Microscopios de campo oscuro

Cuando se trabaja con un microscopio, el método de contraste más comúnmente utilizado es el campo claro. Sin embargo, el campo claro apenas proporciona una imagen de bajo contraste de muchos especímenes biológicos transparentes. También puede ser el caso de muchas muestras de materiales transparentes u opacos reflectantes. En imágenes de tan bajo contraste, se distinguen pocos detalles. El contraste en la microscopía de campo claro para muestras biológicas se puede mejorar utilizando tinciones selectivas, pero a menudo son tóxicas para las células vivas. Un microscopio de campo oscuro ofrece la forma de ver estructuras de muchos tipos de especímenes biológicos con gran contraste sin necesidad de tinciones. La microscopía de campo oscuro también puede aumentar el contraste mediante la obtención de imágenes de las muestras de material. El método de contraste de campo oscuro aprovecha la difracción o dispersión de la luz de las estructuras de un espécimen biológico o las características no uniformes de una muestra de material.

Los microscopios de campo oscuro de Leica son útiles para el estudio de células o tejidos en una gran variedad de aplicaciones de ciencias biológicas y forenses. La microscopía de campo oscuro también puede ser útil para aplicaciones de materiales y ciencias de la tierra.

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¿Qué es el campo oscuro?

El campo oscuro es una técnica de contraste óptico en microscopía que revela estructuras sin teñir en las células de especímenes biológicos. Las estructuras celulares que aparecen transparentes con la iluminación de campo claro se pueden ver con mejor contraste y detalle aplicando el campo oscuro. Además, las características no uniformes de materiales transparentes o en la superficie de las muestras de materiales opacos se pueden ver más fácilmente con el campo oscuro que con el campo claro. Las estructuras de la célula o las características del material dispersan la luz que interactúa con ellas, mientras que las áreas uniformes permiten que la luz pase sin dispersarse. Cuando se utiliza la microscopía de campo oscuro, las estructuras celulares o las características del material aparecen en un tono más brillante y el fondo uniforme de la célula o del material aparecen en un tono más oscuro.

¿Para qué se puede utilizar un microscopio de campo oscuro? ¿Qué tipos de muestras se pueden visualizar?

Con mucha frecuencia, el microscopio de campo oscuro permite ver especímenes y tejidos biológicos, ya sean fijos o vivos. También se pueden observar distintas muestras geológicas y de materiales con campo oscuro. Si desea ejemplos, consulte los artículos: «Work More Efficiently in Developmental Biology With Stereo Microscopy: Zebrafish, Medaka, and Xenopus» y «How to Adapt Grain Size Analysis of Metallic Alloys to Your Needs»

¿Cómo funciona un microscopio de campo oscuro?

Un microscopio de campo oscuro es un microscopio compuesto que utiliza una apertura con forma de anillo situada entre la fuente de luz y la lente del condensador. 

El condensador enfoca la luz que pasa por la abertura en forma de anillo sobre el espécimen biológico o la muestra de material que se va a observar. Las estructuras del espécimen o las características de la muestra difractan o dispersan porciones de la luz anular. La luz difractada entra en el objetivo. Por el contrario, el objetivo no recogerá la porción de luz en forma de anillo que pasa directamente a través de la muestra sin desviación o que es reflejada por la muestra sin dispersión. La luz dispersada por las estructuras del espécimen o las características de la muestra parecerá más brillante que las áreas del fondo del espécimen o la muestra donde no hay dispersión de la luz.

Para obtener más información, consulte el artículo: «Metallography - an Introduction»

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Preguntas frecuentes sobre los microscopios de campo oscuro

Show answer Microscopio de campo claro frente a campo oscuro: ¿cuál es la diferencia?

Un microscopio de campo oscuro es similar a un microscopio de campo claro tradicional, con la diferencia de que utiliza una apertura anular frente a la fuente de luz. La iluminación de campo oscuro impacta sobre el espécimen o la muestra con un alto ángulo de incidencia, se transmite a través de la muestra o se refleja en su superficie, luego pasa a través de la lente del objetivo y finalmente pasa a través de los oculares o llega al sensor de la cámara. La iluminación de campo oscuro hace que las áreas uniformes de muestras transparentes o las superficies planas de muestras opacas parezcan oscuras, ya que la mayor parte de la luz, con un ángulo alto de incidencia, escapa al objetivo. Por lo general, las muestras transparentes o la superficie de las muestras opacas suelen tener características que dispersan la luz. Por esta razón, las imágenes en microscopía de campo oscuro muestran un fondo oscuro con áreas más brillantes que corresponden a estas características, ya que la luz que dispersan entra en el objetivo.

Show answer ¿Pueda estar viva la muestra utilizada en el microscopio de campo oscuro?

Sí, un espécimen biológico vivo, como las células o un organismo, puede verse fácilmente con un microscopio de campo oscuro.

Show answer ¿Se puede utilizar un microscopio de campo oscuro con una cámara u otros accesorios?

Sí, un microscopio de campo oscuro puede equiparse con una cámara para la toma de imágenes. También puede equiparse con otros accesorios. Para obtener más información, póngase en contacto con su representante local de Leica.

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