Fale conosco

O EM Cryo CLEM é um elemento essencial em nossos fluxos de trabalho criogênicos. Eu não quero perder isso.

Dr. Yannick Schwab, Chefe de equipe e diretor da Electron Microscopy Core Facility, EMBL Heidelberg (Alemanha)

Identifique e adquira imagens da sua região de interesse com mais clareza com o THUNDER

Para a visualização ideal de estruturas celulares, o THUNDER Imager EM Cryo CLEM combina uma objetiva de criogenia de alta resolução com a tecnologia THUNDER da Leica Microsystems. O resultado são imagens vivas sem obscurecimentos.

A tecnologia THUNDER emprega o método inovador da Leica de Compensação computacional para a remoção de distorções fora de foco que podem ocorrer na observação de campo amplo. O THUNDER Imager EM Cryo CLEM também inclui uma objetiva de 50x/0,9 NA. Ao contrário das objetivas de longa distância de trabalho comumente usadas, essa lente foi projetada objetivamente para a aquisição de imagens de alta resolução de amostras vitrificadas. Você se beneficia de uma melhor identificação e visualização de detalhes finos de estruturas celulares, em conjunto com a velocidade e facilidade de uso de um microscópio de campo amplo.

Aquisição interativa de imagens: células HeLa banhadas a ouro nas grades localizadoras Quantifoil R2/2 G200F1.
As células foram transferidas com GFP-TGN46 (rede trans Golgi) e mCherry-Lifeact (F-actina). Os núcleos foram corados com Hoechst 33342. Amostra de cortesia de Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, Londres (Reino Unido).

Células HeLa sem o THUNDER Imager Células HeLa com o THUNDER Imager

Fluxo de trabalho simples e reprodutível

Se precisar encontrar sua região de interesse rapidamente no microscópio eletrônico, você poderá facilmente optar por marcá-la e exportar as coordenadas durante a transferência de espécimes. O software intuitivo o guiará pelo fluxo de trabalho, para que você possa obter, rapidamente e com eficácia, os resultados de que precisa para sustentar sua investigação EM bem-sucedida. Para resultados de alta resolução e sem distorções, processe suas imagens depois com o THUNDER.

Benefícios:

  • Direcionamento e captura de dados fáceis e precisos: o software o guiará, etapa por etapa, pelo fluxo de trabalho de aquisição de imagens.
  • Aquisição de imagens descomplicada: basta marcar sua região de interesse e o software capturará automaticamente e unirá, com precisão, as imagens em mosaico
  • Pós-processamento com o THUNDER para imagens de alta resolução sem distorções
  • Resultados rápidos e reprodutíveis: você pode salvar e recuperar configurações completas de experimentos
THUNDER Imager EM Cryo CLEM
THUNDER Imager EM Cryo CLEM

Fácil recuperação com a transferência de coordenadas, utilizando microscopia óptica criogênica

O software integrado do THUNDER Imager EM Cryo CLEM não apenas o guiará pelo fluxo de trabalho de aquisição de imagens, mas também exportará os dados de imagens originais e coordenadas associadas com apenas um clique. Você pode realocar imediatamente a região celular desejada em seu microscópio eletrônico preferido e começar a sua investigação da ultraestrutura do espécime.

Se optar por trabalhar com o Thermo Fisher Scientific MAPS EM, você também pode se beneficiar de nosso fluxo de trabalho de tomografia criogênica eletrônica desenvolvido em conjunto. O fluxo de trabalho assegura uma integração completa, desde a vitrificação com o nosso EM GP2 até a reconstrução de imagens 3D com o TEM criogênico Thermo Scientific Krios™ G3i.

Imagens interativas: seleção e recuperação de coordenadas. Imagens de fluorescência de uma célula em uma grade EM visualizada e marcada seletivamente. Exatamente a mesma célula visualizada e realocada com o marcador de coordenadas, aqui no Thermo Scientific Aquilos.

Imagem de fluorescência de uma célula em uma grade EM visualizada e marcada seletivamente com o EM Cryo CLEM. Exatamente a mesma célula visualizada e recuperada com o marcador de coordenadas, aqui no Thermo Scientific Aquilos.

