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SP8 FALCON Confocal Microscopes Leica Leica Microsystems

Le point de vue des experts

"Nous avons examiné attentivement le Leica SP8 FALCON. Il est aussi précis que les solutions TCSPC dédiées, mais offre une interface intuitive et une vitesse extrême.” „Selon moi, il apporte un second souffle à l'imagerie fonctionnelle." - Professeur Kees Jalink, Dr., Institut de cancérologie des Pays-Bas, Amsterdam

"La nouvelle solution Leica FLIM/FCS renforcera leur applicabilité: extraordinairement rapide, flexible et facile d'utilisation."Prof. Christian Eggeling, Université d'Oxford

"La plupart des instruments FLIM sont des accessoires, c'est un changement total de perspective : avoir un système parfaitement intégré, très puissant !" - Prof. Enrico Gratton, UCI Samueli, Université de Californie, Irvine

"Le Leica SP8 FALCON est le premier système commercial qui offre une imagerie confocale et résolue en temps de vie de fluorescence que j’envisage d'utiliser dans une plateforme" - Professeur et doyen Scott E. Fraser, Dr., Université de Californie du Sud, Los Angeles

Suivez les interactions moléculaires avec la méthode FLIM-FRET

La recherche actuelle étudie comment les molécules interagissent entre elles dans de nombreux mécanismes biologiques Les études biomédicales fructueuses utilisent aujourd’hui la méthode FLIM-FRET pour explorer ces interactions.

Le SP8 FALCON est une nouvelle référence pour l’imagerie FLIM. LeFRET est aujour’hui accessible à l’echelle des dynamiques cellulaires . Vous pouvez acquérir et interpréter des données FRET lors de vos expériences quotidiennes.

Caged cAMP dans les cellules HeLa exprimant EPAC mT2-dVenus FRET sensor. Réponse EPAC à la libération cAMP par UV (région centrale). Séquence vidéo enregistrée à 4 images par seconde. Dimensions de l'image: 256 x 256 pixels. Échelle graphique de couleur (temps de vie): ns. Avec l'aimable autorisation de Kees Jalink, Bram van den Broek, NKI Amsterdam.

Oscillations de calcium après stimulation par le peptide activant la thrombine. La réaction dans les cellules individuelles est signalée comme changement du temps de vie. Séquence vidéo acquise à 4 images par seconde. Dimensions de l'image: 256 x 256 pixels. Échelle graphique de couleur (temps de vie): ns. Avec l'aimable autorisation de Kees Jalink, Bram van den Broek, NKI Amsterdam.

Observer les changements subtiles et rapides grâce aux biosenseurs

Les biosenseurs sont des reporters performants de l'activité métabolique qui signalent les changements s'opérant dans les mécanismes, le pH et le micro-environnement.

Le SP8 FALCON permet d'accéder à ces informations contenues dans le temps de vie de fluorescence, y compris pour les événements extrêmement rapides tels que la dynamique potentielle de la membrane. Ces informations complètent l'imagerie spectrale déjà performante fournie par le système SP8.

Imagerie métabolique plus fiable et plus sensible

L'autofluorescence constitue une nuisance dans l'imagerie conventionnelle. Le SP8 FALCON la transforme en une information précieuse. Vous pouvez désormais transformer l'autofluorescence en un messager de l'état métabolique, la différenciation cellulaire et le développement du cancer.

Par ailleurs, le SP8 FALCON permet un contraste d'imagerie dans les tissus vivants où le marquage fluorescent est souvent indéterminé ou détruit les conditions physiologiques.

Autofluorescence dans des cellules de mammifères dans des conditions non-physiologiques (pH 8,5). Le signal correspond aux changements dans la réserve endogène NAD/NADH. Le développement du stress oxydatif indique la baisse de la fluorescence résolue en temps de vie de fluorescence au fil du temps. Dimensions de l'image d'origine: 512 x 512 pixels. Échelle graphique de couleur (temps de vie): ns. Acquisition d'image deux photons avec le SP8 DIVE et le SP8 FALCON.
Intensity
FLIM

Séparation de fluorophores au-delà des options spectrales

Le marquage fluorescent est la méthode standard utilisée pour différencier les structures intracellulaires. La séparation spectrale est très puissante, mais parfois limitée quand les spectres d'émission sont trop proches.

Avec le SP8 FALCON, vous pouvez repousser cette limite en utilisant la dimension supplémentaire de la fluorescence résolue dans le temps de vie. Cela permet de séparer plusieurs sondes fluorescentes.

Profitez d'une plus grande liberté en combinant les options de la plateforme SP8. Parmi les options figurent l’excitation grâce au laser blanc, le répartiteur acousto-optique et la détection spectrale multicanale.

