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STELLARIS DLS Microscopio Digital Light Sheet

Nueva microscopía de lámina de luz

STELLARIS 5 y STELLARIS 8 Digital LightSheet (DLS) confluyen ahora en un sistema confocal y un microscopio de lámina de luz, una combinación única destinada a impulsar su investigación para que sea más versátil. El exclusivo diseño vertical de DLS, habilitado por los espejos TwinFlect patentados por Leica Microsystems, le permite combinar la obtención de imágenes confocales y de lámina de luz en el mismo sistema, de modo que puede adaptar fácilmente el método de microscopía a sus necesidades experimentales.

El DLS también aporta flexibilidad a su investigación con la capacidad de obtener imágenes de diferentes tipos de muestras, como organismos modelo, organoides o tejido clareado, y le permite aprovechar todo el espectro de excitación. Esta flexibilidad es posible gracias al láser de luz blanca, STELLARIS White Light Laser, y la capacidad de realizar experimentos de lámina de luz multiposición mientras se utilizan placas con fondo de vidrio estándar. Todo esto le ayuda a añadir nuevas y mejores formas de abordar los interrogantes que plantea la investigación.

Experimente la potencia de la obtención rápida y menos dañina de sus imágenes volumétricas.

Obtenga más datos fisiológicamente relevantes.

DLS y STELLARIS permiten una obtención de imágenes aún menos dañina, lo que le ofrece la capacidad de obtener imágenes volumétricas de lámina de luz de forma rápida y menos dañina y, a su vez, mejorar sus aplicaciones de obtención de imágenes de células vivas al aumentar la viabilidad celular gracias a:

La iluminación de un solo plano.
La obtención rápida de imágenes con una cámara sCMOS sensible.
Un aumento significativo de las posibilidades espectrales y la capacidad de obtener imágenes aún menos dañinas empleando longitudes de onda de excitación en el espectro del infrarrojo lejano.
La capacidad para generar una lámina de luz con el escáner resonante que resulta en tiempos más cortos de permanencia de píxeles y, por consiguiente, menos fototoxicidad.
La obtención de resultados de lámina de luz con una mejor relación de contraste y señal-ruido gracias a la solución de extracción de información LIGHTNING para datos DLS.

Los experimentos de lámina de luz en organoides o esferoides con DLS le permiten obtener imágenes >100 μm de profundidad. Esferoide epitelial mamario vivo: núcleos verdes (MCF10A H2B-GFP); citoesqueleto de tubulina roja (tubulina SiR); datos DLS procesados con LIGTHNING. Cortesía de B. Eismann y C. Conrad, en BioQuant/DKFZ Heidelberg, Alemania.

Lámina de luz con beneficios confocales

Gracias a la integración perfecta de DLS, las imágenes de lámina de luz se benefician de las innovaciones técnicas del sistema STELLARIS.

Siempre el láser correcto

Todos los láseres visibles del sistema confocal STELLARIS están preparados para emplearse en la obtención de imágenes con lámina de luz. Gracias a las líneas de diodo láser opcionales y a los láseres de luz blanca de última generación STELLARIS, hay una gran flexibilidad a la hora de elegir la tinción adecuada para los experimentos con láminas de luz. Podrá incluso desbloquear la captura de imágenes de tinciones próximas al espectro infrarrojo.

Siempre el escáner correcto

En los sistemas STELLARIS equipados con un escáner tándem, puede elegir entre el escáner resonante o el escáner de campo visual (a 1400 Hz) para generar la lámina de luz escaneada. La generación de la lámina de luz con el escáner resonante produce tiempos de permanencia en píxeles más cortos, lo que permite obtener imágenes aún menos dañinas.

Configuraciones de láser STELLARIS 8 y STELLARIS 5

Mejore el potencial de su investigación con un sistema que se adapta a sus necesidades

Experimente la flexibilidad de obtener imágenes de diferentes tipos de muestras.

Imágenes de muestras vivas y muestras depuradas, como organoides, tejidos u organismos en desarrollo completo, en el mismo sistema y sin cambios de hardware difíciles
Fácil intercambio de un número creciente de objetivos de detección y espejos TwinFlect para dar forma a la lámina de luz en función de sus necesidades
Los objetivos DLS abarcan desde reactivos de clareado orgánicos hasta los basados en agua

Los métodos de clareado de tejidos de última generación proporcionan un acceso óptico a nivel subcelular a tejidos intactos de órganos individuales. Esta imagen muestra una muestra de riñón de ratón clareada adquirida con el objetivo de inmersión múltiple 16x. La iluminación se realizó mediante 730 nm. Cortesía del Prof. Gretz, Universidad de Mannheim, Alemania.

