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TauSTED Xtend: Afilado. Simple. Impresionante.

TauSTED Xtend es el siguiente paso en la evolución de las imágenes TauSTED. Combina información basada en el tiempo de vida con una lectura espacial adicional. Esto da como resultado un mejora significativa de la resolución, especialmente a potencias de agotamiento STED más bajas, lo que permite ampliar las capacidades de obtención de imágenes multicolor en vivo a una notable nanoescala. Descargue la nota de la aplicación y obtenga más información sobre TauSTED Xtend.

POTENCIA

Resuelva detalles más pequeños en contexto a nanoescala. Reproduzca imágenes en tiempo real durante más tiempo con una resolución de vanguardia.

POTENCIAL

Utilice fluoróforos estándar y siga sus protocolos preferidos para STED. Realice imágenes multicolor ampliadas, incluso con una sola línea láser STED.

PRODUCTIVIDAD

Monitorice directamente los procesos rápidos con resolución a nanoescala. Obtenga información instantánea sobre los resultados mientras realiza sus experimentos.

TauSTED Xtend Confocal

Muestra fija multicolor. TauSTED Xtend 775; Vimentina AF 594 (cian), Faloidina ATTO 647N (magenta) y NUP107 CF680R (glow). Ancho de la imagen: 39nm. Muestra por cortesía de Brigitte Bergner, Mariano Gonzales Pisfil, Steffen Dietzel, Centro de bioimágenes de la instalación principal, Centro biomédico, Universidad Ludwig Maximilian, Múnich, Alemania

Imágenes multicolor en vivo suaves a una notable nanoescala

La dinámica de imágenes dentro de muestras vivas sigue siendo el enfoque experimental más desafiante. Para lograr resultados científicos relevantes, el régimen de iluminación debe ser lo suficientemente bajo como para evitar el fotoblanqueamiento y la fototoxicidad, en función de la muestra y el fluoróforo.

Con STELLARIS, incluidos los láseres de luz blanca (WLL) de última generación, los detectores Power HyD y el acceso a las tecnologías de tiempo de vida (TauSense, FALCON), la obtención de imágenes en vivo multicolor y los experimentos de obtención de imágenes funcionales se han convertido en rutina en la obtención de imágenes confocales.

Con TauSTED Xtend, puede reducir significativamente la excitación y la dosis de luz STED a un nivel que le permita estudiar procesos biológicos durante períodos de tiempo prolongados, incluso a nivel de nanoescala.

Células vivas que expresan LifeAct-mNeonGreen. TauSTED Xtend 589. Formato de 6 k, 30 min de obtención de imágenes STED. Muestra por cortesía de: M. Heydasch, Instituto de Biología Celular, Universidad de Berna, Suiza.

Resolver detalles más pequeños en contexto a nanoescala

¿Busca estrategias de superresolución que le permitan seguir sus objetivos biológicos de interés en el tiempo y el espacio con unas perturbaciones externas mínimas?

TauSTED ya reduce significativamente la excitación y las dosis de luz STED, mejorando significativamente la resolución en comparación con la obtención de imágenes confocales estándar, así como los enfoques del clasico gated STED.

TauSTED Xtend va más allá mejorando la resolución máxima alcanzable y revela una señal inequívoca, incluso con una potencia de agotamiento STED más baja.

[Translate to spanish:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488.  Only 0.5% of STED light reveals much more detail.
[Translate to spanish:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488. Only 0.5% of STED light reveals much more detail.

Ampliar la resolución más allá de los límites convencionales

TauSTED mide la información adquirida en cada experimento STED basada en el tiempo de vida de la fluorescencia y traza la respuesta STED del fluorocromo en tiempo real. El acceso a esta información le permite aumentar la calidad de la imagen (relación señal/ruido), eliminar fotones del fondo mediante principios físicos e impulsar la resolución más allá de los límites de STED basado en la intensidad, independientemente de la línea de excitación STED (589, 660, 775) que esté utilizando.

TauSTED Xtend es el siguiente paso en la evolución de la obtención de imágenes STED y combina la información basada en el tiempo de vida con una lectura espacial adicional. Verá un aumento significativo de la resolución, especialmente a potencias de agotamiento STED más bajas, lo que le permitirá ampliar las capacidades de obtención de imágenes en vivo a una notable nanoescala.

Imágenes STED y ADN origami: la línea TauSTED 775 proporciona resoluciones <30nm en GATTA-Bead R cuyo tamaño nominal es de 23nm. Barra de escala: 1 µm.
Imágenes STED y ADN origami: la línea TauSTED 775 proporciona resoluciones <30nm en GATTA-Bead R cuyo tamaño nominal es de 23nm. Barra de escala: 1 µm.