Image: Structures de cytosquelettes revelée par le contraste en temps de vie. Immunomarquage de la vimentine Alexa Fluor 555 (vert), et immunomarquage de la tubuline avec Alexa Fluor 546 (bleu). Bien que leurs spectres soient similaires, les fluorophores sont séparés au moyen des informations de la fluorescence résolue en temps de vie. Dimensions de l'image: 512 x 512 pixels.

L'imagerie SP8 FALCON intègre le "FAst Lifetime CONtrast"

Le microscope SP8 FALCON dépasse la vitesse limite du FLIM et ouvre la voie aux données en temps de vie rapide.

Jusqu'à présent, les informations fonctionnelles extraites des données de fluorescence résolue en temps de vie concernant des processus rapides étaient difficiles à obtenir en raison des contraintes techniques du FLIM. La vitesse d'acquisition du FLIM était au moins 10 fois plus lente que l'enregistrement de l'intensité confocale.

L'imagerie par contraste en temps de vie rapide SP8 FALCON vous permet de suivre les processus dynamiques dans les cellules au rythme approprié. Ces tâches sont permises par la nouvelle méthode de mesure du temps basée sur le TCSPC (comptage de photon unique corrélé en temps) combinée à des algorithmes intelligents permettant le traitement et l'analyse des données.

 

 

 

Image à canal unique de billes fluorescentes (magenta) dans une solution contenant de l'Alexa Fluor 555 (vert). La séparation de fluorophores basée sur la fluorescence résolue en temps de vie est possible à différentes vitesses, par exemple 16 images par seconde (en haut), 27 images par seconde (débit vidéo, au milieu) et 83 images par seconde (ultra-rapide, en bas). L'utilisation d'informations sur la durée de vie pour la séparation de colorants est nettement plus avantageuse que l'intensité (échelle de gris). Les séquences vidéo montrent l'ajustement pixel par pixel des composants de la durée de vie. Taille de l'image: 512 x 64 pixels. Échelle: 10 mm.
Acquisition simple d'échantillons complexes. Image mosaïque d'un embryon de souris à haute résolution composée de 722 mosaïques de 190 mégapixels. Données FLIM dotées de fluorescences caractéristiques résolues en temps de vie, (codage en couleur). Acquisition : 1:23 h. Analyse: 1:00 h

Imagerie multimodale complète

Jamais il n'a été aussi facile de combiner le FLIM avec d'autres modalités grâce au SP8 FALCON. Jusqu'à présent, les chercheurs devaient se débrouiller avec des câblages complexes et des transferts de fichiers fastidieux. Avec le SP8 FALCON, vous pouvez intégrer des informations sur la durée de temps de vie dans vos analyses confocales standard.

Le SP8 FALCON est entièrement intégré dans le logiciel d'acquisition et d'analyse LAS X. Il est capable d'enregistrer le FLIM dans quatre canaux spectraux simultanément et jusqu'à 10 canaux séquentiellement. Le SP8 FALCON vous permet d'accéder au contraste en temps de vie dans les piles d’images 3D, les time-laps, et même dans les mosaïques d’images.

Avec le nouveau LAS X NAVIGATOR, vous pouvez élargir votre zone d'observation jusqu'à 10 000 fois, ce qui assure un gain de temps précieux lors de l'identification de vos régions d'intérêt et de l'examen de vos échantillons d'une manière entièrement nouvelle.

Vos résultats en un clic

Le logiciel LAS X active le FLIM en quelques clics et fonctionne sur le principe d'imagerie spectrale de routine.

Même si vous utilisez la microscopie comme technique complémentaire, vous y trouvez l'essentiel et pouvez démarrer l'imagerie immédiatement.

Des fonctions plus spécialisées sont accessibles sous forme de guide et permettent d'automatiser les processus plussimplement.

Un seul clic pour rester concentré sur votre recherche : le SP8 FALCON piloté par le logiciel LAS X
Haut: Sytème polyvalent SP8 (à gauche), nanoscopie (au milieu), super-résolution (à droite)
Bas: CARS (à gauche), feuille de lumière (au milieu), multiphotons (à droite)

Membre de la gamme TCS SP8

Le SP8 FALCON est le nouvel élément venant enrichir le système confocalSP8 de Leica Microsystems. Celui-ci peut être configurée pour multiplier les méthodes de recherche, de la microscopie confocale à super-résolution jusqu'à la nanoscopie STED.

Les utilisateurs profitent ainsi d'un système polyvalent protégeant leurs investissements.

Tous les instruments du système SP8 sont ouverts et s'adaptent aux domaines de recherche de l'utilisateur, aujourd'hui et demain.