당사의 극저온 전자 단층 촬영술 워크플로 솔루션

라이카의 전용 Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층 촬영술 워크플로 시스템은 시료의 생존 능력과 품질 확인 그리고 무엇보다도 정밀하고 신뢰할 수 있는 3D 타겟팅 메커니즘을 보장합니다.

극저온 스테이지와 셔틀을 포함하는 STELLARIS 5 Cryo는 최첨단 CryoET를 겨냥하는 소프트웨어(LAS X Coral Cryo)와 함께 사용될 수 있을 뿐만 아니라 cryo FIB 또는 VCT 스테이지와의 원활한 통합과 운반 옵션을 이용할 수 있도록 설계되었습니다.

원활한 시료 준비 작업을 통해 생산성을 향상하십시오.

Coral Cryo 3D 극저온 전자 단층 촬영술 워크플로 솔루션

신뢰할 수 있는 타겟팅 정밀도

상관관계 워크플로의 경우, 이어서 진행되는 전자현미경 단계에서 형광 신호가 보이지 않기 때문에 극저온 광학 현미경에서 확인된 정확한 목표물(target) 좌표들을 되찾는 것이 중요합니다.

따라서 시스템 상호 운용성을 높이기 위해 오픈 액세스 좌표를 가진 STELLARIS 5 극저온 현미경에서 타겟팅이 수행됩니다.

사용하기 쉬운 LAS X Coral Cryo 소프트웨어 모듈은 이러한 요구 조건을 충족시키며, 나노미터 크기에 오픈된 형태의 좌표 마커들의 정확한 위치 지정을 할 수 있는 혁신적인 보간(interpolation)기반 3D 타겟팅을 특징으로 합니다. 랜드마크, 박막층, 비즈 표시를 위해서 다양한 기능을 제공하는 다양한 마커 유형도 사용할 수 있습니다.

LAS X Coral Cryo: x와 y 방향에서 z-stack을 통한 단면들을 사용해서 3D에서 보간(interpolation) 기반 타겟팅 모든 관련 창에서 마커들을 상호 작용 방식으로 이동시킬 수 있습니다.

LIGHTNING을 통한 시료 정보의 극대화

 Power HyD 검출기제품군, 최적화된 빔 경로,  백색광 레이저 (White Light Lasers, WLL)간의 시너지 효과를 통해 보다 정확하고 신뢰할 수 있는 데이터를 얻을 수 있습니다.

미세 구조들과 그 외에 단순히 보이지 않는 이미지 정보들의 세부 사항들을 드러내는 독특한 LIGHTNING 검출 개념을 통해 유리화된 시료에서 추출한 정보를 최대화하고 과학적 질문에 대한 심층적인 답변을 얻을 수 있습니다.

이를 통해 전자현미경 작업 흐름에서 다음 단계를 위한 관심 구조를 보다 더 정확하게 타겟팅할 수 있게 합니다.

LIGHTNING 적용 안 됨
LIGHTNING 적용 극저온 시료

짙은 파란색으로 표지된 HeLa 세포 – Hoechst, 핵(Nuclei); 자홍색 – MitoTracker Green, 미토콘드리아(Mitochondria); 청록색 - Bodipy, 지질 방울(lipid droplets). 세포는 독일 하이델베르크 EMBL, Mahamid Group의 Ievgeniia Zagoriy으로부터 제공받음.

신뢰할 수 있는 성능

극저온 전자현미경에서, 워크플로 전반에 걸쳐 얼음 두께를 모니터링해야하며, 일찍 확인하고 평가할 수록 더 좋습니다. 얼음이 너무 두꺼우면 밀링 단계에서 문제를 일으킬 수 있으며, 그렇다고 너무 얇으면 시료의 안정성에 영향을 미칠 수 있습니다.

STELLARIS 5 Cryo는 얼음 확인을 위해, 빠른 카메라 개요와 3D에서 얼음 두께를 결정하기 위한 공초점 반사 모드 등 두 가지 모드를 제공합니다. 

Cryo CLEM 대물 렌즈 HC PL APO 50x/0.90는 극저온 광학 현미경의 특정한 요구를 충족하도록 개발되었으며 액침 없이도 초고해상도의 장점을 제공합니다.

Hoechst로 표시된 HeLa 세포(청색, 핵), Mitotracker Green(녹색, 미토콘드리아), Bodipy(적색, 지질 방울), 비드(마젠타, 1 µm), 반사(백색). 스캐일 바 10μm: 세포는 독일 하이델베르그 EMBL, Mahamide Group, Ievgeniia Zagoriy으로부터 제공받음

더 많은 것을 발견할 수 있는 가능성

STELLARIS 5 Cryo에 포함된 당사의 특별한 TauSense 기술을 통해 모든 시료에서 추가적인 막 정보를 추출하고 연구의 과학적 영향력을 높일 수 있습니다.

스펙트럼 색상 정보 외에도 광자들의 평균 도착시간(arrival time)을 시각화할 수 있습니다. 이것은 다른 형광 수명(TauContrast)만으로도 숨겨진 구성 요소를 드러내는 데 사용될 수 있습니다.

Coral Cryo과 같은 극저온 워크플로 중 낮은 온도때문에, 형광(fluorophores)의 방출 및 여기 기간이 수렴합니다. TauSense를 사용하면 평균 광학 도착 시간이 다르기 때문에, 겹치는 형광(fluorophores)를 분리할 수 있습니다.

TauSense 이미징 툴로 검사된 규조. 스펙트럼 강조 500~640nm의 스펙트럼 강도 이미지 TauContrast - 검색 테이블은 광자의 평균 도착 시간을 표시하고, 청색은 짧은 도착 시간, 긴 도착 시간은 황색에서 적색 방향으로 표시됨. 여러 가지 구조들을 드러나게 함. TauSeparation - 2가지 수명의 구성 요소가 분리됨. 구성 요소 1은 엽록체의 자동 형광을 표시하고(0.1 ns 평균 도착 시간), 구성 요소 2는 클린 LifeAct-GFP 신호를 표시함(2.7 ns 평균 도착 시간). 샘플은 Nicole Poulsen, B CUBE, TU Dresden, Germany이 제공함.

실험 생산성

모든 극저온 작업을 수행하면서 시료를 유리화한 즉시, 시료는 완전히 수분을 제거하고 극저온 상태를 유지해야 합니다.

극저온 스테이지 및 셔틀을 포함하는 당사의 혁신적인 Cryo Microscopy Kit를 사용하여 안전하고 직관적인 샘플 로딩, 직접적인 전달 작업이 가능하며, 시료를 항상 안전한 극저온 상태로 유지합니다.

극저온 스테이지를 통해 안정적인 극저온 상태에서 광학 현미경 작업을 수행할 수 있으며, 주변 대기에 대해 가스 질소의 일관된 광과압을 유지함으로써 탁월한 해상도의 3D 영상촬영에 필요한 이동이 가능합니다.

시료에 대한 더 안전한 로딩을 보장하기 위해 연구자는 이동 셔틀을 장착한 커버 박스(옵션)를 사용하여 모든 조건에서 안전한 로딩이 가능하고, 추가적인 프로세스 제어 기능을 활용하고, 안전한 로딩 시간을 확장할 수 있습니다.

공초점 광학 현미경 STELLARIS 5 Cryo

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