STED e STELLARIS: Super-resolução reinventada

A combinação do STED e STELLARIS em um único instrumento oferece os benefícios de seus excelentes recursos confocais e acesso a uma super-resolução detalhada.

PODER 

Estude múltiplos eventos simultaneamente e interações moleculares em nanoescala e abrangendo todo o espectro, graças à combinação única do nosso WLL de próxima geração, caminho de feixe otimizado, detectores rápidos Power HyD e até 3 linhas de laser STED.

POTENCIAL

Eleve o nível da aquisição de imagens de super-resolução do STED com o TauSTED, nossa nova abordagem para STED com base no tempo de vida de fluorescência, que proporciona qualidade de imagem de ponta e condições suaves para células vivas.

PRODUTIVIDADE

Adquira imagens confocais e STED surpreendentes e com facilidade e configure seu experimento com alguns cliques, graças à nova interface do usuário ImageCompass.

Confocal
TauSTED

STED para biologia celular: O TauSTED 775 multicores para células vivas resolve a complexa rede de citoesqueleto marcada com SiR-tubulina (glow) e vesículas em trânsito marcadas com CF594 (ciano). Barra de escala: 5 mm . SiR-tubulina está disponível na Spirochrome. CF594 cortesia da Biotium, Inc.

STELLARIS STED e STELLARIS 8 STED

O STELLARIS oferece duas opções para incorporar o STED ao seu sistema: STELLARIS STED, a solução STED integrada, e STELLARIS 8 STED, nosso avançado sistema escalável. Ambos oferecem os mesmos benefícios em termos de desempenho de STED, para que você possa se concentrar nas capacidades adicionais do STELLARIS ao decidir qual opção atende melhor às suas necessidades.

STELLARIS 8 STED

O poder de STED no STELLARIS 8 para nanoscopia 2D e 3D com até 3 linhas STED

  • WLL com excitação de 440 nm até 790 nm
  • Power HyD S, HyD X e HyD R disponíveis, para aplicações no vermelho estendido
  • TauSTED oferecido pelo TauSense e, se o FALCON estiver disponível, com análise FLIM completa
  • Totalmente atualizável para outras modalidades (FALCON, FCS)

STELLARIS STED

  • STED multifuncional, para nanoscopia 2D e 3D com até 3 linhas STED
  • WLL com excitação de 485 nm até 685 nm
  • Power HyD S e HyD X disponíveis
  • TauSTED oferecido pelo TauSense

A capacidade de ver mais e resolver relações moleculares em suas amostras

Para caracterizar os mecanismos por trás de processos, como transporte celular, diferenciação e  divisão celular, é necessário ter a melhor qualidade de imagem possível, flexibilidade para projetar seu experimento e velocidade para observar biomoléculas específicas em seu ambiente nativo.

Graças à combinação com a plataforma STELLARIS, o STED aproveita a nossa tecnologia de laser de luz branca (WLL)/AOBS de última geração, um caminho de feixe recentemente otimizado, detecção espectral com a família de detectores Power HyD e várias linhas STED (592, 660, 775 nm). O STED fornece imagens brilhantes para caracterizar estruturas com detalhes em nanoescala, possibilita estudos de localização com a mais alta flexibilidade para a seleção de fluoróforos e permite acompanhar processos altamente dinâmicos.

STED para pesquisa sobre malária: O STED 775 3D elucida os mecanismos por trás da invasão de eritrócitos por merozoítos. As imagens mostram sobreposições de RON4 (magenta) com as proteínas PfRh5 (esquerda, verde), PfRipr (meio, verde) e PfCyRPA (direita, verde). A coloração nuclear é mostrada em azul e a membrana eritrocitária é mostrada em cinza. Barra de escala: 1 µm. Imagem de cortesia de Jennifer Volz, Alan Cowman, do Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, na Austrália, e Marko Lampe, EMBL, na Alemanha.

Aumente o número de eventos simultâneos que você pode estudar em nanoescala

A marcação por fluorescência multicolorida tem o poder de revelar relações entre espécies intracelulares, porque você pode adquirir imagens de diferentes componentes com especificidade molecular.

STED e STELLARIS se destacam em aplicações multicoloridas. Você pode usar os melhores corantes na região vermelha do espectro, procurar proteínas fluorescentes em verde ou explorar novas sondas fluorogênicas em laranja. Você pode realizar estudos de localização de várias espécies e resolvê-los com detalhes de subdifração.

Nossa detecção espectral oferece até cinco detectores Power HyD compatíveis com STED, para que você possa ampliar o número de atores moleculares que serão localizados no tempo e no espaço. Além disso, os recursos digitais e a velocidade dos detectores Power HyD, com 1,5 ns de tempo morto do sistema completo, garantem que você obtenha uma excelente qualidade de imagem em termos de relação sinal/ruído e de segundo plano, ao mesmo tempo em que fornece pelo menos 10x mais tempo de espera de coleta de fótons/pixels em comparação com os APDs.

