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Microscopia in fluorescenza

La fluorescenza è uno dei fenomeni fisici più comunemente sfruttati nella microscopia biologica e analitica, soprattutto per la sua elevata sensibilità e specificità. La fluorescenza è una forma di luminescenza.

La microscopia in fluorescenza consente agli utenti di determinare la distribuzione di una singola specie di molecole, la sua quantità e la sua localizzazione all'interno di una cellula. È possibile effettuare studi sulla co-localizzazione e sull'interazione e si possono osservare concentrazioni di ioni nonché processi intra ed intercellulari quali endocitosi ed esocitosi.

Con l'ausilio della microscopia in fluorescenza con super-risoluzione, è anche possibile visualizzare strutture sotto risolte.

Per maggiori informazioni sulla microscopia in fluorescenza, sulla fluorescenza quantitativa e sulla super-risoluzione consultare Leica Science Lab.

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Microscopi in luce fluorescente

I microscopi in fluorescenza utilizzati in applicazioni di ricerca si basano su una serie di filtri ottici:

  • un filtro di eccitazione
  • un partitore ottico dicroico e
  • un filtro di emissione

I filtri vengono spesso assemblati  insieme in un cubo portafiltri (microscopi composti) o in un supporto piano (prevalentemente stereomicroscopi).

Mentre il filtro di eccitazione seleziona le lunghezze d'onda per eccitare un particolare marcatore  nel campione, il filtro di emissione svolge una sorta di controllo qualità lasciando passare esclusivamente le lunghezze d'onda oggetto d'interesse emesse dal fluoroforo. La finalità dello specchio dicroico consiste nel riflettere la luce nella banda di eccitazione e nel trasmetterla in quella di emissione, consentendo la classica illuminazione a luce incidente in epifluorescenza.

Questo tutorial sulla fluorescenza illustra gli elementi ottici nel percorso luminoso e la modalità operativa della microscopia in fluorescenza utilizzando come esempio un microscopio rovesciato  che può essere utilizzato per metodi di contrasto in  luce trasmessa e per microscopia in fluorescenza.

Stereomicroscopi in fluorescenza

Gli stereomicroscopi in fluorescenza di Leica Microsystems si avvalgono della tecnologia TripleBeam, un (terzo) percorso ottico separato per l’illuminazione in fluorescenza del campione senza specchio dicroico.

Occorrono pertanto un filtro a eccitazione per il percorso ottico d'illuminazione e due filtri di emissione, uno per ogni percorso ottico di osservazione.

Ottenere informazioni per mostrare la bellezza

Per acquisire immagini in fluorescenza, è necessario utilizzare una fotocamera a fluorescenza CCD o sCMOS appropriata. Leica Microsystems offre fotocamere per fluorescenza dedicate per tutte le esigenze applicative.Ogni fotocamera offre l'abbinamento perfetto tra sensibilità e qualità d'immagine per assicurare risultati eccellenti.

Studiare la complessità con la semplicità d’uso

La semplicità d'impostazione e controllo degli esperimenti sta diventando sempre più importante nella microscopia in fluorescenza. La piattaforma software dedicata Leica Application Suite (LAS) X semplifica il setup persino degli esperimenti più complessi. LAS X vi guida attraverso il setup fino all'analisi dei dati di imaging. Dai semplici esperimenti multicanale alla complessa analisi 3D, LAS X è la piattaforma software perfetta.

Microscopi e sistemi di imaging a fluorescenza 14

Filter by Area of Application
Leica M205 FCA & Leica M205 FA

Leica M205 FCA & Leica M205 FA

Stereomicroscopio a fluorescenza (semi)-automatico

Leica DFC9000

Leica DFC9000

Fotocamera monocromatica a fluorescenza raffreddata da 4,2 MP per applicazioni avanzate come imaging di cellule viventi ad alta velocità, FRAP e Ratio imaging

Leica DM4 B & DM6 B

Leica DM4 B & DM6 B

Aumentate l'efficienza del lavoro con i microscopi diritti digitali per la ricerca Leica DM4 B o Leica DM6 B

Leica DM2500 & DM2500 LED

Leica DM2500 & DM2500 LED

Microscopi a ergonomia avanzata grazie alla potente illuminazione

Leica DM1000 LED

Leica DM1000 LED

Microscopi dall'esclusivo design ergonomico, ora disponibile anche con l'innovativa illuminazione a LED

Leica DFC3000 G

Leica DFC3000 G

Fotocamera monocromatica da 1.3 MP per applicazioni in fluorescenza di base come la documentazione di campioni fissati e immunocolorati

Leica DM2000 & DM2000 LED

Leica DM2000 & DM2000 LED

Microscopi dall'esclusivo design ergonomico per complesse applicazioni cliniche -

Leica SR GSD 3D

Leica SR GSD 3D

Sistema a super risoluzione per la microscopia di localizzazione in 3D

LAS X Widefield Systems

LAS X Widefield Systems

Sistema di microscopia a fluorescenza per imaging avanzato e analisi

Leica DM3000 & DM3000 LED

Leica DM3000 & DM3000 LED

Microscopi dall'esclusivo design ergonomico con automazione intelligente

Leica M165 FC

Leica M165 FC

Stereomicroscopio a fluorescenza

Leica MZ10 F

Leica MZ10 F

Stereomicroscopio modulare per un imaging a fluorescenza dettagliato e ad alto contrasto

Leica FluoCombi III

Leica FluoCombi III

Accessori per lo stereomicroscopio a fluorescenza