배양된 피질 뉴런(원본 원시 데이터)
THUNDER Imager 3D Cell Culture로 확보

양방향 이미지: 배양된 피질 뉴런. 녹색, 베타-III-튜불린, 청색, 핵.
THUNDER Imager 3D Cell Culture를 이용해 부피가 21μm인 59면 이미지 스택을 확보했습니다. THUNDER Large Volume Computational Clearing을 사용하여 얻은 이미지와 원시 이미지 비교
샘플 제공: FAN GmbH, 마그데부르크, 독일.

정확한 통계를 위한 대량 처리 및 워크플로우 효율

3D 세포 배양 분석을 자동화하여 차세대 질병 모델을 효율적으로 연구할 수 있습니다. THUNDER를 사용하면 폐 조직질과 같은 많은 양의 샘플을 고속으로 이미지화할 수 있습니다. 또한 자동화에서는 복잡한 실험에서도 사용자의 개입이 최소화됩니다.

결과:

  • 정밀하고 신뢰할 수 있는 데이터를 짧은 시간에 확보
  • 처리량 증가
  • 통계 및 결과 개선

THUNDER를 사용해 쥐 망막 전체의 신뢰도 높은 정량화

망막 이미징 분석을 위한 정량적 접근법은 종종 망막 형태와 기능에 대한 포괄적인 설명을 제공합니다. 망막 이상 및 병리 임상 응용 분야는 유전자 변형 표적 스크리닝을 재현할 수 있는 안정적인 워크플로우가 필요합니다. 그러므로 형태를 반복적으로 이미징하려면 지속적으로 재현될 수 있는 정확한 결과를 제공하는 시스템 솔루션이 필요합니다. THUNDER Imager 3D Assay를 통해 망막의 단일 세포 핵 분포와 같은 세포 내 신뢰할 수 있는 산출 정보 및 형태를 명확하게 시각화할 수 있습니다.

THUNDER Imager 3D Assay 이용 시 장점

  • 흐릿함을 즉각적으로 제거하여 더 많은 세포 내 세부 정보의 시각화 가능
  • 광학적 접근 방식으로 더욱 활용도가 높은 깊이
  • 신뢰도 높은 정량화
  • 특정 워크플로우 프로세스 분석에 즉시 사용 가능

THUNDER Imager 3D Assay 구성

Iba1 + 미세아교세포(Alexa Fluor ® 488 초록색-flfluorochrome)와 Brn3a + 망막신경절 세포(Alexa Fluor ® 594 적색-플루오르크롬)를 보여주는 스위스 성체 암컷 마우스 전조직표본 망막을 제어합니다. 사진 제공: Experimental Ophtalmology group, University of Murcia (Spain).

THUNDER Imager 3D Cell Culture 으로 뇌 오가노이드 시각화

새로운 모델 시스템으로서 뇌 오가노이드는 인간의 뇌 발달 및 장애를 연구하는 데 사용됩니다. 이러한 자기조립 3차원 세포구조는 종종 다수의 유전자 변형 마커 이미징을 통해 특성화됩니다. 이런 워크플로우 프로세스에서 생리적 조건을 유지하고 낮은 신호 수준에서 샘플 깊이에 도달하는 것뿐만 아니라, 제시간에 분자 역학을 정량화해야 하는 것이 기존의 문제입니다. 따라서 라이카의 LED 광원이 광퇴색을 최소화하는 데 도움이 되므로 THUNDER Imager 3D 세포 배양은 생리학적 조건에 근접한 오가노이드의 발달을 연구하는 데 적합합니다. 또한, 낮은 단백질 신호 수준에서도 캐리어를 교체할 필요 없이 시간 기반 표현이 가능합니다.

THUNDER Imager 3D Cell Culture 이용 시 장점

  • 플라스틱 바닥 접시 내 표본을 관찰할 수 있어 워크플로우가 보다 효율적
  • 높은 광자효율(QE) 카메라로 분자의 낮은 신호를 검출하는 기능
  • 광학적 접근 및 정밀한 시간 기반 LED 조명을 갖춘 낮은 표백 및 낮은 샘플 간섭

THUNDER Imager 3D Cell Culture 구성

핵(DAPI), p-vimentin (AF488), DCX (AF568), PAX6 (AF647). 투명화하지 않은 인간 뇌 유기체(4색), 사진 제공: Atria Kavyanifar, M.Sc. (supervised by Prof. Dr. Lie, Prof. Dr. Winner) University Clinic Erlangen, Germany).

