Microscopia de fluorescência

A fluorescência é um dos fenômenos físicos mais comumente usados na microscopia biológica e analítica, principalmente devido a sua alta sensibilidade e alta especificidade. A fluorescência é uma forma de luminescência.

A microscopia de fluorescência permite aos usuários determinar a distribuição de uma espécie de molécula simples, sua quantidade e localização dentro de uma célula. Estudos de colocalização e de interação podem ser realizados, e podem ser observadas concentrações de íons, bem como processos intra e intercelulares como endocitose e exocitose.

Com a ajuda da microscopia de fluorescência de super resolução, ainda é possível captar imagens de estruturas de sub-resolução.

Leia mais sobre a microscopia de fluorescência, a fluorescência quantitativa e a super-resolução no Leica Science Lab.

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Leica DMi8 Sistema de imagem de fluorescência

Microscópios de Luz Fluorescente

Os microscópios de fluorescência usados nas aplicações de pesquisa baseiam-se em um conjunto de filtros óticos:

um filtro de excitação
um divisor de feixe dicroico e
um filtro de emissão

Normalmente, os filtros são conectados juntos em uma cuba de filtro (microscópios compostos) ou em um suporte plano (principalmente microscópios estéreos).

Enquanto o filtro de excitação seleciona os comprimentos de onda para excitar um corante em particular dentro da amostra, o filtro de emissão serve como um tipo de controle de qualidade, deixando passar apenas os comprimentos de onda relevantes emitidos pelo fluoróforo. A finalidade do espelho dicroico é refletir a luz na banda de excitação e transmitir luz na banda de emissão, permitindo a clássica iluminação incidente de epifluorescência.

Microscópios estéreos de fluorescência

Os microscópios estéreos de fluorescência da Leica Microsystems utilizam a tecnologia TripleBeam, um terceiro caminho separado de feixes para iluminação de fluorescência da amostra sem um espelho dicroico.

Portanto, são necessários um filtro de excitação para o caminho de feixes de iluminação e dois filtros de emissão, um para cada caminho de feixes de observação.

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Leica M205 FCA & M205 FA | Leica M165 FC | Leica MZ 10 F | Leica Fluocombi III

Microscópios estéreos de fluorescência Leica M165 FC e Leica M205 FA

Absorvendo dados, emitindo beleza

Para capturar imagens de fluorescência, é necessário utilizar a câmera de fluorescência CCD ou sCMOS adequada. A Leica Microsystems oferece câmeras de fluorescência específicas para todas as suas necessidades de aplicação. Cada câmera fornece a combinação perfeita de sensibilidade e qualidade de imagem para garantir excelentes resultados.

Absorvendo complexidade, emitindo simplicidade

A configuração fácil e o controle simples dos experimentos estão se tornando cada vez mais importantes na microscopia de fluorescência. A plataforma específica do software Leica Application Suite (LAS) X facilita a configuração dos experimentos mais complexos. O LAS X guia você desde a configuração até a análise dos dados de captura de imagem. Desde experimentos fáceis multi-canais até análises 3D mais complexas, o LAS X é a plataforma perfeita de software.