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Microdisección láser Leica LMD Software

Corte de muestras

Los sistemas de microdisección láser de Leica (LMD6000, LMD6500 y LMD7000) permiten al usuario marcar regiones de interés para disecar fácilmente. En este video, se muestra el sencillo software Leica LMD (versión 7.3) para marcar células individuales con la herramienta de mano alzada, con elipses, círculos o rectángulos predefinidos, y para recolectar las células marcadas mediante disección con el láser de Leica LMD7000.

(objetivo: 40x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Corte y recuperación de muestras

Los sistemas de microdisección láser de Leica incorporan el exclusivo y patentado desplazamiento láser mediante sistema óptico. El desplazamiento láser mediante sistema óptico permite la aplicación directa del láser sobre una muestra, con tan solo un clic del mouse o directamente al tocar la pantalla táctil con un lápiz. En este video, se muestra la posibilidad de usar el láser en vivo y en tiempo real para recuperar una célula individual que no se diseccionó por completo.

(objetivo: 40x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Inspección del dispositivo de recolección

Los sistemas de microdisección láser de Leica están basados en un microscopio vertical. El material de disección cae por efecto de la gravedad en un dispositivo de recolección. En este video, se muestra la inspección a través de la tapa, lo que permite visualizar el material de disección en el dispositivo de recolección; en este caso, un tubo de PCR de 0,5 ml.

(objetivo: 40x y 20x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Creación de una vista general rápida de la muestra

Los sistemas de microdisección láser de Leica ofrecen, dentro de las funciones generales del software, una vista general rápida e inteligente de la muestra para una mejor orientación y navegación a través de esta. En este video, se muestra la creación de una vista general rápida de la muestra de un portaobjetos completo. La vista general de la muestra se visualiza en una ventana independiente y también en la zona “Slide Holder” (Portaobjetos) de la ventana principal del software Leica LMD.

(objetivo: 1,25x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Creación de una vista general de una región definida

Los sistemas de microdisección láser de Leica ofrecen, dentro de las funciones generales del software, la posibilidad de crear una vista general de una región de interés. En este video, se muestra la creación de este tipo de vista general y cómo guardarla como un archivo de imagen.

(objetivo: 10x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Calibración del láser

Los sistemas de microdisección láser de Leica incorporan el exclusivo y patentado desplazamiento láser mediante sistema óptico. En caso necesario, el láser se (re)alinea de forma sencilla. En este video, se muestra el cómodo y rápido procedimiento de calibración del láser LMD.

(objetivo: 10x; contraste: BF)

Ajuste del láser

Los sistemas de microdisección láser de Leica están equipados con un láser UV de estado sólido, alta potencia y gran flexibilidad. En este video, se muestra el ajuste del láser de un sistema LMD7000 a una muestra. Primero se restablecen los ajustes de fábrica del láser y después se ajustan los controles deslizantes “Power” (Potencia) del láser, “Aperture” (Apertura) del láser patentado, “Speed” (Velocidad), “Specimen Balance” (Balance de la muestra), “Head Current” (Corriente del cabezal) y “Pulse Frequency” (Frecuencia de pulso) a la muestra para conseguir una línea de corte fina y precisa, apta para la microdisección láser.

(objetivo: 40x; contraste: BF; muestra: embrión de rata)

Modo “Move + Cut” exclusivo de Leica

Solo los sistemas Leica LMD utilizan un enfoque láser para diseccionar áreas de interés. Esta función permite aplicar directamente el láser sin dibujar formas antes de que se aplique el láser de disección.

(objetivo: 40x; contraste BF; muestra: cerebro de ratón)

Disección de células individuales con el modo “Move + Cut”

El modo “Move + Cut” (Mover y cortar) se puede usar para diseccionar directamente células individuales o para recuperar áreas que no se diseccionaron por completo para la recolección. En este video, se muestra la obtención directa de células individuales con el objetivo 150x diseñado para las aplicaciones LMD (disección de células individuales, cromosomas, espermatozoides o bacterias).

(objetivo: 150x; contraste BF; muestra: cerebro de ratón)

Disección de células individuales e inspección a través de la tapa

Se pueden diseccionar y visualizar células individuales en el recolector después de la aplicación satisfactoria de LMD.

(objetivo: 63x; contraste BF; muestra: cerebro de ratón)

Aplicación directa de LMD en modo de fluorescencia

La aplicación LMD puede realizarse en combinación con los sistemas de filtro optimizados LMD. Al igual que en el campo claro, el láser puede aplicarse directamente con “Move + Cut” (Mover y cortar), o se puede definir una forma de disección. Desde luego, una inspección a través de la tapa en fluorescencia permite visualizar el material disecado en el dispositivo de recolección. Un cambio de GUI a un fondo de software más oscuro (V7.5) es mejor para la vista y proporciona un espacio de trabajo conveniente.

(objetivo: 40x; fluorescencia de contraste; muestra: riñón)

La nueva herramienta punto a punto rompe barreras

La nueva herramienta punto a punto permite definir formas para la disección que exceden el campo visual y mantiene el área marcada en pantalla. La herramienta es extremadamente potente para la obtención de zonas tumorales de gran tamaño, subestructuras como el material vegetal y todo el tejido del hipocampo. La visualización en gran aumento permite el marcado perfecto para obtener resultados puros sin contaminar las células o los tejidos circundantes.

(objetivo: 20x; contraste: BF; muestra: cerebro de ratón)

Cómo crear una vista general de una zona específica

Además de contar con la función “Fast Specimen Overview” (Vista general rápida de la muestra), el sistema Leica LMD también permite obtener una vista general específica. Las vistas generales de la muestra son útiles para orientarla y encontrar los objetivos con más rapidez.

(objetivo: 5x; contraste: BF; muestra: cerebro de ratón)

Vistas generales de la muestra como herramienta de navegación

Las vistas generales de la muestra creadas dentro del software LMD pueden utilizarse para una mejor orientación y una navegación directa a través de la muestra, incluida la guía de platina y el cambio de aumento.

(objetivo: 5x, 20x; contraste: BF; muestra: cerebro de ratón)

Software AVC de reconocimiento de patrones para los sistemas Leica LMD

Las vistas generales de la muestra creadas dentro del software LMD pueden utilizarse para una mejor orientación y una navegación directa a través de la muestra, incluida la guía de platina y el cambio de aumento.

(objetivo: 5x, 20x; contraste: BF; muestra: cerebro de ratón)