O contraste é nítido
Aquisição de imagens do tempo de vida em um instante STELLARIS 8 FALCON
O STELLARIS 8 FALCON (FAst Lifetime CONtrast - contraste rápido de tempo de vida) é o futuro da aquisição de imagens funcionais. Faça uso do poder do tempo de vida de fluorescência para investigar a fisiologia celular e explorar a dinâmica em células vivas. O STELLARIS 8 FALCON é uma solução totalmente integrada para Fluorescence Lifetime Imaging (FLIM, aquisição de imagens do tempo de vida da fluorescência) e permite a aquisição de imagens em velocidade de vídeo do tempo de vida para análises cinéticas rápidas em células vivas.
O STELLARIS 8 FALCON adiciona uma nova dimensão de contraste para a sua aquisição de imagens, possibilitando o sensoriamento biológico e o rastreamento de interações entre proteínas. As informações da FLIM agora estão disponíveis para todas as modalidades do sistema STELLARIS 8.
Agora você pode:
- Acompanhar interações moleculares rápidas por meio de FLIM-FRET (Förster Resonance Energy Transfer)
- Usar biossensores para detectar mudanças no estado metabólico e no microambiente
- Aplicar o contraste do tempo de vida para separar múltiplos fluoróforos
- Adquirir dados FLIM com o mínimo de treinamento
Acompanhar interações moleculares com FLIM-FRET
A pesquisa moderna investiga como as moléculas interagem para executar tarefas vitais. O FLIM-FRET é o padrão de excelência para explorar estas interações.
O STELLARIS 8 FALCON define um novo padrão de velocidade para instrumentos FLIM.
Ele permite FRET em eventos celulares altamente dinâmicos. Você pode adquirir e interpretar dados FRET em seus experimentos diários.
AMPc "caged" em células HeLa interpretado pelo sensor EPAC mT2-dVenus FRET. Resposta EPAC à liberação de AMPc mediadas por UV (área central). Filme capturado a 4 fps. Tamanho da imagem: 256 x 256 pixels. Escala de barra de cores (tempo de vida): ns. Cortesia de Kees Jalink, Bram van den Broek, NKI Amsterdam.
Oscilações de cálcio após estimulação com peptídeo ativador de trombina. A resposta em células individuais é registrada como uma mudança no tempo de vida. Filme capturado a 4 fps. Tamanho da imagem: 256 x 256 pixels. Escala de barra de cores (tempo de vida): ns. Cortesia de Kees Jalink, Bram van den Broek, NKI Amsterdam.
Monitore mudanças súbitas e rápidas com biossensores
Biossensores são relatores poderosos para atividades metabólicas, mecanismos sinalizadores, mudanças de pH e do microambiente.
O STELLARIS 8 FALCON proporciona acesso às informações contidas no tempo de vida da fluorescência, mesmo para eventos ultra-rápidos tais como a dinâmica do potencial da membrana. Essas informações complementam a aquisição de imagens espectrais da intensidade de fluorescência e modos TauSense fornecidos pelo sistema STELLARIS 8.
Aquisição mais confiável e sensível de imagens de metabolismo
Autofluorescência pode ser um problema na aquisição de imagens convencional. O STELLARIS 8 FALCON a transforma em informações valiosas. Agora você pode transformar a autofluorescência em um relator do estado metabólico, da diferenciação de células e do desenvolvimento de câncer.
Além disso, o STELLARIS 8 FALCON possibilita o contraste na aquisição de imagens em tecido vivo, onde a marcação da fluorescência muitas vezes não é específica ou destrói condições fisiológicas.
Separação de fluoróforos além das opções espectrais
A marcação da fluorescência é a maneira padrão para diferenciar estruturas intracelulares. A separação espectral é muito poderosa, mas, às vezes, é limitada quando os espectros de emissão estão muito próximos.
Com o STELLARIS 8 FALCON você pode explorar todo o potencial da aquisição de imagens do tempo de vida por fluorescência para separar múltiplas amostras fluorescentes usando adequação exponencial, adequação de padrão e e a nova análise de separação do fasor FLIM.
