Microscopios de campo oscuro

Cuando se trabaja con un microscopio, el método de contraste más comúnmente utilizado es el campo claro. Sin embargo, el campo claro apenas proporciona una imagen de bajo contraste de muchos especímenes biológicos transparentes. También puede ser el caso de muchas muestras de materiales transparentes u opacos reflectantes. En imágenes de tan bajo contraste, se distinguen pocos detalles. El contraste en la microscopía de campo claro para muestras biológicas se puede mejorar utilizando tinciones selectivas, pero a menudo son tóxicas para las células vivas. Un microscopio de campo oscuro ofrece la forma de ver estructuras de muchos tipos de especímenes biológicos con gran contraste sin necesidad de tinciones. La microscopía de campo oscuro también puede aumentar el contraste mediante la obtención de imágenes de las muestras de material. El método de contraste de campo oscuro aprovecha la difracción o dispersión de la luz de las estructuras de un espécimen biológico o las características no uniformes de una muestra de material.

Los microscopios de campo oscuro de Leica son útiles para el estudio de células o tejidos en una gran variedad de aplicaciones de ciencias biológicas y forenses. La microscopía de campo oscuro también puede ser útil para aplicaciones de materiales y ciencias de la tierra.

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¿Qué es el campo oscuro?

El campo oscuro es una técnica de contraste óptico en microscopía que revela estructuras sin teñir en las células de especímenes biológicos. Las estructuras celulares que aparecen transparentes con la iluminación de campo claro se pueden ver con mejor contraste y detalle aplicando el campo oscuro. Además, las características no uniformes de materiales transparentes o en la superficie de las muestras de materiales opacos se pueden ver más fácilmente con el campo oscuro que con el campo claro. Las estructuras de la célula o las características del material dispersan la luz que interactúa con ellas, mientras que las áreas uniformes permiten que la luz pase sin dispersarse. Cuando se utiliza la microscopía de campo oscuro, las estructuras celulares o las características del material aparecen en un tono más brillante y el fondo uniforme de la célula o del material aparecen en un tono más oscuro.

¿Para qué se puede utilizar un microscopio de campo oscuro? ¿Qué tipos de muestras se pueden visualizar?

Con mucha frecuencia, el microscopio de campo oscuro permite ver especímenes y tejidos biológicos, ya sean fijos o vivos. También se pueden observar distintas muestras geológicas y de materiales con campo oscuro. Si desea ejemplos, consulte los artículos: «Work More Efficiently in Developmental Biology With Stereo Microscopy: Zebrafish, Medaka, and Xenopus» y «How to Adapt Grain Size Analysis of Metallic Alloys to Your Needs»

¿Cómo funciona un microscopio de campo oscuro?

Un microscopio de campo oscuro es un microscopio compuesto que utiliza una apertura con forma de anillo situada entre la fuente de luz y la lente del condensador. 

El condensador enfoca la luz que pasa por la abertura en forma de anillo sobre el espécimen biológico o la muestra de material que se va a observar. Las estructuras del espécimen o las características de la muestra difractan o dispersan porciones de la luz anular. La luz difractada entra en el objetivo. Por el contrario, el objetivo no recogerá la porción de luz en forma de anillo que pasa directamente a través de la muestra sin desviación o que es reflejada por la muestra sin dispersión. La luz dispersada por las estructuras del espécimen o las características de la muestra parecerá más brillante que las áreas del fondo del espécimen o la muestra donde no hay dispersión de la luz.

Para obtener más información, consulte el artículo: «Metallography - an Introduction»

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Preguntas frecuentes sobre los microscopios de campo oscuro

Show answer 明场显微镜与暗场显微镜有何差别?

暗场显微镜与传统的明场显微镜相似,不同之处在于暗场显微镜的光源前面有环形孔。暗场照明的光以高入射角照射到标本或样本上,其要么射透样本,要么被其表面反射,然后再通过物镜,最后通过目镜或进入相机传感器。暗场照明会使透明样本的均匀区域或不透明样本的平整表面看上去很暗,因为大多数光在高入射角下都会偏离物镜。一般情况下,透明样本或不透明样本的表面都会有散射光的特征。也是由于这个原因,暗场显微镜的图像中显示的背景较暗,而与这些特征相对应的区域因为散射光进入了物镜,所以看上去较亮。

Show answer 暗场显微镜下的样本可以是活的吗?

可以,活的生物标本,如细胞或生物体,使用暗场显微镜更易于观察。

Show answer 暗场显微镜可以使用带相机或其他配件吗?

可以,暗场显微镜可以配备相机来记录通过光学对比法观察到的图像。其还可以配备其他配件。如需了解更多信息,请联系当地的徕卡销售代表。

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