Os microscópios de fluorescência usados em aplicações de pesquisa são baseados em um conjunto de filtros ópticos:

• um filtro de excitação
• um divisor de feixe dicroico e
• um filtro de emissão

Os filtros geralmente são conectados em conjunto em um cubo de filtragem (microscópios compostos) ou em um suporte plano (principalmente estereomicroscópios).

Enquanto o filtro de excitação seleciona os comprimentos de onda para excitar um marcador específico dentro da amostra, o filtro de emissão serve como um tipo de controle de qualidade, permitindo a passagem apenas dos comprimentos de onda de interesse emitidos pelo fluoróforo. O objetivo do espelho dicroico é refletir a luz na banda de excitação e transmitir luz na banda de emissão, permitindo a iluminação clássica da luz incidente de epifluorescência.

Para adquirir imagens de fluorescência, é necessário utilizar a câmera de fluorescência CCD ou sCMOS apropriada.

A Leica Microsystems oferece câmeras de fluorescência dedicadas para todas as necessidades de aplicação.

Cada câmera propicia a correspondência perfeita entre sensibilidade e qualidade das imagens para garantir resultados incríveis.

A microscopia de fluorescência se tornou o fenômeno físico mais importante na biologia e medicina modernas.

Após um início lento, a possibilidade de marcação fluorescente alavancou essa aplicação no início da década de 30 do século passado. Por volta de 1950, um segundo estágio foi iniciado com a invenção da marcação de imunofluorescência.

A aquisição de imagens funcionais, com destaque para sondas de Ca++, libertou a metodologia das limitações de apenas fornecer imagens morfológicas e estruturais. A possibilidade de criar materiais vivos com proteínas fluorescentes revolucionou a microscopia de fluorescência para um inesperado e extenso terceiro estágio.

Atualmente, novos métodos que utilizam proteínas fluorescentes estão surgindo semanalmente. E, por último, mas não menos importante: todos os modos de aquisição de imagens de super resolução são baseados em fluorescência.