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Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM est un élément clé de nos workflows cryo. Je ne veux pas le rater.

Dr Yannick Schwab, chef d’équipe et responsable du centre de microscopie électronique, EMBL Heidelberg (Allemagne)

Cellules HeLa sans THUNDER Imager
Cellules HeLa avec THUNDER Imager

Identifiez et donnez une image plus claire de votre région d’intérêt avec THUNDER

Pour une visualisation optimale des structures cellulaires, le THUNDER Imager EM Cryo CLEM combine un objectif cryo à haute résolution avec la technologie THUNDER de Leica Microsystems. Il en résulte des images nettes et sans flou.

THUNDER utilise la méthode innovante de Computational Clearing de Leica pour éliminer le flou hors focus qui peut se produire avec l’observation en champ large. Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM comprend également un objectif 50x/0,9 NA. Contrairement aux objectifs à longue distance de travail couramment utilisés,  cette lentille a été spécialement conçue pour l’imagerie haute résolution d’échantillons vitrifiés. Vous bénéficiez d’une meilleure identification et visualisation des détails fins des structures cellulaires ainsi que de la rapidité et de la facilité d’utilisation d’un microscope à champ large.

Image interactive :  cellules HeLa plaquées sur des grilles de détecteurs G200F1 recouvertes d’or Quantifoil R2/2.
Les cellules ont été transfectées avec le GFP-TGN46 (réseau trans Golgi) et le mCherry-Lifeact (F-actine). Les noyaux ont été colorés avec Hoechst 33342. Échantillon fourni avec l’aimable autorisation de Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, Londres (Royaume-Uni).

Workflow simple et reproductible

Si vous avez besoin de trouver rapidement votre région d’intérêt au microscope électronique, vous pouvez facilement choisir de la marquer et d’exporter les coordonnées lors du transfert de l’échantillon. Le logiciel intuitif vous guide tout au long du déroulement du workflow afin que vous puissiez obtenir rapidement et efficacement les résultats dont vous avez besoin pour soutenir une investigation au Microscope Électronique réussie. Pour des résultats à haute résolution et sans flou, traitez ensuite votre image avec THUNDER.

Vos avantages :

  • Ciblage et capture de données faciles et précis - le logiciel vous guide étape par étape à travers le workflow d’imagerie
  • Imagerie sans problème : il suffit de marquer votre région d’intérêt et le logiciel capture et assemble automatiquement avec précision les images mosaïques
  • Post-traitement avec THUNDER pour des images à haute résolution et sans flou
  • Résultats rapides et reproductibles - vous pouvez enregistrer et rappeler des configurations d’expérience complètes
THUNDER Imager EM Cryo CLEM
Image de fluorescence d’une cellule sur une grille de Microscope Électronique visualisée et marquée de manière sélective avec le EM Cryo CLEM.
La même cellule, visualisée et récupérée avec le marqueur de coordonnées, ici, sur le Thermo Scientific Aquilos.

Récupération facile grâce au transfert de coordonnées par cryo-microscopie optique

Le logiciel intégré du THUNDER Imager EM Cryo CLEM ne vous guide pas seulement dans votre workflow d’imagerie, il exporte également les données d’image originales et les coordonnées associées en un seul clic. Vous pouvez immédiatement déplacer la région cible cellulaire dans votre microscope électronique préféré et commencer votre investigation de l’ultrastructure de l’échantillon.

Si vous choisissez de travailler avec Thermo Fisher Scientific MAPS EM, vous pouvez également bénéficier de notre workflow de tomographie électronique cryo développé conjointement. Le workflow assure une intégration complète, de la vitrification avec notre EM GP2 à la reconstruction d’images 3D avec le Thermo Scientific Krios™ G3i cryo TEM. 

Image interactive :  sélection et récupération des coordonnées. Image de fluorescence d’une cellule sur une grille de Microscopie Électronique visualisée et marquée de manière sélective. La même cellule, visualisée et déplacée avec le marqueur de coordonnées, ici, sur le Thermo Scientific Aquilos.

Maintien des conditions cryo 

Pour maximiser la probabilité d’un résultat expérimental réussi, le système unique de cartouche et la platine cryo fermée garantissent que votre échantillon reste vitrifié. Ce système minimise le potentiel de contamination pendant le processus de chargement et de transfert et ce même lors des enregistrements d’images à long terme.

Comment cela fonctionne-t-il ?

Le système de cartouche (1) permet une manipulation sûre et rapide de l’échantillon. Le mécanisme de presse et de clip accélère le débit des échantillons et le temps de chargement de vos grilles dans la platine cryo.

Une station d’accueil de la navette (2) protège votre échantillon cryo en maintenant une température optimale. 

La platine cryo (3) avec un couvercle d’objectif synchronisé empêche la contamination de l’échantillon par l’air en le maintenant sous une surpression stable

Chargement d’une cartouche de grille dans le THUNDER Imager EM Cryo CLEM en utilisant la navette de transfert

Choisissez le workflow approprié à votre étude biologique

Le THUNDER Imager EM Cryo CLEM est une solution polyvalente et flexible qui peut être mise en œuvre dans différents workflows de microscopie électronique.

Choisissez le workflow optimal pour votre expérience en rapport avec votre question de recherche biologique, afin d’obtenir les réponses dont vous avez besoin. Pour plus d’informations sur les solutions workflow pour la recherche en sciences de la vie, téléchargez notre brochure.

Workflow Cryo CLEM

Grâce à ce flux de travail, vous pouvez analyser l’ultrastructure haute résolution des coupes cryo d’échantillons. Congélation à haute pression et coupes cryo de vos échantillons. Ensuite le THUNDER Imager EM Cryo CLEM vous aide à identifier la région d’intérêt avant l’imagerie cryo MET. Le workflow est adapté aux échantillons de tissus. 

(1) Congélation à haute pression (EM ICE)
(2) Coupe cryo (EM UC7/EM FC7)
(3) Identification de la région d’intérêt (THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(4) Imagerie dans le MET

Workflow cryo sur grille - Utilisation du MEB Aquilos cryo-FIB de Thermo Fisher

Analysez les structures des protéines dans leur environnement cellulaire natif. Les échantillons sont congelés par plongée et la région d’intérêt est polie pour l’imagerie dans le cryo MET. 

(1) Congélation par plongée (EM GP2)
(2) Identification de la région d’intérêt (THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(3) Polissage et revêtement avec le MEB Aquilos cryo-FIB de Thermo Fisher
(4) Imagerie dans le MET

Workflow cryo sur grille - Utilisation du MEB Aquilos cryo-FIB de Thermo Fisher

Workflow cryo sur grille - pour tous les autres fournisseurs de FIB-MEB

Analysez les structures des protéines dans leur environnement cellulaire natif. Les échantillons sont congelés par plongée et la région d’intérêt est polie pour l’imagerie dans le cryo MET. 

(1) Congélation par plongée (EM GP2)
(2) Identification de la région d’intérêt (THUNDER Imager EM Cryo CLEM)
(3) Transfert (EM VCM)
(4) Revêtement (EM ACE600/EM ACE900)
(5) Transfert (EM VCT500)
(6) Polissage dans le FIB
(7) Imagerie dans le MET 
 

Workflow cryo sur grille - pour tous les fournisseurs de FIB- MEB sauf Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB MEB

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