장기간의 살아있는 세포 타임랩스 이미징에서 낮은 광독성

체외이식편 세포 배양은 안정적인 세포 배양 환경과 낮은 광독성의 이미징 조건이 필요하기 때문에 종종 이미징 실험을 수행하기 어렵습니다. 버지니아 대학교의 Laura Shankman 박사의 이 체외이식편 세포 배양 이미징의 사례는 48시간 동안 복부 대동맥 세포를 어떻게 안정적으로 이미지화했는지 보여주고 있습니다. THUNDER Imager Live Cell은 최소 침습적이고 정밀한 살아있는 세포 이미징 실험에 완벽한 현미경 이미징 시스템을 제공합니다. 신속하고 고양자효율(High-Quantum-Efficiency) 카메라 옵션, 정확한 스테이지, 조정 가능한 LED 광원, 광학 이미지에서 초점이 맞지 않는 흐릿함을 줄이기 위한 컴퓨팅 클리닝, 이미징 및 분석 워크플로우를 자동화하기 위한 LAS X 소프트웨어의 사용 용이성 덕분에 민감한 세포 배양 실험을 효율적으로 수행할 수 있습니다.

THUNDER Imager Live Cell의 장점

  • 정확한 살아있는 세포 이미징 실험으로 세포의 빠른 움직임 추적
  • 낮은 광독성으로 장기적 실험에서도 민감한 세포 배양을 살아있는 상태로 유지
  • 자동화된 정량화 및 분석까지, 살아있는 세포 이미징 워크플로우 가속화

THUNDER Imager Live Cell 구성

1주일 동안 배양한 복부 대동맥 체외이식편 이미지는 젤라틴 코팅한 #1.5 커버 글라스 챔버 슬라이드에서 48시간 동안 촬영되었습니다. 마우스는 유전적으로 민무늬근 세포 지정 Tdtomato로 인코딩되었습니다. 전사 이벤트 후, 민무늬근 세포가 Tdtomato를 여기시키고 eGFP를 표현하기 시작합니다.

최적의 생리 조건 - 빛 노출 최소

3D 세포 배양에서 유의미한 결과를 얻으려면 실제 생리학을 관찰해야 합니다. 일반적으로 강도가 가장 낮은 빛과 가장 짧은 노출 시간처럼 실험 조건을 최적화하여 최대한 자연 상태에서 세포를 조사하는 것이 좋습니다.

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture는 작은 대역폭으로 여기에 최적화된 고급형 LED가 장착되어 자연 상태의 작업에 적합합니다. 민감도가 높은 고급형 sCMOS 카메라는 조명이 어둡고 노출 시간이 짧은 경우에도 최대 82%의 양자 효율로 유의미한 이미지 정보를 제공합니다.

샘플이 빛에 최대한 노출되지 않도록 실제 촬영 시간에만 조명을 켭니다. 카메라 셔터는 고속(20 μs 스위칭 시간) Lumencor LED 광원과 동기화되어 광표백을 최소화합니다.

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture에는 전자동 DMi8 현미경, Quantum 스테이지, 고감도 DFC9000 GTC 카메라, 다중 라인, 고휘도 형광 LED 광원이 기본으로 장착되어 있습니다. 이 제품은 빠르고 정밀한 3D 세포 배양 다중 위치, 다중 채널 이미징에 최적화되어 있습니다.

폐포 줄기와 선조 세포에서 유래된 마우스 폐 조직질. 샘플 제공: Dr. Pumaree Kanrai, 막스 플랑크 심폐 연구소, 바트나우하임, 독일.

세포 성장 속도로 이미지 촬영

생명, 특히 세포의 성장 속도는 매우 빠릅니다. 최신 라이브 세포 이미징 실험에서는 고속 시스템이 필요합니다.

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture는 한 번 촬영으로 전체 프레임으로 작업하는 고감도 sCMOS 카메라 기반 형광 시스템의 성능을 제공합니다.

고감도 기능이 적용된 THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture를 이용하면 초당 최대 90프레임의 데이터를 캡처하여 빠르게 성장하는 세포의 모습을 관찰하는 데 도움이 됩니다. 두꺼운 3D 세포 클러스터 내부에서도 포커스 아웃이 없는 이미지 데이터를 빠르게 캡처합니다. 스위칭이 빠른 외부 필터 휠(< 27 ms) 덕분에 다중 방출 파장 실험 중에도 신속한 프로세스를 유지할 수 있습니다.

생 세포 배양 관찰 시 올바른 환경 유지

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture에는 세포를 자연 상태에 가깝게 유지하는 데 필요한 모든 기능이 있습니다. 인큐베이터는 시스템의 안정성, 습도, 온도, 이산화탄소 수준(pH 값) 등 살아 있는 세포 배양에 최적화된 생리 조건을 제공합니다.

수분 측정 마이크로 디스펜서 덕분에 장기 실험에서도 다중 웰 워크플로우에서 수분 침지 대물렌즈를 사용할 수 있습니다. 수분 침지 대물렌즈를 이용하면 광도가 높은 수집이 가능하여 명암과 해상도가 더욱 높은 세포 이미지를 얻을 수 있습니다.

STAR488 Vimentin(녹색), STAR580 Tom20(황색(), DAPI(청색)로 염색 배양된 VERO 세포. 샘플 제공: Abberior GmbH, 괴팅겐, 독일.

