Microscopios DIC
La mayoría de las personas utilizan la iluminación de campo claro cuando utilizan un microscopio. Por desgracia, a menudo ofrecen una imagen de bajo contraste con muchas muestras biológicas donde se pueden distinguir pocos detalles. Se puede utilizar la tinción selectiva para mejorar el contraste con el campo claro, pero existe el riesgo de que la tinción pueda ser tóxica para las células vivas. Con la microscopía DIC (siglas inglesas de «contraste interdiferenecial») no es necesaria la tinción para ver las estructuras de muchos tipos de muestras biológicas con un mayor contraste en comparación con el campo claro. El método de contraste aprovecha la luz polarizada y las diferencias en el grosor o la densidad óptica de la muestra que provocan un desplazamiento de fase de la luz que pasa a través de ella.
La función DIC está disponible en algunos microscopios de Leica. Puede ser útil para la observación de células o tejidos en diversas aplicaciones de ciencias biológicas y forenses. La microscopía DIC también puede ser útil para determinadas aplicaciones de materiales y minerales.
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¿Qué es la microscopía DIC y para qué se utiliza?
DIC son las siglas inglesas de contraste interdiferencial, una técnica de contraste óptico para microscopía que permite observar estructuras sin tinción en las células de especímenes biológicos con un contraste y una resolución adecuados. También puede ayudar a visualizar pequeñas diferencias de altura en las superficies de los materiales. Solo se utiliza luz polarizada para iluminar la muestra. La luz polarizada se dispersa en dos rayos de luz distintos con un plano ortogonal de polarización. A medida que los rayos experimentan una refracción o dispersión diferentes en la muestra, se producen diferentes desplazamientos de fase. Cuando estos rayos de luz se vuelven a unir, interfieren y se polarizan elípticamente. Esta polarización puede transformarse en un cambio de amplitud mediante un analizador. Los cambios de fase correspondientes a diferencias tan pequeñas como 1/1000 de la longitud de onda (cuando se detectan con un sensor de cámara) se pueden observar en las imágenes DIC. Las imágenes de microscopía DIC parecen tener relieve y sombra.
¿Cómo se configura la microscopía DIC?
Un microscopio DIC es un microscopio de campo ancho que tiene un filtro de polarización y un prisma Wollaston entre la fuente de luz y la lente del condensador, así como entre la lente del objetivo y el sensor de la cámara o los oculares. Para obtener más información sobre su configuración, consulte los artículos: Contraste interdiferencial (DIC) y Metalografía
La luz de una fuente pasa a través de un filtro y se polariza 45°. Después de pasar a través de un prisma Wollaston, la luz se separa en componentes polarizados perpendiculares donde uno está polarizado a 0° y el otro a 90°. La lente del condensador enfoca la luz sobre la muestra que está iluminada por dos rayos paralelos coherentes con diferente polarización. Los rayos experimentan diferentes longitudes de recorrido óptico, ya que puede haber diferencias en el grosor o el índice de refracción a lo largo del recorrido por el que pasan a través de la muestra.
Esto provoca el desplazamiento de fase de un rayo en comparación con el otro. Después de atravesar el objetivo y otro prisma Wollaston, la luz polarizada perpendicularmente se recombina para convertirse en una luz polarizada a 135°. En función de las diferencias en las longitudes del recorrido óptico, la interferencia de los dos rayos provoca una interferencia constructiva (brillo) o destructiva (oscurecimiento), lo que hace que las estructuras apenas visibles con campo claro puedan verse ahora con DIC.
Finalmente, la luz transmitida directamente, que no experimentó ningún desplazamiento de fase, es eliminada por el filtro de polarización (también llamado analizador), que solo deja pasar la luz polarizada a 135°. Para obtener más información, consulte el artículo: Contraste interdiferencial (DIC)
Preguntas frecuentes sobre los microscopios DIC
Un microscopio DIC es similar a un microscopio de campo claro convencional, con la diferencia de que utiliza un filtro de polarización y un prisma Wollaston entre la fuente de luz y la lente del condensador, así como entre el objetivo y el sensor de la cámara o los oculares. Para obtener más información, consulte los artículos: Contraste interdiferencial (DIC) y Metalografía
A principios de la década de 1950, Georges Nomarski inventó la técnica de contraste microscópica conocida como contraste interdiferencial o DIC. Hoy en día, sigue siendo una técnica ampliamente utilizada. Para obtener más detalles, consulte los artículos: Breve historia de la microscopía óptica y Contraste interdiferencial (DIC)
Sí, un microscopio DIC puede equiparse con una cámara para la toma de imágenes con contraste DIC.
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