toda la potencia del OPO a la muestra (consulte reSOLUTION - Investigación nº 9, pág. 8).

Related Images