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상관관계적 광학 현미경과 전자현미경(CLEM)

마이크로미터와 나노미터 크기 사이의 간격을 메울 수 있고, 기능적 정보와 구조적 정보를 연결할 수 있다고 상상해 보십시오. 특정 연구 질문에 대해, 이것은 살아있는 세포 이미징, 고압 동결 고정, 초박절편, (극저온) 전자현미경과 같은 여러 방식을 결합시키기 위해 다양한 시료 준비와 현미경 기법을 사용하는 것 의미합니다. CLEM 접근 방식은 이러한 격차를 해소하도록 도와드립니다.

라이카마이크로시스템즈 CLEM 솔루션은 시료 생존성, 품질 확인, 정밀하고 신뢰할 수 있는 3D 타게팅 메커니즘을 보장합니다. 사용자는 적절한 시점에 적합한 시료를 직접 확인하고 높은 분해능의 극저온 공처점 데이터를 얻거나 초미세구조 환경에 형광 정보를 넣기 위해 이 솔루션을 이용할 수 있습니다.

도움이 필요하십니까?

상관관계적 광학 현미경과 전자현미경 솔루션에 대한 라이카 전문가들이 조언으로 기꺼이 도와드립니다.

CLEM은 어디에 사용됩니까?

CLEM 접근법은 나노미터 이하 분해능으로 시료를 더 자세히 조사하는 데 사용됩니다. 한 영역에서 여러 층의 정보를 조합할 수 있을 뿐만 아니라, 어두울 때 등대가 있는 것과 같이 넓은 곳에서 관심 영역의 특정 대상을 지정할 수도 있습니다.

예를 들어, Cryo-EM을 사용한 단백질 구조 분석을 위해 극저온 형광 현미경으로 쉽게 표지된 단백질을 검출하고 타겟팅할 수 있습니다(Coral Cryo에 대해 자세히 알아보기). 또 다른 예는 기능적 정보를(예: 세포 간 상호작용) 구조 정보와 결합하고 광 분해능 한계 이상이 필요할 때입니다(Coral Life에 대해 자세히 알아보기).

사실 말로는 쉬워 보이지만, 성공적으로 (cryo) CLEM 작업 흐름을 만드는 데는 많은 어려움이 있습니다. 이미 실험 설계 단계에 있을 때, 사용자는 다음 질문을 다루기 위해 고려해 봐야 합니다:

  • 시료를 최적의 상태로 준비하고 유지 방법은?
  • 관심 대상 구조를 식별하고 표시하는 방법은?
  • 기기 간에 시료를 안전하고 효율적으로 운반하는 방법은?
  • 이어지는 전자현미경 단계들을 위해 적합한 형식으로 이미징하고 목표 데이터를 제공하는 방법은?

Coral 제품군은 시료를 단계적으로 처리하도록 돕고 CLEM 작업 흐름의 신뢰성을 높입니다.

CLEM 데이터를 어떻게 상호 연관시킬 수 있습니까?

광학 현미경과 전자현미경의 상관관계는 실온 실험과 cryo-CLEM 실험 모두에서 성공적인 실험을 위해 중요합니다. 좌표 조정 시스템이 설치되어 있어야 되고 다양한 이미지 방식에서 잘 인식되어야 합니다. 다음으로, 높은 정밀도로 고해상도 정보를 되찾아오기 위해 영상 맞춤(넓은 개요 데이터를 위함) 또는 위치의 절대 좌표로(x,y,z, 값) 영상 정보를 덮어 씌웁니다.

극저온 CLEM이란 무엇입니까?

Cryo-CLEM(상관관계적 광학 현미경과 전자현미경)에서는 두 이미징 단계가 극저온 조건에서 수행이 되며, 이는 신뢰할 수 있는 극저온 시료 준비 작업 흐름에 대한 필요성을 의미입니다. 여기에는 신뢰할 수 있는 시료 유리화(vitrification), 안전한 시료 운반 및 안정적인 극저온 광학 현미경 이미징이 포함됩니다. 얼음 오염에 특히 주의를 기울여야 합니다: 높은 습도 환경과 더러운 LN2는 시료를 쉽게 오염 시킬 수 있습니다. Coral Cryo 제공 사항: 1) 안전하고 깨끗한 시료 처리, 2) 안정적이고 오랜 기간 동안 극저온 현미경 이미징, 3) Coral Cryo 소프트웨어를 사용하여 본래 환경 내에서 생체 분자의 이미징 및 정밀 타게팅.

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