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Detector de SP

Atualmente, a aquisição de imagens de fluorescência multicor é um padrão na pesquisa biológica e geralmente o primeiro passo em direção à microscopia de múltiplos parâmetros. Mais importante ainda é certificar-se de que a separação espectral da luz de fluorescência emitida em diferentes canais de detecção seja eficiente e flexível.

Os microscópios confocais fabricados pela Leica Microsystems contam com um arranjo semelhante a um espectrofotômetro. A luz emitida pela amostra é dispersa por um prisma altamente transparente. Ao contrário dos designs com grelha, isso impede a perda de fótons de forma eficiente. Cada canal é gravado com um detector de pontos individuais. Esse é um conceito que permite uma grande faixa dinâmica para todos os tipos de amostras, visto que cada detector pode ser ajustado para um ganho individual e diferentes tipos de detectores, como PMT e HyDs, podem ser combinados. Como os diferentes corantes e as diferentes cores das proteínas fluorescentes têm brilho molecular desigual, o sistema pode ser ajustado de forma ideal para a amostra (veja a Figura 1). Para obter mais informações sobre o detector espectral (SP) da Leica, consulte o Laboratório de Ciências da Leica.

Figura 1: Faixa dinâmica adaptativa do detector de SP. O projeto de detecção do SP usando detectores de pontos individuais evita duas desvantagens inerentes das matrizes multianodo: Perda de dinâmica e lacunas espectrais. Todos os elementos de uma matriz multianodo são tipicamente controlados com o mesmo ganho. Assim, a definição de ganho deve fazer um compromisso entre subexposição e saturação, no caso de diferentes canais terem brilho molecular desigual. As lacunas espectrais entre os elementos da matriz podem levar a uma perda de até 20% de luz ou a diafonia no canal pode se tornar grave. Os detectores de pontos individuais se adaptam dinamicamente às necessidades em mudança de uma diversa gama de amostras.