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Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM est un élément clé de nos workflows cryo. Je ne veux pas le rater.

Dr Yannick Schwab, chef d’équipe et responsable du centre de microscopie électronique, EMBL Heidelberg (Allemagne)

Identifiez et donnez une image plus claire de votre région d’intérêt avec THUNDER

Pour une visualisation optimale des structures cellulaires, le THUNDER Imager EM Cryo CLEM combine un objectif cryo à haute résolution avec la technologie THUNDER de Leica Microsystems. Il en résulte des images nettes et sans flou.

THUNDER utilise la méthode innovante de Computational Clearing de Leica pour éliminer le flou hors focus qui peut se produire avec l’observation en champ large. Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM comprend également un objectif 50x/0,9 NA. Contrairement aux objectifs à longue distance de travail couramment utilisés,  cette lentille a été spécialement conçue pour l’imagerie haute résolution d’échantillons vitrifiés. Vous bénéficiez d’une meilleure identification et visualisation des détails fins des structures cellulaires ainsi que de la rapidité et de la facilité d’utilisation d’un microscope à champ large.

Image interactive :  cellules HeLa plaquées sur des grilles de détecteurs G200F1 recouvertes d’or Quantifoil R2/2.
Les cellules ont été transfectées avec le GFP-TGN46 (réseau trans Golgi) et le mCherry-Lifeact (F-actine). Les noyaux ont été colorés avec Hoechst 33342. Échantillon fourni avec l’aimable autorisation de Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, Londres (Royaume-Uni).

Cellules HeLa sans THUNDER Imager Cellules HeLa avec THUNDER Imager

Workflow simple et reproductible

Si vous avez besoin de trouver rapidement votre région d’intérêt au microscope électronique, vous pouvez facilement choisir de la marquer et d’exporter les coordonnées lors du transfert de l’échantillon. Le logiciel intuitif vous guide tout au long du déroulement du workflow afin que vous puissiez obtenir rapidement et efficacement les résultats dont vous avez besoin pour soutenir une investigation au Microscope Électronique réussie. Pour des résultats à haute résolution et sans flou, traitez ensuite votre image avec THUNDER.

Vos avantages :

  • Ciblage et capture de données faciles et précis - le logiciel vous guide étape par étape à travers le workflow d’imagerie
  • Imagerie sans problème : il suffit de marquer votre région d’intérêt et le logiciel capture et assemble automatiquement avec précision les images mosaïques
  • Post-traitement avec THUNDER pour des images à haute résolution et sans flou
  • Résultats rapides et reproductibles - vous pouvez enregistrer et rappeler des configurations d’expérience complètes
THUNDER Imager EM Cryo CLEM
THUNDER Imager EM Cryo CLEM

Récupération facile grâce au transfert de coordonnées par cryo-microscopie optique

Le logiciel intégré du THUNDER Imager EM Cryo CLEM ne vous guide pas seulement dans votre workflow d’imagerie, il exporte également les données d’image originales et les coordonnées associées en un seul clic. Vous pouvez immédiatement déplacer la région cible cellulaire dans votre microscope électronique préféré et commencer votre investigation de l’ultrastructure de l’échantillon.

Si vous choisissez de travailler avec Thermo Fisher Scientific MAPS EM, vous pouvez également bénéficier de notre workflow de tomographie électronique cryo développé conjointement. Le workflow assure une intégration complète, de la vitrification avec notre EM GP2 à la reconstruction d’images 3D avec le Thermo Scientific Krios™ G3i cryo TEM. 

Image interactive :  sélection et récupération des coordonnées. Image de fluorescence d’une cellule sur une grille de Microscopie Électronique visualisée et marquée de manière sélective. La même cellule, visualisée et déplacée avec le marqueur de coordonnées, ici, sur le Thermo Scientific Aquilos.

Image de fluorescence d’une cellule sur une grille de Microscope Électronique visualisée et marquée de manière sélective avec le EM Cryo CLEM. La même cellule, visualisée et récupérée avec le marqueur de coordonnées, ici, sur le Thermo Scientific Aquilos.

Maintien des conditions cryo 

Pour maximiser la probabilité d’un résultat expérimental réussi, le système unique de cartouche et la platine cryo fermée garantissent que votre échantillon reste vitrifié. Ce système minimise le potentiel de contamination pendant le processus de chargement et de transfert et ce même lors des enregistrements d’images à long terme.