Condições criogênicas mantidas

Para maximizar a probabilidade de um resultado experimental bem-sucedido, o sistema exclusivo de cartuchos e platina de criogenia fechada garante que seus espécimes permaneçam vitrificados. O sistema minimiza o potencial de contaminação durante o processo de carregamento e transferência e, até mesmo, durante gravações de imagens de longo prazo.

Como isso funciona

O sistema de cartuchos (1) permite o tratamento seguro e rápido dos espécimes. O mecanismo de pressão e fixação acelera o tempo de processamento e carregamento dos espécimes de suas grades até a platina de criogenia.

Uma estação de ancoragem e transporte (2) protege a sua amostra criogênica, mantendo uma temperatura ideal.

A platina de criogenia (3) com tampa de objetiva sincronizada evita a contaminação do espécime pelo ar, mantendo-o sob sobrepressão estável.

Carregamento de um cartucho de grade no THUNDER Imager EM Cryo CLEM usando o shuttle de transferência
Carregamento de um cartucho de grade no THUNDER Imager EM Cryo CLEM usando o shuttle de transferência

Otimize o seu fluxo de trabalho com o THUNDER Imager EM Cryo CLEM

Aprimore o seu fluxo de trabalho de criogenia CLEM e de criogenia de lâminas em grade integrando o THUNDER Imager EM Cryo CLEM.

Para tornar o processo de preparação de amostras ainda mais confiável e eficiente, estabelecemos colaborações com nossos parceiros, Alvéole e Thermo Fisher Scientific.

Dados de cortesia do Dr. B. Engel, do Departamento de biologia estrutural molecular, do Instituto Max Planck para bioquímica em Martinsried na Alemanha. Publicação original: Albert S, Schaffer M, Beck F, Mosalaganti S, Asano S, Thomas HF, Plitzko JM, Beck M, Baumeister W, Engel BD. Ligação de proteassomas a dois locais distintos no complexo poroso nuclear.

Segmentação de um tomograma crioeletrônico, mostrando o ambiente celular nativo ao redor do núcleo. Ligação de proteassomas aos complexos porosos nucleares (roxo) em dois locais distintos (laranja: proteassomas ligados por membranas, amarelo: proteassoma ligado em cesta, azul: proteassomas livres). O envelope nuclear (cinza), ribossomas (preto/branco) e uma mitocôndria (vermelha, com linhas de sintases ATP amarelas) também são mostrados.
Segmentação de um tomograma crioeletrônico, mostrando o ambiente celular nativo ao redor do núcleo. Ligação de proteassomas aos complexos porosos nucleares (roxo) em dois locais distintos (laranja: proteassomas ligados por membranas, amarelo: proteassoma ligado em cesta, azul: proteassomas livres). O envelope nuclear (cinza), ribossomas (preto/branco) e uma mitocôndria (vermelha, com linhas de sintases ATP amarelas) também são mostrados.

Posicionamento de célula com o PRIMO da Alvéole

Controle o local de adesão celular e o formato de crescimento em grades EM com o PRIMO, o sistema de micropadronização sem máscara da Alvéole. Tenha a certeza de que você obterá uma célula bem localizada contendo a estrutura de destino que você procura. O PRIMO pode ser adicionado a todos os fluxos de trabalho do Cryo CLEM como primeira etapa.

Fluxo de trabalho de tomografia crioeletrônica totalmente integrado com a Thermo Fisher Scientific

Trabalhamos em estreita colaboração com a Thermo Fisher Scientific para desenvolver um fluxo de trabalho de tomografia crioeletrônica totalmente integrado. O THUNDER Imager EM Cryo CLEM e o Aquilos cryo FIB-SEM se comunicam facilmente entre si. Eles permitem a rápida recuperação da estrutura de destino e uma transferência segura e protegida entre os sistemas.

Saiba mais aqui sobre a integração do PRIMO e nosso fluxo de trabalho desenvolvido conjuntamente com a Thermo Fisher Scientific.

