극저온 전자 단층 촬영술

극저온 전자 단층 촬영술(CryoET)는 세포 환경 내의 생체 분자를 1 nm 이하의 엄청난 해상도로 관찰하는 데 사용되며, 분자 사회학을 이해하는 새로운 창을 엽니다. 이러한 척도는 별도의 표지 없이도 개별 단백질을 형상에 따라 단독으로 식별할 수 있는 수준입니다. 하지만 1 nm 해상도 이하의 영상촬영에는 중요한 문제가 있습니다. 즉, 관심 영역을 정확하게 찾고 타겟팅해야 합니다.

Leica Microsystems의 최첨단 cryoET 솔루션은 신속한 고해상도 영상촬영이 가능하고, 이미지 데이터를 정밀하게 전송하면서 작업 중 최적의 극저온 조건을 유지할 수 있습니다.

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극저온 전자 단층 촬영술이란 무엇입니까?

극저온 전자 단층 촬영술(또는 전자 극저온 단층 촬영술)을 사용하면 원래의 기능 상태에서 3차원 분자 해상도로 단백질-단백질 상호 작용을 분석할 수 있습니다. 샘플은 일련의 제어된 위치로 기울어지면서 여러 개의 2차원 이미지로 영상촬영됩니다. 이미지 "슬라이스"를 결합하여 샘플을 3D로 재구성합니다.

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일반적인 CryoET 작업 중 발생하는 문제는 무엇입니까?

일반적인 CryoET 작업과 관련된 가장 큰 문제는 영상촬영할 세포 또는 단백질을 함유하는 관심 영역을 정확하게 식별하는 과정의 어려움입니다. 타겟팅이 반복적으로 실패하면 시간이 소비되는 과정을 반복해야 하기 때문에 고가의 전자 현미경(EM) 영상촬영 시간을 허비하게 됩니다. 또 다른 2가지 문제는 시료 품질 및 얼음 두께를 일관되게 확보해야 한다는 것과 극저온 TEM으로 전달하기 전에 시료를 적절하게 유리화시켜야 한다는 것입니다.

CryoET 작업의 단게는 어떻게 됩니까?

이 기술은 전자 현미경 그리드에 놓인 샘플 준비와 관계되며 액체 질소에 빠르게 담궈 냉동시킨 다음 샘플을 유리화하고 얼음 결정 형성을 방지합니다.

고해상도 극저온 단층 촬영을 수행하려면 영상촬영된 시료의 슬라이스 두께가 300 nm 이하여야 합니다. 세포 몸체와 같은 시료의 "두꺼운" 부분을 관찰하려면 샘플이 얇아야 합니다. 냉동미세절단 외에도 전용 또는 다중 형식 극저온 스캐닝 전자 현미경을 사용을 위한 집속 이온빔(FIB) 밀링이 선택 가능한 방법입니다. 2개의 이온빔 창을 배치하여 Cryo ET 촬영술이 가능하도록 약 200 nm의 두꺼운 얼음 시트(박층)의 관심 영역을 생성합니다.

이제 준비된 샘플은 극저온 전송 전자 현미경으로 스캔할 수 있으며, 나중에 데이터 재구성 절차를 통해 2D 이미지를 하나의 3D 모델로 재구성해야 합니다.

극저온 광학 현미경으로 CryoET 관련 문제를 해결하는 방법

극저온 광학 현미경은 2가지 방법으로 CryoET 작업에 긍정적으로 기여할 수 있습니다.

첫째, 광학 현미경은 샘플 품질을 평가하도록 돕습니다. 극저온 광학 현미경은 샘플의 냉동 품질과 얼음 두께, 추가 처리를 위해 샘플 분포가 최적화되었는지 여부를 빠르게 파악할 수 있습니다. Leica의 극저온 솔루션을 사용하며 이러한 단계에서 샘플을 안전하고 생존 가능하도록 유지할 수 있습니다.

두 번째로, 탁월한 작업 효율성을 전달ㄹ하는 극저온 광학 현미경의 놀라운 잠재력은 많은 시간과 비용이 소비되는 CryEM 촬영을 시작하기 전에 관심 구조를 더 정밀하게 타겟팅할 수 있다는 것입니다. Leica의 극저온 광학 현미경 솔루션을 통해 다음 단계의 EM 촬영을 위해 타겟팅된 구조의 이미지 및 좌표를 내보낼 수 있어 EM 영상촬영 시간을 대폭 감소시킵니다.

