Muitos experimentos com células exigem que elas se encontrem em um determinado estado. Isso pode incluir a morfologia, expressão proteica fluorescente e a confluência da camada celular. Os pesquisadores verificam suas células regularmente para determinar esses atributos. Pode ser muito difícil estimar a confluência! Esse trabalho de suposição é influenciado por cada pesquisador individual e pode resultar em erros de laboratório.
Como determinar a confluência de células
PAULA – o Assistente de laboratório automatizado pessoal da Leica Microsystems – o ajuda a automatizar as verificações de confluência e a encontrar o tempo específico perfeito para o seu experimento. Com a ajuda do app Confluence, o PAULA mede com precisão a confluência de sua cultura celular. O PAULA pode ser operado até mesmo em 37°C, 5% CO2 e em ambientes de umidade, para que você possa observar suas células em seu estado natural. Assim, o PAULA ajuda a realizar seus experimentos de cultura celular, sempre no tempo certo.
Características
- Ajuste de contraste de fase livre
- Fluorescência vermelha/verde
- Operação dentro da incubadora de células (37°C, CO2, ~90% de umidade)
- Medição automatizada da confluência celular
- Monitore suas células em qualquer lugar e quando desejar
Fluxo de trabalho da verificação de confluência
Etapas do fluxo de trabalho da verificação de confluência
1. Inoculação celular | 2. Crescimento celular | 3. Verificação de confluência celular | 4. Transfecção | 5. Resultado da transfecção da verificação celular | 6. Análise
Campos de pesquisa típicos: Cultura celular, monitoramento de células, verificação de confluência, pesquisa de células tronco, organoides, esferoides, cicatrização de feridas
Etapa 1: Inoculação da célula
Inocule suas células no recipiente de cultura celular de sua preferência. Basta fazer o seu trabalho de rotina e colocar as células na platina do PAULA – dentro da sua incubadora! Defina o seu método de iluminação desejado e foque nas células.
Etapa 2: Crescimento celular
Deixa as células se acomodarem e começarem a crescer. A confluência, morfologia e crescimento celular podem ser difíceis de determinar se você estiver ocupado! PAULA observa suas células constantemente, para que você não precise fazer isso.
Etapa 3: Confluência celular - Verificação
Verifique suas células remotamente com o PAULA em seu dispositivo móvel, por meio do App Confluence. Você pode determinar a confluência de suas células – ao vivo. Além disso, o sistema também irá controlar, documentar e analisar o crescimento. O PAULA pode lhe enviar um e-mail quando uma confluência específica tiver sido atingida. Você nunca mais terá que se preocupar novamente em verificar suas células.
Etapa 4: Transfecção
Após você ser notificado do status de confluência desejado de suas células, elas poderão ser transfectadas. Apenas faça o seu ensaio de transfecção de rotina e retorne suas células de volta ao PAULA, dentro da incubadora.
Etapa 5: Verificação da célula – Resultado da transfecção
Continue observando suas células remotamente. Verifique a sua transfecção com a ajuda do Contraste de fase e da fluorescência vermelha/verde.
Você pode documentar facilmente seus resultados com um único toque. Todos os dados serão salvos e podem ser exportados posteriormente.
Etapa 6: Análise
Agora, todas as células estão prontas para o seu experimento. Analise as células com a abordagem analítica de sua preferência:
- Microscopia de fluorescência
- Microscopia confocal
- Microscopia TIRF
- Microscopia de super resolução
- Bioquímica
- Biologia molecular
Gerador de imagens celulares PAULA
O seu assistente de laboratório automatizado pessoal para o monitoramento celular
Nunca foi tão fácil monitorar culturas de células. O PAULA mede a confluência da sua cultura celular automaticamente e de forma reproduzível. O PAULA permite que você assista remotamente as suas células 24 horas por dia, mesmo sem estar no laboratório da cultura celular.
Com o PAULA no seu laboratório, você sempre encontrará o momento certo para os seus experimentos downstream.