STED 및 STELLARIS: 재탄생한 초고해상도

STED와 STELLARIS가 하나로 통합되어 특유의 우수한 공초점 기능과 더 많은 정보를 볼 수 있는 초고해상도를 제공합니다.

강력함 

차세대 WLL, 최적화된 빔 경로, 고속 Power HyD 검출기 및 최대 3개의 STED 레이저 라인을 결합하여 나노 규모와 전체 스펙트럼 차원에서 다양한 이벤트를 동시에 연구할 수 있습니다.

가능성

STED에 대한 새로운 접근 방법인 TauSTED는 최첨단 이미지 품질과 살아있는 세포의 상태를 제공하는 형광 수명을 기반으로 합니다. 이 TauSTED로 STED 초고해상도 이미징 수준을 한 차원 높여보세요.

생산성

새로운 ImageCompass 사용자 인터페이스를 통해 뛰어난 공초점 및 STED 이미지를 촬영하고 몇 번의 클릭만으로 실험을 설정할 수 있습니다.

공초점
TauSTED

세포생물학을 위한 STED: 다색 살아있는 세포 TauSTED 775는 SiR-tubulin(야광)으로 라벨링된 복잡한 세포골격 네트워크와 CF594(청록색)로 라벨링된 vesicle들의 이동을 분석합니다. 스케일바: 5 mm . SiR-tubulin은 Spirochrome에서 구매할 수 있습니다. CF594 제공: Biotium, Inc.

STELLARIS STED 및 STELLARIS 8 STED

STELLARIS가 제공하는 두 가지 옵션으로 시스템에 STED를 통합할 수 있습니다. 바로 올인원 STED 솔루션인 STELLARIS STED와 최첨단 업그레이드 가능한 STELLARIS 8 STED입니다. 두 제품 모두 STED 성능에서 동일한 장점을 제공하므로, 요건에 가장 적합한 옵션을 결정할 때 STELLARIS의 추가적인 기능에 더욱 집중할 수 있습니다.

STELLARIS 8 STED

STELLARIS 8에 장착된 STED에는 최대 3개의 STED 라인이 있어 2D 및 3D 나노스코피에 적합

  • 440nm에서 최대 790nm의 여기 부피를 사용하는 WLL
  • Power HyD S, HyD X 및 적색 확장 애플리케이션용 HyD R 지원
  • TauSense로 구동되는 TauSTED 및 FALCON을 사용할 수 있는 경우 전체 FLIM 분석 가능
  • 다른 장비(FALCON, FCS)로 풀 업그레이드 가능

STELLARIS STED

  • 최대 3개의 STED 라인이 있어 2D 및 3D 나노스코피에 적합한 올인원 STED
  • 485nm에서 최대 685nm의 여기 부피를 사용하는 WLL
  • Power HyD S 및 HyD X 지원
  • TauSense로 구동되는 TauSTED

표본의 분자 관계를 더 많이 관찰하고 분석하는 능력

세포 운반, 분화 및 세포  분열과 같은 과정의 기본 메커니즘을 특성화하려면 최고의 이미지 품질과 실험을 설계할 수 있는 유연성 그리고 세포의 자생적 환경에서 특정 생체 분자를  관찰할 수 있는 속도가 필요합니다.

STELLARIS 플랫폼과 결합한 STED는 차세대 White Light Laser(WLL)/AOBS 기술, 새롭게 최적화된 빔 경로, Power HyD 감지기 제품군을 사용하는 스펙트럼 감지, 다중 STED 라인(592, 660, 775nm) 이 지닌 장점을 제공합니다. STED는 밝은 이미지로 나노급의 디테일로 구조물을 특성화하고, 형광단 선택 시 최고의 유연성으로 코로컬라이제이션 연구를 지원하며 높은 수준의 동적 과정도 추적할 수 있게 합니다.

말라리아 연구를 위한 STED: 3D STED 775는 적혈구의 분열소체 침입 뒤에 숨어있는 메커니즘을 밝혀냅니다. 이미지는 단백질 PfRh5(좌측, 녹색), PfRipr(중간, 녹색), PfCyRPA(우측, 녹색)와 RON4(자홍색)의 오버레이를 나타냅니다. 핵 염색은 청색으로 나타나며 적혈구막은 회색으로 표시됩니다. 스케일바: 1 µm. 이미지 제공: Jennifer Volz, Alan Cowman, Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, Australia, and Marko Lampe, EMBL, Germany.