STED para Biologia de Desenvolvimento: smFISH* de RNA em uma preparação de montagem completa de embrião de drosófila. As sondas são marcadas diretamente e não há amplificação de sinal. Parte superior: três cores TauSTED 775 capturam o sinal de hb CalFluor 610 (ciano), gt Quasar 670 (verde) e eve Quasar 705 (magenta). Fundo: imagem confocal de todo o embrião de drosófila. Amostra de cortesia de Tom Pettini, da Universidade de Manchester, no Reino Unido. *Hibridação in-situ de molécula única

Aquisição de imagens STED 2D e 3D com excelente brilho e resolução

Com o STED e o STELLARIS, você pode obter os resultados necessários em 2D e 3D, já que a resolução se torna ajustável em x, y e z. Para garantir que você obtenha o melhor brilho e resolução em 2D e 3D, oferecemos a melhor óptica para garantir a sobreposição ideal da excitação e do PSF do STED em todo o espectro e que as capacidades de quantificação não sejam perdidas devido a correções adaptativas. Nossas lentes objetivas STED WHITE foram desenvolvidas especialmente para garantir condições ideais para uma variedade de experimentos STED:

  • As lentes de óleo STED WHITE 100x oferecem a mais alta resolução, bem como um excelente desempenho para a aquisição de imagens diárias de amostras fixas
  • A lente de glicerol STED WHITE 93x propicia a correção adaptativa para flutuações de temperatura, incompatibilidade do índice de refração e falta de homogeneidade ao olhar profundamente na amostra, graças à tecnologia de colar de correção totalmente motorizada motCORR
  • A lente STED WHITE 86x Water com motCORR também propicia correção adaptativa, conforme explicado acima, e é ideal para aplicações suaves com células vivas e STED-FCS (1).

(1) “Altas taxas de contagem de fótons melhoram a qualidade da espectroscopia de flutuação de fluorescência de super-resolução” F. Schneider et al. J. Phys. D: Apl. Phys. 53 164003, 2020.

STED para biologia celular: O 3D TauSTED 660 revela a distribuição de poros nucleares (NPCs) em células COS7 imunomarcadas para complexos Nup com AF555. O anticorpo primário mAb414 reconhece várias nucleoporinas do complexo de poros e produz uma coloração semelhante tipo pontilhada. Tamanho da imagem: 12 µm, com codificação de cores z.

TauSTED: A nanoscopia encontra o tempo de vida

Amplie o potencial de seus experimentos STED graças à excelente resolução, qualidade de imagem e proteção de amostras oferecidas pela nossa exclusiva tecnologia TauSTED.

O TauSTED distingue fótons provenientes do processo STED daqueles do plano de fundo, usando o gradiente de tempo de vida de fluorescência induzido pela presença de STED. Como resultado, você pode realizar a aquisição de imagens com uma resolução além de STED* convencional em uma dose de luz significativamente mais baixa, permitindo a nanoscopia de células vivas de longo prazo.

Você pode aplicar o TauSTED em todos os seus experimentos STED, especialmente em estudos de colocalização multicolorida. Com o FALCON, você pode até mesmo separar marcadores STED de sobreposição espectral.

*Resolução < 30 nm (lateral) e < 100 nm (axial), dependendo da amostra e do fluoróforo.

Confocal
TauSTED

STED para pesquisa de doenças renais: Rim de camundongo 2D e 3D TauSTED 775 multicolorido não clarificado e imunomarcado para sinaptopodina (verde) e nefrina (magenta). A lente de glicerol STED WHITE propicia a correção adaptativa ideal para resolver as proteínas dentro da arquitetura de tecido altamente compacta. Barra de escala: 10 µm. Amostra de cortesia de Victor Puelles, Milagros Wong e Jan Czogalla, da Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf, na Alemanha.

O TauSTED fornece uma excelente resolução em dosagens de luz muito mais baixas

Quando você procura estratégias de baixa iluminação para o seu experimento STED, há uma pergunta fundamental: O que é realmente baixo? A resposta não é nada trivial, pois depende da sua amostra e do fluoróforo escolhido.

Não prometemos reduções arbitrárias na dosagem de luz que não estejam relacionadas ao seu experimento. Em vez disso, podemos mostrar que o TauSTED reduz significativamente a excitação e a dosagem de luz STED, para que você possa realizar suas medições com sucesso no tempo e espaço. Com o TauSTED, você elimina o fundo e obtém a melhor resolução, evitando dosagens de compensação mais altas e perda de capacidades de quantificação.

Essa vantagem é possível graças à combinação única de STED com os recursos da nossa plataforma STELLARIS: os detectores Power HyD ultrarrápidos e acesso à dimensão de tempo de vida fornecidos pelo TauSense (STELLARIS STED e STELLARIS 8 STED) e FLIM (STELLARIS 8 FALCON).

