Contacto

El EM Cryo CLEM es un elemento esencial en nuestros flujos de trabajo de criogénicos. No me puedo imaginar nuestro trabajo sin él.

Dr. Yannick Schwab, jefe de equipo y director del servicio central de microscopía electrónica, EMBL Heidelberg (Alemania)

Identifique y tome imágenes de la región de interés de forma más clara con THUNDER

Para visualizar de forma óptima las estructuras celulares, el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM combina un objetivo criogénico de alta resolución con la tecnología THUNDER de Leica Microsystems. El resultado son imágenes más nítidas, sin la luz que proviene de los planos no enfocados.

THUNDER emplea el innovador método de Leica de aclaramiento computacional para eliminar la luz proveniente de los planos desenfocados inherentes a las observaciones de campo ancho. El sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM también incluye un objetivo cryo 50x / 0,9 NA. A diferencia de los objetivos de larga distancia de trabajo que se utilizan habitualmente ,  este objetivo se ha diseñado específicamente para la toma de imágenes de alta resolución de muestras vitrificadas. Usted se beneficiará de la mejor identificación y visualización de los detalles pequeños de las estructuras de las células junto con la velocidad y la facilidad de uso de un microscopio de campo ancho.

Imagen interactiva: células HeLa en rejillas con revestimiento de Quantifoil R2 dorado/2 G200F1.
Las células se transfectaron con GFP-TGN46 (red trans Golgi) y mCherry-Lifeact (actina F). Los núcleos se tiñeron con Hoechst 33342. Muestra por cortesía Lucy Collinson, The Francis Crick Institute, Londres (Reino Unido).

Células HeLa sin sistema de imagen THUNDER Células HeLa con sistema de imagen THUNDER

Flujo de trabajo sencillo y reproducible

Si necesita encontrar la región de interés con rapidez en el microscopio electrónico, podrá marcarla con facilidad y exportar las coordenadas durante la transferencia de la muestra. El intuitivo software le guía por el flujo de trabajo para que obtenga los resultados que necesita para llevar a cabo con éxito su estudio en ME de forma rápida y eficiente. Para alta resolución y alto contraste, procese a posteriori las imágenes con THUNDER.

Benefíciese de:

  • Localización y captura de datos fáciles y precisos: el software le guía paso por paso por el flujo de trabajo para la toma de imágenes
  • Imágenes sin complicaciones: simplemente marque la región de interés y el software captura de forma automática y crea con precisión las imágenes en forma de mosaicos
  • Procesamiento a posteriori con THUNDER para tomar imágenes nítidas y de alta resolución
  • Resultados rápidos y reproducibles: le permite guardar y abrir configuraciones de experimentos
Sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM
Sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM

Fácilmente relocalizable con la transferencia de coordenadas mediante la criomicroscopía óptica

El software integrado del sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM no solo le guía por el flujo de trabajo de toma de imágenes, sino que también exporta los datos de las imágenes originales y las coordenadas asociadas con solo un clic. Podrá reubicar de inmediato la región de interés celular en su microscopio electrónico preferido y comenzar a estudiar la ultraestructura de la muestra.

Si decide trabajar con el Thermo Fisher Scientific MAPS EM, podrá además beneficiarse de nuestro flujo de trabajo para criotomografía electrónica desarrollado de forma conjunta. El flujo de trabajo garantiza una integración plena, desde la vitrificación con nuestro EM GP2 hasta la reconstrucción de imágenes 3D con el Thermo Scientific Krios™ G3i cryo TEM. 

Imágenes interactivas: Selección y relocalización de coordenadas. Imagen con fluorescencia de una célula sobre una rejilla TEM visualizada y marcada de forma selectiva. La misma célula visualizada y relocalizada gracias al marcador de coordenadas, aquí en el Thermo Scientific Aquilos.

Imagen con fluorescencia de una célula sobre una rejilla TEM visualizada y marcada con el EM Cryo CLEM. La misma célula visualizada y relocalizada con el marcador de coordenadas, aquí en el Thermo Scientific Aquilos.

Mantenimiento de las condiciones criogénicas 

Para maximizar la probabilidad de obtener buenos resultados en los experimentos, el sistema especial de cartucho y el cryo-stage cerrado garantizan que su muestra permanezca vitrificada. Este sistema minimiza las posibles contaminaciones durante el proceso de carga y transferencia, incluso durante la toma de imágenes de time-lapse largos.

Cómo funciona

El sistema de cartuchos (1) permite manipular de forma segura y rápida la muestra. El mecanismo de prensa y clip acelera el rendimiento del flujo de trabajo y el tiempo de carga de las rejillas en el cryo-stage.