나노급으로 연구 가능한 동시 이벤트의 수를 늘리세요

다색 형광 라벨링은 분자 특이성으로 다양한 성분을 촬영할 수 있기 때문에 세포내 종 간의 관계를 밝히는 힘을 가지고 있습니다.

STED 및 STELLARIS는 다색 응용 분야에서 탁월한 성능을 발휘합니다. 스펙트럼의 적색 영역에서 최고의 염료를 사용하거나, 녹색의 형광 단백질을 사용하거나, 주황색의 새로운 형광 프로브를 사용할 수 있습니다. 다수의 종에 코로컬라이제이션 연구를 수행하고 이를 부회절 디테일로 분석할 수 있습니다.

라이카의 스펙트럼 검출은 STED를 지원하는 최대 5개의 Power HyD 검출기를 제공하므로 시공간에서 로컬라이즈할 분자 수를 늘릴 수 있습니다. 또한 1.5ns 풀 시스템 불감 시간을 가진 Power HyD 검출기의 디지털 기능과 속도는 신호 대 잡음비 및 배경비 측면에서 우수한 이미지 품질을 보장하며 APD에 비해 최소 10배 이상의 광자 수집/픽셀 유지 시간을 제공합니다.

발달 생물학을 위한 STED: 노랑초파리 배아 전층 표본의 RNA의 smFISH*. 프로브는 직접 라벨링 되었으며, 신호 증폭은 없습니다. 상단: 세 가지 색상의 TauSTED 775가 hb CalFluor 610(청록색), gt Quasar 670(녹색), eve Quasar 705(자홍색)의 신호를 캡처합니다. 하단: 노랑초파리 전체 배아의 공초점 이미징. 샘플 제공: Tom Pettini, University of Manchester, UK. * 단일 분자 in-situ hybridization

뛰어난 밝기와 해상도를 제공하는 2D 및 3D STED 이미징

STED 및 STELLARIS를 사용하면 해상도를 x, y 및 z축으로 조정 가능하므로 필요한 결과를 2D와 3D 모두 얻을 수 있습니다. 2D와 3D에서 최상의 밝기와 해상도를 확보할 수 있도록 스펙트럼 전체에서 여기 및 STED PSF의 최적 오버레이를 보장하고, 적응형 보정으로 인해 정량화 기능이 손실되지  않도록 하는 최고의 광학 장치를 제공합니다. 라이카의 STED WHITE 등급 대물렌즈는 다양한 STED 실험을 위한 최적의 조건을 보장하기 위해 특별히 개발되었습니다.

  • STED WHITE 100x 오일 렌즈는 최고의 해상도를 제공하며 고정된 샘플의 일상적인 이미징에 뛰어난 성능을 제공합니다.
  • STED WHITE 93x 글리세롤 렌즈는 motCORR 전동식 보정 칼라 기술 덕분에 샘플 내부를 깊이 들여다볼 때 발생하는 온도 변화, 굴절률 불일치 및 비균질성에 적응형 보정을 제공합니다.
  • motCORR이 장착된 STED WHITE 86x 워터 렌즈 역시 위와 같은 적응형 보정을 제공하며, 안정적으로 발현하는 살아있는 세포와 STED-FCS에 사용하기 이상적입니다(1).

(1) “고 광자 계수율은 초고해상도 형광 변동 분광술의 품질을 개선한다” F. Schneider et al. J. Phys. D: Appl. Phys. 53 164003, 2020.

세포생물학을 위한 STED: 3D TauSTED 660은 AF555와 Nup 복합체에 대해 면역염색된 COS7 세포 상의 핵 기공(NPC)의 분포를 나타냅니다. 1차 항체 mAb414는 핵공의 일부 뉴클레오포린을 인식하고, 반점 같은 염색을 생성합니다. 이미지 크기: 12μm, z- 컬러 코드.

TauSTED: 나노스코피와 수명의 만남

라이카의 독점적인 TauSTED 기술이 제공하는 뛰어난 해상도, 이미지 품질 및 샘플 보호력을 통해 STED 실험의 잠재력을 넓히세요.

