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El EM Cryo CLEM es un elemento esencial en nuestros flujos de trabajo de criogénicos. No me puedo imaginar nuestro trabajo sin él.

Dr. Yannick Schwab, jefe de equipo y director del servicio central de microscopía electrónica, EMBL Heidelberg (Alemania)

Células HeLa sin sistema de imagen THUNDER
Células HeLa con sistema de imagen THUNDER

Identifique y tome imágenes de la región de interés de forma más clara con THUNDER

Para visualizar de forma óptima las estructuras celulares, el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM combina un objetivo criogénico de alta resolución con la tecnología THUNDER de Leica Microsystems. El resultado son imágenes más nítidas, sin la luz que proviene de los planos no enfocados.

THUNDER emplea el innovador método de Leica de aclaramiento computacional para eliminar la luz proveniente de los planos desenfocados inherentes a las observaciones de campo ancho. El sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM también incluye un objetivo cryo 50x / 0,9 NA. A diferencia de los objetivos de larga distancia de trabajo que se utilizan habitualmente ,  este objetivo se ha diseñado específicamente para la toma de imágenes de alta resolución de muestras vitrificadas. Usted se beneficiará de la mejor identificación y visualización de los detalles pequeños de las estructuras de las células junto con la velocidad y la facilidad de uso de un microscopio de campo ancho.

Imagen interactiva: células HeLa en rejillas con revestimiento de Quantifoil R2 dorado/2 G200F1.
Las células se transfectaron con GFP-TGN46 (red trans Golgi) y mCherry-Lifeact (actina F). Los núcleos se tiñeron con Hoechst 33342. Muestra por cortesía Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, Londres (Reino Unido).

Flujo de trabajo sencillo y reproducible

Si necesita encontrar la región de interés con rapidez en el microscopio electrónico, podrá marcarla con facilidad y exportar las coordenadas durante la transferencia de la muestra. El intuitivo software le guía por el flujo de trabajo para que obtenga los resultados que necesita para llevar a cabo con éxito su estudio en ME de forma rápida y eficiente. Para alta resolución y alto contraste, procese a posteriori las imágenes con THUNDER.

Benefíciese de:

  • Localización y captura de datos fáciles y precisos: el software le guía paso por paso por el flujo de trabajo para la toma de imágenes
  • Imágenes sin complicaciones: simplemente marque la región de interés y el software captura de forma automática y crea con precisión las imágenes en forma de mosaicos
  • Procesamiento a posteriori con THUNDER para tomar imágenes nítidas y de alta resolución
  • Resultados rápidos y reproducibles: le permite guardar y abrir configuraciones de experimentos
Sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM
Imagen con fluorescencia de una célula sobre una rejilla TEM visualizada y marcada con el EM Cryo CLEM.
La misma célula visualizada y relocalizada con el marcador de coordenadas, aquí en el Thermo Scientific Aquilos.

Fácilmente relocalizable con la transferencia de coordenadas mediante la criomicroscopía óptica

El software integrado del sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM no solo le guía por el flujo de trabajo de toma de imágenes, sino que también exporta los datos de las imágenes originales y las coordenadas asociadas con solo un clic. Podrá reubicar de inmediato la región de interés celular en su microscopio electrónico preferido y comenzar a estudiar la ultraestructura de la muestra.

Si decide trabajar con el Thermo Fisher Scientific MAPS EM, podrá además beneficiarse de nuestro flujo de trabajo para criotomografía electrónica desarrollado de forma conjunta. El flujo de trabajo garantiza una integración plena, desde la vitrificación con nuestro EM GP2 hasta la reconstrucción de imágenes 3D con el Thermo Scientific Krios™ G3i cryo TEM. 

Imágenes interactivas: Selección y relocalización de coordenadas. Imagen con fluorescencia de una célula sobre una rejilla TEM visualizada y marcada de forma selectiva. La misma célula visualizada y relocalizada gracias al marcador de coordenadas, aquí en el Thermo Scientific Aquilos.

Mantenimiento de las condiciones criogénicas 

Para maximizar la probabilidad de obtener buenos resultados en los experimentos, el sistema especial de cartucho y el cryo-stage cerrado garantizan que su muestra permanezca vitrificada. Este sistema minimiza las posibles contaminaciones durante el proceso de carga y transferencia, incluso durante la toma de imágenes de time-lapse largos.

Cómo funciona

El sistema de cartuchos (1) permite manipular de forma segura y rápida la muestra. El mecanismo de prensa y clip acelera el rendimiento del flujo de trabajo y el tiempo de carga de las rejillas en el cryo-stage.

Una lanzadera que se acopla a al cryo-stage(2) protege la criomuestra manteniendo la temperatura óptima. 

El cryo-stage(3) con tapa sincronizada para crio-objetivo evita la contaminación ambiental de la muestra manteniéndola en una sobrepresión estable de gas N2

Carga de un cartucho con rejilla en el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM con el acoplamiento de lanzadera

Escoja el flujo de trabajo apropiado para su estudio biológico

El sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM es una solución multiuso flexible que se puede implementar en distintos flujos de trabajo con microscopios electrónicos.

Escoja el flujo de trabajo óptimo para su experimento en función del tipo de investigación biológica para obtener las respuestas que necesita. Para obtener más información sobre las soluciones para flujos de trabajo en investigaciones en ciencias de la vida, descargue nuestro folleto sobre flujos de trabajo.

Flujo de trabajo Cryo CLEM

Con este flujo de trabajo puede analizar la estructura en alta resolución de muestras de crioultramicrotomía. Vitrifique por alta presión y lleve a cabo la crioultramicrotomía de sus muestras. Después, el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM le ayuda a identificar la región de interés antes de tomar imágenes de microscopía electrónica de transmisión. El flujo de trabajo es adecuado para muestras de tejidos. 

(1) Vitrifique por alta presión (EM ICE)
(2) Crioultramicrotomía (EM UC7 / EM FC7)
(3) Identificación de la región de interés (sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM)
(4) Toma de imágenes en el TEM

Flujo de trabajo de estudio de lamellas sobre rejillas TEM vitrificadas - Usando el Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM

Analice estructuras proteicas en su entorno celular original. Las muestras se vitrifican por inmersión y la región de interés se talla para obtener las imágenes en el criomicroscopio electrónico. 

(1) Vitrificación por inmersión (EM GP2)
(2) Identificación de la región de interés (sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM)
(3) Tallado y recubrimiento con el Thermo Fisher Aquilos cryo FIB SEM
(4) Toma de imágenes en el TEM

Flujo de trabajo de estudio de lamellas sobre rejillas TEM vitrificadas - Usando el Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM

Flujo de trabajo de estudio de lamellas sobre rejillas TEM vitrificadas - para todos los fabricantes de FIB-SEM

Analice estructuras proteicas en su entorno celular original. Las muestras se vitrifican por inmersión y la región de interés se talla para obtener las imágenes en el criomicroscopio electrónico. 

(1) Vitrificación por inmersión (EM GP2)
(2) Identificación de la región de interés (sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM)
(3) Criotransferencia (EM VCM)
(4) Recubrimiento (EM ACE600 / EM ACE900)
(5) Criotransferencia (EM VCT500)
(6) Tallado en el FIB
(7) Toma de imágenes en el TEM 

Flujo de trabajo de estudio de lamellas sobre rejillas TEM vitrificadas - para todos los fabricantes de FIB-SEM excepto el Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM

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