타임랩스 다중 위치 실험: 세포 변화 추적

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture를 이용하면 빠르게 안정적으로 3D 세포 배양 멀티웰 실험을 진행할 수 있습니다. 예를 들어 스페로이드 및 오가노이드의 성장과 발달을 추적할 때 빠르고 안정적인 프로세스를 통해 우수한 결과를 얻을 수 있습니다.

THUNDER Imager에서 다중 위치의 정확한 타임랩스 실험 및 세포 변화 추적이 가능한 것은 다음과 같은 기능 덕분입니다.

  • Adaptive Focus Control(AFC)을 이용한 안정적인 포커스 드리프트 교정
  • 표본 위치의 변화를 보정하는 소프트웨어 자동 초점
  • 최대 20 nm의 정밀도로 재현 가능한 Z 포지셔닝(폐쇄 루프 초점)

새로운 Quantum 스테이지로 더 짧은 시간에 더 많은 데이터 포인트를 확보할 수 있습니다. 흔들림이 없으므로 어떤 위치로든 신속하고 정확하게(예: 초당 10개 위치) 이동할 수 있으며, 반복성이 매우 우수합니다(< ± 0.25 μm).

일상적인 데이터 수집의 안정적인 진행

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture를 사용하면 항상 살아 있는 세포에서 정확한 초점을 유지하면서  이미지 데이터를 안정적으로 수집할 수 있습니다.

생세포 이미징은 드리프트, 형태 변화 또는 세포 성장 때문에 까다로운 경우가 많습니다. 드리프트는 진동, 기계적 이동 또는 온도 변화로 인해 발생합니다. 드리프트 및 세포 변화 모두 초점에 문제를 일으켜 이미지 데이터의 신뢰성을 저하시킬 수 있습니다. Adaptive Focus Control(AFC), 폐쇄 루프 초점 및 소프트웨어 자동 초점 기능 덕분에 THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture 는 다중 웰 실험에서 안정적으로 초점을 유지합니다. 

빌달하는 제브라피시 췌장 - 광시야
THUNDER Imager 3D Assay

사진 제공: Radhan Ramadass와 Yu Hsuan, Max Planck Institute for Heart and Lung Research, Bad Nauheim(독일)

빌달하는 제브라피시 췌장

THUNDER 3D Assay Imager는 빌달하는 제브라피시 췌장 안에서 알파(GFP-초록색)와 베타(mCardinal-빨간색) 세포를 명확하게 식별할 수 있게 했습니다.

파란색(Hoechst), 초록색(GFP) 및 빨간색(mCardinal) 채널에 이미지된 이 150장의 z-stack 이미지는 1분 내에 모든 채널과 함께 완료되었습니다.

워크플로우 효율성이 향상되도록 광퇴색을 최소화하고, 고성능 이미징과 높은 데이터 처리량을 제공하므로 샘플 내에서 생리적 조건을 유지할 수 있습니다.

세포 배양 실험 이미지 촬영 및 조작

Infinity Scanner를 사용할 때는 THUNDER의 비침습적 이미징과 광조작, FRAP, FRET 또는 ablative 기법을 결합하십시오. Infinity Scanner의 유연한 벡터 레이저 스캐닝 시스템을 활용하여, 연구한 세포 또는 세포 밖의 환경을 조작하십시오.

이 두 개의 비디오는 THUNDER Instant Computational Clearing 전후에 mx1-GFP를 표현하는 MDCK 세포를 보여줍니다. THUNDER를 사용함으로써 mx1 단백질 발현을 훨씬 더 명확하게 식별할 수 있게 되었으며, 이는 Infinity Scanner로 절단할 수 있게 되었습니다.

THUNDER Imager 3D Cell Culture 과 Infinity Scanner를 조합하여 세포 배양 실험을 이미징하고 조작합니다.

Infinity Scanner에 관한 자세한 정보

사진 제공: Dr. Ralf Jacob, University of Marburg, Germany

사진 제공: Dr. Catherine Boyle, University of Virginia, USA

민감한 샘플 이미징을 위한 명확성 및 속도

THUNDER의 초점이 맞지 않는 흐릿한 부분 제거 기능과 TIRF의 장점을 결합합니다. 세포 표면의 동적 공정의 경우 총 내부 형광 현미경이 뛰어난 신호 대 배경비 분리를 제공합니다.

이 두 가지 비디오는 Gfp-grich로 인간 프로인슐린을 표현하는 ins-1 세포를 보여줍니다. 세포 배양에 KCL이 첨가됨에 따라 인슐린 생산 세포가 파괴되고 인슐린 잔여물이 혈장 멤브레인에 융합될 수 있습니다.

TIRF와 결합된 THUNDER Imager Live Cell을 통해 뛰어난 선명도, 속도 및 이미징 파라미터 제어로 민감한 샘플을 이미지화하세요.

Infinity TIRF에 관한 자세한 정보

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