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Microscopía de fluorescencia

La fluorescencia es uno de los fenómenos físicos más utilizados en microscopía biológica y analítica, sobre todo por su alto grado de sensibilidad y especificidad. La fluorescencia es una forma de luminiscencia.

La microscopía de fluorescencia incluso permite a los usuarios determinar la distribución de una sola especie de molécula, su cantidad y su ubicación dentro de una célula. Se pueden realizar estudios de colocalización e interacción, y se pueden observar las concentraciones de iones y procesos intra y extracelulares como la endocitosis y la exocitosis. 

Gracias a la microscopía de fluorescencia con superresolución, incluso es posible captar imágenes de estructuras con subresolución.

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Microscopios ópticos de fluorescencia

Los microscopios de fluorescencia que se emplean en aplicaciones de investigación se basan en una serie de filtros ópticos:

  • un filtro excitación
  • un divisor de rayos dicroico
  • un filtro de emisión.

Los filtros suelen estar insertados en un bloque de filtros (microscopios compuestos) o en un soporte plano (sobre todo en microscopios estereoscópicos). 

Mientras que el filtro de excitación selecciona las longitudes de onda que excitan un fluoróforo concreto dentro de la muestra, el filtro de emisión actúa como una especie de control de calidad, ya que solo permite pasar las longitudes de onda de interés emitidas por el fluoróforo. La función del espejo dicroico es reflejar luz en la banda de excitación y transmitir luz en la banda de emisión, lo que permite la iluminación clásica de luz incidente para epifluorescencia.

Este tutorial de fluorescencia explica los elementos ópticos de la trayectoria de luz y el funcionamiento de la microscopía de fluorescencia, tomando como ejemplo un microscopio invertido que se puede utilizar para métodos de contraste con diascopía y para microscopía de fluorescencia.

Microscopios estereoscópicos de fluorescencia

Los microscopios estereoscópicos de fluorescencia de Leica Microsystems utilizan la tecnología TripleBeam, una (tercera) trayectoria de rayos independiente para la iluminación de fluorescencia de la muestra sin espejo dicroico.

Por tanto, se necesitan un filtro de excitación para la trayectoria de rayos de iluminación y dos filtros de emisión, uno para cada trayectoria de rayos de observación.

Absorción de datos, emisión de belleza

Para adquirir imágenes de fluorescencia hay que utilizar la cámara de fluorescencia CCD o sCMOS adecuada. Leica Microsystems ofrece cámaras de fluorescencia específicas para todas las aplicaciones. Cada cámara ofrece la combinación perfecta de sensibilidad y calidad de imagen, lo que garantiza unos resultados excelentes.

Absorción de complejidad, emisión de sencillez

La facilidad para configurar el equipo y controlar los experimentos está adquiriendo cada vez más importancia en la microscopía de fluorescencia. La plataforma específica de software Leica Application Suite (LAS) X facilita la configuración incluso de experimentos complejos. LAS X guía al usuario desde la configuración hasta el análisis de los datos de la imagen, y es la plataforma de software perfecta tanto para llevar a cabo análisis multicanal sencillos como análisis complejos en 3D.

Microscopios y sistemas de imagenología fluorescentes 27

Filter by Area of Application

THUNDER Imager Model Organism

El THUNDER Imager Model Organism permite la exploración fácil y rápida en 3D de organismos enteros para investigación en desarrollo y biología molecular.

THUNDER Imager 3D Live Cell & 3D Cell Culture

Los sistemas de imagen THUNDER le proporcionan una solución para ensayos con cultivos celulares en 3D, tanto si quiere estudiar células madre,esferoides u organoides.

High Speed High Resolution Monochrome Fluorescence sCMOS Camera Leica DFC9000

Leica DFC9000

Cámara de fluorescencia monocromática refrigerada de 4,2 Mpx para aplicaciones avanzadas tales como la captura de imágenes de alta velocidad de células vivas, FRAP y medidas ratiométricas

THUNDER Imager Tissue

El THUNDER Imager Tissue permite la documentación de fluorescencia en tiempo real de las secciones de tejido 3D típicas en investigación de neurociencias e histología.

2.8 MP cámara para microscopía a color Leica DFC7000 T

DFC7000 T and DFC7000 GT

Cámara en color refrigerada de 2,8 MP para documentación de muestras fijadas en luz transmitida y fluorescencia

Software platform for life science applications

LAS X Life Science

Plataforma de software para aplicaciones de ciencias de la vida

Leica M205 FCA & Leica M205 FA

Microscopio estereoscópico de fluorescencia (semi)-automático

Microscopios verticales Leica DM4 B y DM6 B

Leica DM4 B & DM6 B

Aumente la eficiencia de trabajo con los microscopios verticales digitales de investigación Leica DM4 B o Leica DM6 B.

El Leica DM1000 LED combina las ventajas de un microscopio completamente ergonómico con una innovadora iluminación LED y las posibilidades ilimitadas de los modelos portátiles.

Leica DM1000 LED

Microscopio ergonómico único, ahora también disponible con innovadora iluminación LED

Cámara microscópica de fluorescencia Leica DFC3000 G

Leica DFC3000 G

Cámara monocroma de 1,3 MP para aplicaciones básicas de fluorescencia, como la documentación de muestras fijadas inmunoteñidas

Leica LED3000 BLI

Leica LED3000 BLI

Simple LED transmitted illumination

Microscopio ergonómico único Leica DM1000

Leica DM1000

Microscopio ergonómico único

Leica TL4000 BFDF

La base de diascopía para aplicaciones de campo claro y oscuro absorbe los golpes y las vibraciones para una obtención de imágenes de alta calidad

La ruta óptica independiente de la tecnología de triple haz está indicada específicamente para la iluminación de fluorescencia.

Leica MZ10 F

Modular Stereo Microscope for Fluorescent Imaging

Uso simultáneo del objetivo estereoscópico de 1X y el objetivo compuesto de 10X o 20X para la obtención de imágenes de alta resolución.

Leica FluoCombi III

Accesorio de microscopio estereoscópico de fluorescencia

El sistema Leica AF6000 permite un análisis de imagen avanzado con una interfaz orientada al flujo de trabajo e incluye una gama completa de herramientas de procesado de imagen.

LAS X Widefield Systems

Sistema de microscopía de fluorescencia para obtención y análisis avanzado de imágenes

El microscopio de diseño ergonómico exclusivo Leica DM3000 mejora los flujos de trabajo en citología y patología gracias a su automatización inteligente.

Leica DM3000 & DM3000 LED

Microscopios ergonómicos únicos con automatización inteligente