TauSTED는 STED로 유도된 형광 수명 구배를 사용하여 STED 공정에서 나온 광자를 배경과 구분합니다. 그 결과, 광 선량이 낮을 때도 기존의 STED* 를 넘어서는 해상도로 이미징할 수 있으며, 장시간의 타임 랩스로 살아있는 세포를 나노스코피할 수 있습니다.

다색 코로컬라이제이션 연구뿐만 아니라 모든 STED 실험에 TauSTED를 적용할 수 있습니다. FALCON을 사용하면 스펙트럼에 중첩되는 STED 염료도 분리할 수 있습니다.

* 해상도 <30 nm (측면) 및 <100 nm (축 방향), 샘플 및 형광단에 따라 다름.

공초점
TauSTED

신장 질환 연구를 위한 STED: 시납토포딘(녹색) 및 네프린(자홍색)으로 면역염색된 투명하지 않은 생쥐 신장의 다색 2D 및 3D TauSTED 775. STED WHITE 글리세롤 렌즈는 고도로 조밀한 조직 구조 내의 단백질을 분석하는 최적의 적응형 보정을 제공합니다. 스케일바: 10 μm. 샘플 제공: Victor Puelles, Milagros Wong 및 Jan Czogalla, Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf, Germany.

TauSTED는 매우 낮은 광 선량에서도 뛰어난 해상도를 제공합니다

STED 실험에 맞는 낮은 광량 조사 전략을 찾고 계신다면 이 질문이 빠져서는 안 됩니다. 얼마나 낮은 광량을 사용할수 있습니까? 선뜻 대답하기는 어렵습니다. 사용자가 선택하는 샘플과 형광단에 따라 다르기 때문입니다.

라이카는 사용자의 실험과 관련되지 않은 임의의 광량의 감소를 약속하지 않습니다. 대신 TauSTED로 여기 및 STED 광 선량을 크게 줄여드리므로 시공간의 변화에 따라 성공적으로 측정을 수행하실 수 있습니다. TauSTED를 통해 배경을 제거하고 최상의 해상도에 도달하여 높은 보상 선량과 정량화 기능의 손실을 방지할 수 있습니다.

이같은 장점은 STED와 STELLARIS 플랫폼 기능의 고유한 결합 덕분인데, 초고속 Power HyD 검출기와 TauSense(STELLARIS STED 및 STELLARIS 8 STED)와 FLIM(STELLARIS 8 FALCON)이 제공하는 수명 차원에 액세스할 수 있기 때문입니다.

세포생물학을 위한 STED: TauSTED 660은 AF555와 Nup 복합체에 대해 면역염색된 COS7 세포 상의 핵 기공(NPC)의 분포를 나타냅니다. STED 조명의 2%만으로도 더 자세한 디테일을 보여줍니다. 1차 항체 mAb414는 핵공의 일부 뉴클레오포린을 인식하고, 반점 같은 염색을 생성합니다.

기존 한계를 넘어선 해상도

TauSTED는 모든 STED 실험에서 촬영한 형광 수명 기반 정보를 측정하고 형광단의 STED 반응을 실시간으로 매핑합니다. 이러한 정보에 액세스하면 이미지 품질(신호 대 잡음비)이 향상되고, 물리적 원리를 사용하여 배경에서 광자를 제거할 수 있으며, 여기 조건이나 사용 중인 STED 라인(592, 660, 775)에 상관없이 강도 기반 STED의 한계를 넘는 해상도를 이용할 수 있습니다.

TauSTED는 이 모든 작업을 자동화된 방식으로 처리하기 때문에 사용자는 샘플에 집중하고 놓치기 쉬운 디테일도 관찰할 수 있습니다.

STED 및 DNA 오리가미 이미징: TauSTED 775는 공칭 크기가 23nm인 GATTA-Bead R에서 30nm 미만의 해상도를 제공합니다. 스케일바: 1 µm.

살아있는 세포 이미징의 연장을 위한 섬세한 STED 초고해상도 ​

더 낮은 여기 및 STED 광 선량은 표본을 보호하는 역할을 합니다.