Manipule su muestra utilizando la tecnología confocal

Nuestro módulo de lámina de luz es más que un complemento funcional para su sistema confocal. STELLARIS y DLS actúan sinérgicamente para ampliar las opciones de sus investigaciones. Por ejemplo, puede manipular muestras utilizando la tecnología confocal y luego obtener las imágenes con DLS.

Para ello, basta con cambiar entre el modo confocal y el modo de lámina de luz en el software LAS X. De este modo, los experimentos de fotoconversión o de heridas seguidas por observaciones a largo plazo se vuelven fáciles y prácticas.

Manipulación sencilla de muestras

Fácil acceso a su muestra para realizar tratamientos farmacológicos
Capacidad para manipular sus muestras utilizando la tecnología confocal para experimentos de fotoconversión y heridas, seguido de imágenes DLS rápidas y menos dañinas

Este ejemplo demuestra la ventaja del confocal combinado con DLS. Se marcó un embrión de pez cebra transgénico para visualizar los macrófagos implicados en las respuestas inmunitarias. A fin de investigar su comportamiento ante una herida, se empleó un láser confocal para crear una herida (flecha) y, a continuación, se grabó una película temporal. El vídeo muestra la reacción dinámica de las células activadas que ahora migran a la herida y desencadenan el proceso de cicatrización. En este caso, el cambio a DLS permite obtener imágenes no dañinas de células vivas del pez cebra.

Aumente la productividad de sus experimentos con láminas de luz

Mantenga su flujo de trabajo y la manipulación de muestras.

Fácil incorporación de sus muestras en el flujo de trabajo experimental de láminas de luz gracias al exclusivo diseño Twinflect de DLS.
Transición entre experimentos confocales y de láminas de luz sin necesidad de configuraciones experimentales complicadas.
Mantenga la preparación de la muestra con la que está familiarizado
Monte y obtenga imágenes de varias muestras con experimentos de multiposición.
Realice un barrido de mosaico de muestras muy grandes utilizando DLS en combinación con la automatización de la platina del sistema confocal.
Cambie fácilmente entre la fluorescencia y la obtención de imágenes de campo ancho para navegar cómodamente entre las muestras.
Proporcione contexto celular y orgánico para las secciones ópticas de fluorescencia mediante el uso del modo de campo ancho para adquisiciones.

Obtención de imágenes de alta resolución en muestras grandes y enteras: La opción de barrido de mosaico permite obtener imágenes completas de muestras grandes, como el embrión completo de un pez cebra, tal y como se muestra aquí, a alta resolución. Cortesía de Elvire Guiot, IGBMC Imaging Center, Illkirch-Graffenstaden, Francia, y Julien Vermot, Imperial College London, Reino Unido.

Diseño de software orientado al flujo de trabajo

El software LAS X guía al usuario paso a paso por el registro y la evaluación de los datos. El diseño orientado al flujo de trabajo le ayudará a utilizar el instrumento de forma más eficiente. Un práctico procedimiento de calibración establece la lámina de luz con precisión.

El sistema está diseñado para iluminar la muestra por ambos lados: cada uno de los dos espejos opuestos del TwinFlect puede ser dirigido por el escáner para superar áreas más oscuras. Para obtener imágenes nítidas con un campo de visión amplio, es posible fusionar las dos imágenes utilizando la opción de fusión en línea o fuera de línea del asistente LightSheet en el software LAS X.

Adapte LAS X a sus necesidades con paquetes de software adicionales. El módulo de visualización LAS X 3D ofrece novedosas formas de interactuar con los datos 3D mediante un recorte intuitivo, una representación rápida y una visualización estéreo. Los experimentos de barrido en mosaico permiten observar grandes áreas. Con Mark&Find, es posible observar varias regiones de interés en una configuración multiposición.

Diseño de software orientado al flujo de trabajo del software LAS X del microscopio

Conduct and document long-term observations

Imaging requires light, but too much light can damage your cells. Light sheet microscopy is the most gentle imaging method to date, as it reduces the overall photodamage from phototoxicity and bleaching. This automatically increases the viability of your specimen.

Particularly developmental biology beneﬁts from light sheet imaging. The combination of low light illumination and high-speed acquisition allows you to follow sensitive, developing organisms like a Drosophila embryo over long periods of time and to understand how tissue and organs form in real time and 3D.

Low phototoxicity and specimen imaging in 3D: Development of Drosophila melanogaster over 6 hours. Probe: Light-sensitive RFP. 3D rendering. 150 µm z stack, 30 sec/stack.

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