Comment cela fonctionne-t-il ?

Le système de cartouche (1) permet une manipulation sûre et rapide de l’échantillon. Le mécanisme de presse et de clip accélère le débit des échantillons et le temps de chargement de vos grilles dans la platine cryo.

Une station d’accueil de la navette (2) protège votre échantillon cryo en maintenant une température optimale. 

La platine cryo (3) avec un couvercle d’objectif synchronisé empêche la contamination de l’échantillon par l’air en le maintenant sous une surpression stable

Chargement d’une cartouche de grille dans le THUNDER Imager EM Cryo CLEM en utilisant la navette de transfert
Chargement d’une cartouche de grille dans le THUNDER Imager EM Cryo CLEM en utilisant la navette de transfert

Choisissez le workflow approprié à votre étude biologique

Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM est une solution polyvalente et flexible qui peut être mise en œuvre dans différents workflows de microscopie électronique.

Choisissez le workflow optimal pour votre expérience en rapport avec votre question de recherche biologique, afin d’obtenir les réponses dont vous avez besoin. Pour plus d’informations sur les solutions workflow pour la recherche en sciences de la vie, téléchargez notre brochure.

Segmentation of a cryo-electron tomogram, showing the native cellular environment around the nucleus. Proteasomes tether to Nuclear Pore Complexes (purple) at two distinct sites (orange: membrane-tethered proteasomes, yellow: basket-tethered proteasome blue: free proteasomes). The nuclear envelope (grey), ribosomes (black/white) and a mitochondrion (red, with rows of yellow ATP Synthases) are also shown.
Segmentation of a cryo-electron tomogram, showing the native cellular environment around the nucleus. Proteasomes tether to Nuclear Pore Complexes (purple) at two distinct sites (orange: membrane-tethered proteasomes, yellow: basket-tethered proteasome blue: free proteasomes). The nuclear envelope (grey), ribosomes (black/white) and a mitochondrion (red, with rows of yellow ATP Synthases) are also shown.

Flux de travail Cryo CLEM

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Flux de travail Cryo CLEM

Si vous souhaitez préparer des échantillons de tissus, ajoutez l'imageur THUNDER EM Cryo CLEM comme étape intermédiaire dans votre flux de travail Cryo CLEM.

Il vous permet d'identifier facilement la région d'intérêt et de préparer la lamelle à un endroit précis de l'échantillon.

(1) Cell positioning with PRIMO | (2) High pressure freezing (EM ICE) | (3) Cryo sectioning (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Imaging in the TEM
(1) Cell positioning with PRIMO | (2) High pressure freezing (EM ICE) | (3) Cryo sectioning (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Imaging in the TEM

Cryo On-Grid Lamella Workflow (a)

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Cryo On-Grid Lamella Workflow (a)

Pour obtenir des résultats fiables lors de l'analyse des structures protéiques dans leur environnement natif, utilisez le flux de travail entièrement intégré avec le MEB cryo-FIB de Thermo Fisher.

Sélectionnez les cellules les plus appropriées pour l'analyse avec le THUNDER Imager EM Cryo CLEM et transférez les coordonnées vers l'Aquilos de Thermo Scientific où vous pouvez les récupérer immédiatement. L'Aquilos surmonte les limites d'épaisseur et crée une fine couche de glace qui peut ensuite être examinée dans le MET.

Cryo On-Grid Lamella Workflow - Using the Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Milling and coating with the Thermo Fisher Aquilos cryo FIB SEM | (5) Imaging in the TEM
Cryo On-Grid Lamella Workflow - Using the Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Milling and coating with the Thermo Fisher Aquilos cryo FIB SEM | (5) Imaging in the TEM

Cryo On-Grid Lamella Workflow (b)

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Cryo On-Grid Lamella Workflow (b)

Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM peut être intégré dans tout flux de travail FIB-SEM.

Nos produits peuvent être connectés de manière transparente afin de garantir un transfert d'échantillons sûr tout au long du processus.

Cryo On-Grid Lamella Workflow - for all FIB-SEM suppliers except Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transfer (EM VCM) | (5) Coating (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transfer (EM VCT500) | (7) Milling in the FIB | (8) Imaging in the TEM
Cryo On-Grid Lamella Workflow - for all FIB-SEM suppliers except Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transfer (EM VCM) | (5) Coating (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transfer (EM VCT500) | (7) Milling in the FIB | (8) Imaging in the TEM
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