Una lanzadera que se acopla a al cryo-stage(2) protege la criomuestra manteniendo la temperatura óptima. 

El cryo-stage(3) con tapa sincronizada para crio-objetivo evita la contaminación ambiental de la muestra manteniéndola en una sobrepresión estable de gas N2

Carga de un cartucho con rejilla en el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM con el acoplamiento de lanzadera
Carga de un cartucho con rejilla en el sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM con el acoplamiento de lanzadera

Escoja el flujo de trabajo apropiado para su estudio biológico

El sistema de imagen THUNDER EM Cryo CLEM es una solución multiuso flexible que se puede implementar en distintos flujos de trabajo con microscopios electrónicos.

Escoja el flujo de trabajo óptimo para su experimento en función del tipo de investigación biológica para obtener las respuestas que necesita. Para obtener más información sobre las soluciones para flujos de trabajo en investigaciones en ciencias de la vida, descargue nuestro folleto sobre flujos de trabajo.

Segmentation of a cryo-electron tomogram, showing the native cellular environment around the nucleus. Proteasomes tether to Nuclear Pore Complexes (purple) at two distinct sites (orange: membrane-tethered proteasomes, yellow: basket-tethered proteasome blue: free proteasomes). The nuclear envelope (grey), ribosomes (black/white) and a mitochondrion (red, with rows of yellow ATP Synthases) are also shown.
Segmentation of a cryo-electron tomogram, showing the native cellular environment around the nucleus. Proteasomes tether to Nuclear Pore Complexes (purple) at two distinct sites (orange: membrane-tethered proteasomes, yellow: basket-tethered proteasome blue: free proteasomes). The nuclear envelope (grey), ribosomes (black/white) and a mitochondrion (red, with rows of yellow ATP Synthases) are also shown.

Flujo de trabajo de Cryo CLEM

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Flujo de trabajo de Cryo CLEM

Si desea preparar muestras de tejido, añada el THUNDER Imager EM Cryo CLEM como paso intermedio en su flujo de trabajo Cryo CLEM.

Permite identificar fácilmente la región de interés y preparar la laminilla en un lugar específico de la muestra.

(1) Cell positioning with PRIMO | (2) High pressure freezing (EM ICE) | (3) Cryo sectioning (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Imaging in the TEM
(1) Cell positioning with PRIMO | (2) High pressure freezing (EM ICE) | (3) Cryo sectioning (EM UC7 /EM FC7) | (4) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) Imaging in the TEM

Flujo de trabajo Cryo On-Grid Lamella (a)

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Flujo de trabajo Cryo On-Grid Lamella (a)

Para obtener resultados fiables del análisis de estructuras de proteínas en su entorno nativo, utilice el flujo de trabajo totalmente integrado con el SEM crio-FIB de Thermo Fisher.

Seleccione las células más adecuadas para el análisis con el THUNDER Imager EM Cryo CLEM y transfiera las coordenadas al Thermo Scientific Aquilos, donde podrá recuperarlas inmediatamente. El Aquilos supera las limitaciones de grosor y crea una fina capa de hielo que luego puede examinarse en el TEM.

Cryo On-Grid Lamella Workflow - Using the Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Milling and coating with the Thermo Fisher Aquilos cryo FIB SEM | (5) Imaging in the TEM
Cryo On-Grid Lamella Workflow - Using the Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Milling and coating with the Thermo Fisher Aquilos cryo FIB SEM | (5) Imaging in the TEM

Flujo de trabajo Cryo On-Grid Lamella (b)

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Flujo de trabajo Cryo On-Grid Lamella (b)

El THUNDER Imager EM Cryo CLEM puede integrarse en cualquier flujo de trabajo FIB-SEM.

Nuestros productos pueden conectarse perfectamente para garantizar una transferencia de muestras segura durante todo el proceso.

Cryo On-Grid Lamella Workflow - for all FIB-SEM suppliers except Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transfer (EM VCM) | (5) Coating (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transfer (EM VCT500) | (7) Milling in the FIB | (8) Imaging in the TEM
Cryo On-Grid Lamella Workflow - for all FIB-SEM suppliers except Thermo Fisher Aquilos cryo-FIB SEM. (1) Cell positioning with PRIMO | (2) Plunge freezing (EM GP2) | (3) Identifying the region of interest (THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (4) Transfer (EM VCM) | (5) Coating (EM ACE600/EM ACE900) | (6) Transfer (EM VCT500) | (7) Milling in the FIB | (8) Imaging in the TEM
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