이 기능을 사용하면 공간적 해상도를 유지하면서, 프레임이 많거나 부피 이미징이 큰 장시간의 타임 랩스 실험이 가능합니다. ​

세포생물학을 위한 STED: LifeAct-mNeonGreen을 안정적으로 발현하는 세포의 살아있는 세포 TauSTED 592. 스케일바: 5 µm. 이 타임 랩스 이미징은 @ 1 fps로 촬영한 프레임 230개를 나타냅니다. 샘플 제공: Max Heydasch, University of Bern, Switzerland.

STED-FLIM을 사용하여 중첩 스펙트럼이 있는 종 분리

STELLARIS 8에서 STED와 FALCON 장비를 결합하면 형광 수명을 사용하여 종을 분리할 수 있으므로 최적의 STED 형광단(근적외선 제거됨)으로 다색 초고해상도를 수행할 수 있습니다.

이러한 형광단의 방출 스펙트럼은 강하게 중첩되며 기존의 강도의 촬영으로는 구별할 수 없습니다. STED-FLIM과 자동화된 페이저 분리 기능을 결합하면 고유한 수명과 단일 검출기를 사용하여 형광단을 명확히 분리할 수 있습니다.

세포생물학을 위한 STED-FLIM: STED 775 및 FALCON 자동 페이저 분리는 형광 수명을 사용하여 중첩 스펙트럼으로 종을 분리할 수 있습니다. 비멘틴 및 액틴으로 라벨링된 HEK 세포의 광자 수 강도 기반의 정보(회색)는 두 구조를 희미하게 나타내지만, STED-FLIM에서는 분명하게 구별 할수 있습니다(녹색, Vimentin AF647(자홍색), Actin ATTO 647N-phalloidin). 스케일바: 4 µm. 샘플 제공: Sebastian Hänsch, Stephanie Weidtkamp-Peters, CAI, Düsseldorf, Germany.

설치가 쉬운 STED로 생산성을 높이세요

STELLARIS에서는 초보자와 전문가 모두가 STED에 쉽게 액세스할 수 있습니다. 이제 몇 번의 클릭만으로 공초점 및 다색뿐만 아니라 2D 및 3D STED를 결합한 실험을 설계할 수 있습니다.

  • 샘플 특성에 초점을 맞춘 ImageCompass의 스마트 안내 덕분에 신뢰할 수 있는 결과를 얻을 수 있습니다.
  • 원 클릭 빔 자동 정렬로 최고의 STED 성능을 보장하여 광 조사로부터 샘플을 보호하고, 완전 자동화 방식으로 레이저 초점을 최적으로 배치시킵니다.
  • LAS X Navigator로 넓은 영역도 즉시 이미징하고 STED 이미징에 쓸 관심 영역을 선택하세요.
  • 원시 데이터 액세스 및 빠르고 효율적인 광자 계수 등 뛰어난 STELLARIS 기능으로 결과를 검증하세요.
STELLARIS의 STED용 ImageCompass 사용자 인터페이스.

단일 플랫폼에서 빠르고 정확하게 결과를 검증하세요

STED와 STELLARIS를 결합하여 STED, 공초점, LIGHTNING 및 TauSense 데이터를 동일한 시스템에서 사용하므로 결과를 검증할 수 있습니다.

또한, 이 결합을 통해 정량화에 쓸 원시 데이터에 액세스할 수 있습니다. TauSTED를 통해 형광 수명 정보의 물리적 판독값으로부터 배경비를 빼고 해상도를 조정할 수 있습니다.

STELLARIS를 사용하면 항상 나노스코프 실험을 제어할 수 있습니다.

미생물학을 위한 STED: 상호 보완적인 접근법을 사용하여 샘플을 조사하고 검증할 수 있는 3색 공초점 LIGHTNING-STED 이미징으로 시각화한 박테리아 편모충입니다. 샘플 제공: Marc Erhardt, Humboldt-Universität, Berlin, Germany.

더 많은 정보를 원하시나요?

전문가에게 문의하십시오. 귀하의 모든 질문과 관심사에 성심성의껏 답변 드리겠습니다.

연락처

개인 컨설팅을 원하십니까?


자세한 현지 연락처 목록은 여기에 있습니다.