Coral Cryo 소개: 가장 효율적인 CryoET 작업 시스템

Leica의 전문가용 Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층 촬영 솔루션을 통해 샘플의 생존 가능성을 보장하고, 고품질 조사가 허용하고, 정밀하고 신뢰할 수 있는 3D 타게팅 메커니즘을 제공함으로써 일반적인 문제를 극복할 수 있습니다. 최첨단 CryoET 타겟팅 소프트웨어와 결합되고 cryo FIB 또는 VCT 스테이지와의 원활한 통합 및 전송 옵션을 다양하게 제공할 수 있으며, 극저온 스테이지 및 셔틀을 포함한 당사의 최적화된 하드웨어를 사용해보십시오.

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EM Cryo CLEM THUNDER Imager

THUNDER Imager EM Cryo CLEM은 광디지털 THUNDER 기술을 특징으로 하는 초저온 광학 현미경입니다. 구조 생물학의 성공적인 실험 연구에 필요한 이미지 데이터를 제공하고 초저온 환경을 유지합니다. 흐림 현상 없는 고해상도 THUNDER 기술 덕분에 관심 영역의 세포 구조를 정밀하게 식별하고, 시료를 EM으로 원활하게 이동할 수 있습니다.

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Thunder Imager 없이 촬영한 HeLa 세포

Thunder Imager로 촬영한 HeLa 세포

F-actin 염색제(mcherry), TGN46 (GFP) 및 DNA(Hoechst 33342) 포함 HeLa. 샘플은 Dr. Marie-Charlotte Domart & Dr. Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, London UK 제공

극저온 전자 단층 촬영 제품

응용 분야로 필터링
Imaging Microhub Mica

Mica

Mica. 하나의 시스템에서 간편하게 발견할 수 있습니다 동시 4색 광학, 공초점 해상도, AI 지원 분석.

멀티플렉스 이미징 솔루션 Cell DIVE

Cell DIVE

공간 바이오마커 매핑을 제공하는 하이퍼플렉스 이미징 기술

[Translate to korean:] Scientific CMOS camera K8

K8

사이언티픽 CMOS 카메라 - 생명과학 이미징 애플리케이션 및 분석용

THUNDER Imager EM Cryo CLEM

THUNDER Imager EM Cryo CLEM으로 세포 구조를 정밀하게 식별하고, 상관 워크플로우를 통해 좌표, 이미지 및 샘플을 원활하고 안전하게 전송할 수 있습니다.

THUNDER Imager Tissue

THUNDER Imager Tissue

THUNDER Imager Tissue에서는 신경 과학 및 조직학 연구에서 일반적으로 사용되는 3D 조직 절편의 실시간 형광 이미징이 가능합니다.

STELLARIS 8 CRS

CRS 현미경을 사용한 무염색 화학 이미징 알아보기

선택 사항: 극저온 와이드필드 버전 또는 극저온 공초점 버전
 

특징

공초점

Thunder(와이드필드)

감도 *
속도 *
측면 해상도***
축 해상도***
극저온 영상촬영 조건을 위해 염료의 여기 및 방출을 극대화***
자동형광의 억제(시료 또는 탄소 레이어)* 
타게팅 및 내보내기3D2D

원활한 극저온 전자 단층 촬영 작업

3D 볼륨의 정밀한 타게팅

본 자료에서는 Leica Microsystems의 극저온 전자 단층 촬영 시스템 Coral Cryo가 공초점 극초해상도를 통해 관심 구조를 더 정밀하게 타겟팅하는 방법에 대해 알아봅니다. 이러한 시스템을 통해 작업 단계를 줄이고 극대화하며, 샘플 로딩 및 이동 과정을 개선하고, CryoET 작업의 생산성을 개선합니다.

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상단 SEM 보기(촤즉 창) 및 FIB 보기(우측 창)를 포함한 초고해상도 3D 공초점 이미지 오버레이. 상관 관계를 위한 랜드마크로 비드를 사용하여 오버레이를 수행함. HeLa 세포 표지 방법: Hoechst의 핵, 청색; MitoTracker Green의 미토콘드리아, 녹색; Bodipy and Crimson Beads의 지질 방울, 적색). 스케일바: 20μm. 세포는 Ievgeniia Zagoriy에서 제공되었고 SEM/FIB이미지들은 Germany, Heidelberg, EMBL, Mahamid-Group, Herman Fung에서 제공됨.

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