L’imagerie en temps de vie de fluorescence : la fluorescence plus que la couleur

La microscopie en temps de vie de fluorescence (FLIM) désigne une technique d’imagerie qui utilise les propriétés inhérentes des colorants fluorescents. Chaque molécule fluorescente présente non seulement des spectres d’émission caractéristiques, mais aussi une durée de vie propre qui reflète le temps que le fluorophore passe à l’état excité avant d’émettre un photon. L’analyse de la durée de vie fournit des informations venant compléter les mesures standard de l’intensité de la fluorescence.

Historiquement, l’imagerie en durée de vie est une technique lente, complexe et spécialisée. Son utilisation se limitait à des microscopistes ou des physiciens expérimentés. Leica Microsystems est à la pointe des progrès actuels en matière d’imagerie en temps de vie de fluorescence. Nos systèmes rendent l’imagerie en temps de vie plus rapide et plus facile à utiliser qu' auparavant, apportant ses avantages aux expériences d’imagerie confocale quotidiennes.

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Renforcer l’imagerie confocale avec des informations sur le temps de vie de fluorescence.

L’imagerie en temps de vie de fluorescence fournit des informations supplémentaires qui peuvent vous aider à améliorer la qualité de votre imagerie confocale. Elle peut s’avérer particulièrement utile pour discriminer les sondes de fluorescence dont les spectres d’émission fluorescence se chevauchent, ou pour éliminer les signaux fluorescents indésirables.

La microscopie en temps de vie de fluorescence (FLIM) est une application cruciale pour la mesure et la quantification des données d’imagerie. Comme l’information sur la durée de vie est indépendante de la concentration en fluorophores, elle est extrêmement bien adaptée à l’imagerie fonctionnelle. L’imagerie fonctionnelle va au-delà de l’enregistrement traditionnel de la localisation et de la concentration des espèces moléculaires, de même qu’elle permet d’approfondir l’étude de la fonction moléculaire, des interactions et de leur environnement.

En outre, la microscopie en temps de vie de fluorescence (FLIM) permet de nouvelles applications d’imagerie, telles que l’utilisation de biosenseurs pour étudier le microenvironnement de la cellule ou l’imagerie basée sur les propriétés fluorescentes intrinsèques de votre échantillon.

Pour en savoir plus sur la microscopie en temps de vie de fluorescence (FLIM) et ses applications d’imagerie avec le système SP8 FALCON, consultez cette note d’application.

Le contraste de durée devie du sépale de mûre argentée permet de séparer différentes structures dans l'échantillon. L’image d’intensité (image jaune) ne montre aucune structure spécifique, tandis que le FastFLIM (image à l’échelle de l’arc-en-ciel) et les images résolues en temps de vie (RGB, image à trois composantes) donnent des indications sur les différentes parties de l’échantillon. La fin de la vidéo montre les trois structures déterminées par l'ajustement de la durée de vie divisées en trois canaux (RVB).

Établir la norme en matière d’imagerie en temps de vie

Avec le lancement de la technologie d’imagerie en temps de vie rapide et entièrement intégrée - le SP8 FALCON - Leica Microsystems a défini une référence pour l’avenir. Leica Microsystems a reçu le prestigieux Award R&D 100 pour le système SP8 FALCON. Ce prix récompense l’approche innovante de cette solution en matière d’imagerie en temps de vie.

Les solutions de Leica Microsystems pour la microscopie en temps de vie de fluorescence (FLIM) vous permettent d’exploiter la puissance de la durée de vie de la fluorescence et ainsi d'extraire une nouvelle dimension d’informations de chaque échantillon dans le cadre de votre expérience confocale. Étudiez la physiologie cellulaire et découvrez la dynamique cellulaire avec FALCON. Accédez immédiatement à des informations fonctionnelles telles que l’état métabolique, le pH et la concentration en ions grâce au potentiel de Tausense pour STELLARIS.

Nos plateformes simplifiées et intégrées ouvriront de nouvelles perspectives pour vos expériences, vous permettant ainsi d’exploiter de nouvelles réponses à vos questions expérimentales.