Clique nas soluções de fluxo de trabalho abaixo e saiba como obter resultados de alta qualidade. Para obter mais informações sobre soluções de fluxo de trabalho para pesquisa no setor de ciências da vida, baixe nosso livreto de fluxos de trabalho.

(1) Grade EM sem micropadronização | (2) Controle de adesão celular com PRIMO | (3) Vitrificação | (4) Seleção | (5) Fragmentação | (6) Tomografia criogênica em 3D | (7) Proteína em contexto celular
(1) Grade EM sem micropadronização | (2) Controle de adesão celular com PRIMO | (3) Vitrificação | (4) Seleção | (5) Fragmentação | (6) Tomografia criogênica em 3D | (7) Proteína em contexto celular

Cryo CLEM Workflow

Show details

Fluxo de trabalho do Cryo CLEM

Se desejar preparar amostras de tecido, adicione o THUNDER Imager EM Cryo CLEM como etapa intermediária no seu fluxo de trabalho do Cryo CLEM.

Ele permite identificar facilmente a região de interesse e preparar a lâmina no local específico dentro da amostra.

(1) Posicionamento celular com PRIMO | (2) Congelamento de alta pressão (EM ICE) | (3) Seccionamento criogênico (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Aquisição de imagens no TEM
(1) Posicionamento celular com PRIMO | (2) Congelamento de alta pressão (EM ICE) | (3) Seccionamento criogênico (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Aquisição de imagens no TEM

Cryo On-Grid Lamella Workflow (a)

Show details

Fluxo de trabalho de lâmina criogênica em grade (a)

Para obter resultados confiáveis na análise de estruturas de proteínas em seu ambiente nativo, use o fluxo de trabalho totalmente integrado com o cryo-FIB SEM da Thermo Fisher.

Selecione as células mais adequadas para análise com o THUNDER Imager EM Cryo CLEM e transfira as coordenadas para o Aquilos da Thermo Scientific, onde você poderá recuperá-las imediatamente. O Aquilos supera as limitações de espessura e cria uma folha de gelo fina que pode, então, ser examinada no TEM.

Fluxo de trabalho de lâmina criogênica em grade - Usando o Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Posicionamento de célula com PRIMO | (2) Congelamento por imersão (EM GP2) | (3) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Fragmentação e revestimento com o Aquilos cryo FIB SEM da Thermo Fisher | (5) Aquisição de imagens no TEM
Fluxo de trabalho de lâmina criogênica em grade - Usando o Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Posicionamento de célula com PRIMO | (2) Congelamento por imersão (EM GP2) | (3) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Fragmentação e revestimento com o Aquilos cryo FIB SEM da Thermo Fisher | (5) Aquisição de imagens no TEM

Cryo On-Grid Lamella Workflow (b)

Show details

Fluxo de trabalho de lâmina criogênica em grade (b)

O THUNDER Imager EM Cryo CLEM pode ser integrado no fluxo de trabalho de FIB-SEM.

Nossos produtos podem ser facilmente conectados para garantir uma transferência de amostras segura por todo o processo.

Fluxo de trabalho com lâmina criogênica em grade - para todos os fornecedores de FIB-SEM, exceto o Aquilos cryo-FIB SEM da Thermo Fisher. (1) Posicionamento de célula com PRIMO | (2) Congelamento por imersão (EM GP2) | (3) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transferência (EM VCM) | (5) Revestimento (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transferência (EM VCT500) | (7) Fragmentação no FIB | (8) Aquisição de imagens no TEM
Fluxo de trabalho com lâmina criogênica em grade - para todos os fornecedores de FIB-SEM, exceto o Aquilos cryo-FIB SEM da Thermo Fisher. (1) Posicionamento de célula com PRIMO | (2) Congelamento por imersão (EM GP2) | (3) Identificação da região de interesse (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transferência (EM VCM) | (5) Revestimento (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transferência (EM VCT500) | (7) Fragmentação no FIB | (8) Aquisição de imagens no TEM
Background image
Scroll to top