Imagem interativa Estruturas do citoesqueleto distinguidas pelo contraste do tempo de vida. Imunomarcação de vimentina com Alexa Fluor 555 (verde), e imunomarcação de tubulina com Alexa Fluor 546 (azul). Os fluoróforos são espectralmente muito parecidos, mas são distinguidos usando-se as informações do tempo de vida da fluorescência. Tamanho da imagem: 512 x 512 pixels.
STELLARIS 8 FALCON para a aquisição de imagens do tempo de vida
O microscópio STELLARIS 8 FALCON supera a limitação de velocidade da FLIM e abre as portas para dados rápidos de tempo de vida.
Até o momento, as informações funcionais extraídas dos dados de tempo de vida da fluorescência de processos rápidos eram difíceis de obter devido às limitações técnicas de FLIM. A velocidade de aquisição de FLIM foi pelo menos 10 vezes mais lenta do que o registro da intensidade confocal.
Usando a aquisição de imagens por contraste do tempo de vida do STELLARIS 8 FALCON, você pode acompanhar processos dinâmicos em células na velocidade apropriada. As tarefas são possíveis graças à nova maneira de medir o tempo usando TCSPC (Time-Correlated Single Photon Counting), juntamente com algoritmos inteligentes para processamento e análise dos dados.
Nota de aplicação na revista Nature: SP8 FALCON: um novo conceito na aquisição de imagens confocais FLIM em velocidade de vídeo
Imagem de canal único de grânulos fluorescentes (magenta) em uma solução contendo Alexa Fluor 555 (verde). A separação de fluoróforos baseada no tempo de vida da fluorescência é possível em diversas velocidades, como por exemplo, 16 fps (máximo), 27 fps (sequência de vídeo, centro) e 83 fps (ultrarrápido, em baixo). A utilização das informações do tempo de vida para a separação de corantes é significantemente mais vantajosa do que a intensidade (escala de cinza). Os vídeos mostram a adequação pixel a pixel dos componentes do tempo de vida. Tamanho do quadro: 512 x 64 pixels. Barra de escala: 10 µm.
Aquisição de imagem multimodal multifuncional
A combinação do FLIM com outras modalidades nunca foi tão fácil como com o STELLARIS 8 FALCON. Até agora, pesquisadores tiveram que lidar com cabeamentos complexos e procedimentos morosos de transferência de dados. Com o STELLARIS 8 FALCON, você pode integrar informações de tempo de vida a seu fluxo de trabalho confocal padrão.
O STELLARIS 8 FALCON está completamente integrado ao software de aquisição e análise de dados LAS X. Ele pode registrar a FLIM em quatro canais espectrais simultaneamente e em até 10 canais sequencialmente. O STELLARIS 8 FALCON lhe dá acesso ao contraste do tempo de vida em conjuntos 3D, sequências de lapso de tempo e até grandes formatos em padrão de mosaico.
Com o LAS X NAVIGATOR, você pode expandir a sua área de visão em até 10.000 vezes, poupando tempo valioso na identificação de suas regiões de interesse e explorando suas amostras de uma maneira completamente inovadora.
Definição direta de tempo de vida com fasores
A análise com o STELLARIS 8 FALCON usando fasores FLIMfornece uma visualização 2D de componentes de tempo de vida. Com fasores FLIM, você pode acompanhar mudanças microambientais, selecionar componentes para multiplexar o sinal e determinar a eficiência do FRET.
Os resultados de que você precisa – com um clique
O software LAS X possibilita o FLIM com um clique e a mesma filosofia da aquisição de imagens espectral rotineira.
Mesmo se usar a microscopia como uma técnica complementar, você pode encontrar os recursos essenciais e começar agora mesmo a aquisição de imagens.
Funções mais especializadas são acessíveis como fluxos de trabalho e permitem uma automação para a sua conveniência.
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