STED para biologia celular: O TauSTED 660 revela a distribuição de poros nucleares (NPCs) em células COS7 imunomarcadas para complexos Nup com AF555. Apenas 2% da luz STED revela muito mais detalhes. O anticorpo primário mAb414 reconhece várias nucleoporinas do complexo de poros e produz uma coloração semelhante tipo pontilhada.

Levando a resolução para além dos limites convencionais

O TauSTED mede as informações baseadas em tempo de vida de fluorescência adquiridas em cada experimento com STED e mapeia a resposta STED do fluoróforo em tempo real. O acesso a essas informações permite aumentar a qualidade da imagem (sinal/ruído), eliminar fótons do fundo usando princípios físicos e impulsionar a resolução além dos limites do STED com base em intensidade, independentemente de qual excitação e linha STED (592, 660, 775) você estiver usando.

O TauSTED faz tudo isso de maneira automatizada, para que você possa se concentrar em sua amostra e ver os detalhes que, do contrário, não conseguiria perceber.

Imagens STED e DNA origami: O TauSTED 775 oferece resoluções < 30 nm em GATTA-Bead R cujo tamanho nominal é de 23 nm. Barra de escala: 1 µm.

Super-resolução STED suave para a aquisição de imagens estendidas de células vivas ​

A menor excitação e a dosagem de luz STED se traduzem em proteção para a amostra.

Essa capacidade permite experimentos de time-lapse mais longos, ou seja, mais quadros, ou aquisição de imagens em maior volume sem sacrificar a resolução espacial. ​

STED para biologia celular: TauSTED 592 suave de células vivas em células que expressam LifeAct-mNeonGreen de maneira estável. Barra de escala: 5 µm. Aqui, a imagem em time-lapse mostra 230 quadros a 1 fps. Amostra de cortesia de Max Heydasch, da Universidade de Berna, na Suíça.

Espécies separadas com espectros sobrepostos usando STED-FLIM

Ao combinar as modalidades STED e FALCON no STELLARIS 8, é possível realizar a super-resolução multicolorida com os melhores fluoróforos STED (emissão de infravermelho distante), pois você pode separar as espécies usando seu tempo de vida de fluorescência.

Os espectros de emissão desses fluoróforos se sobrepõem fortemente e não podem ser distinguidos usando a aquisição de intensidade tradicional. Ao combinar o STED-FLIM com nossa Separação de Phasor automatizada, os fluoróforos são claramente separados usando seus tempos de vida distintos e um único detector.

STED-FLIM para biologia celular: A separação de fases automatizada STED 775 e FALCON permite separar espécies com espectros sobrepostos usando seu tempo de vida de fluorescência. Em células HEK marcadas para vimentina e actina, as informações de intensidade da contagem de fótons sozinhas (cinza), mostram ambas as estruturas como indistintas, enquanto elas são claramente distinguidas com STED-FLIM (verde, Vimentina AF647; magenta, Actina ATTO 647N-faloidina). Barra de escala: 4 µm. Amostra de cortesia de Sebastian Hänsch, Stephanie Weidtkamp-Peters, CAI, Düsseldorf, na Alemanha.

Aumente sua produtividade com um STED fácil de configurar

O STELLARIS fornece acesso direto ao STED para iniciantes e especialistas. Agora você pode criar seus experimentos combinando confocal e multicores, bem como 2D e 3D STED, com apenas alguns cliques.

  • Obtenha resultados em que você pode confiar graças à orientação inteligente do ImageCompass, que se concentra nas características da sua amostra.
  • Garanta o mais alto desempenho STED com auto-alinhamento de feixe com um clique, protegendo sua amostra da irradiação de luz e alcançando o posicionamento ideal do laser foci de forma totalmente automatizada.
  • Adquira imagens de grandes áreas rapidamente com o LAS X Navigator e selecione suas regiões de interesse para a aquisição de imagens STED.
  • Valide seus resultados graças às capacidades do STELLARIS, como acesso a dados brutos e contagem rápida e eficiente de fótons.
Interface do usuário ImageCompass para STED no STELLARIS.

Valide seus resultados rapidamente e em uma única plataforma

A combinação de STED e STELLARIS significa que você pode validar seus achados, pois os dados STED, confocal, LIGHTNING e TauSense estão todos disponíveis no mesmo sistema.

A combinação também significa que você pode acessar seus dados brutos para quantificação. O TauSTED permite a subtração do fundo e o ajuste da resolução a partir da leitura física das informações de tempo de vida de fluorescência.

Com o STELLARIS, você está sempre no controle de seu experimento de nanoscopia.

STED para microbiologia: Flagelos bacterianos visualizados com aquisição de imagens confocais correlativas de três cores -LIGHTNING-STED, o que permite a investigação e validação de amostras usando abordagens complementares. Amostra de cortesia de Marc Erhardt, da Universidade Humboldt, Berlim, na Alemanha.

Interessado em saber mais?

Fale com nossos especialistas. Ficaremos felizes em responder todas as suas dúvidas e preocupações.

Fale conosco

Você prefere consultoria pessoal?


Você encontrará uma lista mais detalhada de todos os contatos aqui.