Utilice sus protocolos estándar

¿Le gustaría reducir sus experimentos a la nanoescala, utilizando protocolos familiares y una amplia gama de etiquetas y marcadores fluorescentes que se utilizan comúnmente en la investigación de ciencias de la vida?

TauSTED Xtend ofrece nuevas oportunidades para experimentos monocolor y multicolor con proteínas fluorescentes verdes y fluoróforos que son un caballo de batalla en la investigación de ciencias de la vida y que actualmente se utilizan poco en estudios nanoscópicos.

Puede ampliar la paleta de fluoróforos, incluso con una sola línea láser STED, aprovechando las capacidades espectrales únicas de STELLARIS.

STED Confocal

Imágenes 2 colores de TauSTED Xtend de células de mamíferos marcadas con CF 440 - Faloidina (brillo) e inmunotintadas contra tubulina, StarGreen (cian). Barra de escala: 2 µm

Amplíe el número de eventos simultáneos que puede estudiar a nanoescala

El marcado fluorescente multicolor tiene el poder de revelar las relaciones entre especies intracelulares, ya que con él se pueden obtener imágenes de diferentes componentes con especificidad molecular.

STED y STELLARIS destacan en aplicaciones multicolor. Puede utilizar los mejores colorantes en la zona roja del espectro, optar por proteínas fluorescentes en el verde o aprovechar al máximo novedosas sondas fluorogénicas en el naranja. Puede realizar estudios de colocalización de varias especies y resolverlas con detalles de subdifracción.

Nuestra detección espectral le ofrece hasta 5 detectores Power HyD compatibles con STED, por lo que puede ampliar el número de actores moleculares que desea localizar en tiempo y espacio. Además, las capacidades digitales y la velocidad de los detectores Power HyD, con un tiempo muerto del sistema completo de 1,5 ns, garantizan una excelente calidad de imagen en términos de la relación señal/ruido y fondo, a la vez que ofrecen al menos 10 veces más de captación de fotones/tiempo de permanencia de píxeles en comparación con los detectores de fotos amplificados (APDs).

STED para biología del desarrollo: smFISH* de ARN en una preparación de embrión entero de Drosophila. Las sondas se marcan directamente y no hay amplificación de señal. Parte superior: TauSTED 775 de tres colores capta la señal de hb CalFluor 610 (cian), gt Quasar 670 (verde) y eve Quasar 705 (magenta). Parte inferior: imágenes confocales del embrión completo de Drosophila. Muestra por cortesía de Tom Pettini, Universidad de Mánchester, Reino Unido.
*Hibridación in situ de una molécula única
STED para biología del desarrollo: smFISH* de ARN en una preparación de embrión entero de Drosophila. Las sondas se marcan directamente y no hay amplificación de señal. Parte superior: TauSTED 775 de tres colores capta la señal de hb CalFluor 610 (cian), gt Quasar 670 (verde) y eve Quasar 705 (magenta). Parte inferior: imágenes confocales del embrión completo de Drosophila. Muestra por cortesía de Tom Pettini, Universidad de Mánchester, Reino Unido.
*Hibridación in situ de una molécula única

Amplíe las capacidades STED multicolor con la separación de por tiempo de vida

Al combinar las modalidades STED y FALCON en STELLARIS 8, puede ampliar la paleta de fluoróforos para estudiar la interacción molecular a resolución nanoscópica aún más, ya que puede separar especies utilizando su tiempo de vida de fluorescencia.

Los espectros de emisión de estos fluorocromos no se pueden distinguir con la adquisición de intensidad tradicional. Al combinar STED-FLIM con nuestra separación de fasores automatizada, los fluorocromos se separan claramente utilizando sus distintos tiempos de vida y un solo detector.

Separación STED para biología celular: la separación de STED 775 y FALCON STED permite separar especies con espectros superpuestos utilizando su tiempo de vida de la fluorescencia. En las células U2OS marcadas para TOM20 y tubulina, la información de intensidad de los recuentos de fotones por sí sola (gris) muestra ambas estructuras como indistintas, mientras que se distinguen claramente con STED-FLIM (cian, tubulina AF647; magenta ATTO 647N-TOM20).
Separación STED para biología celular: la separación de STED 775 y FALCON STED permite separar especies con espectros superpuestos utilizando su tiempo de vida de la fluorescencia. En las células U2OS marcadas para TOM20 y tubulina, la información de intensidad de los recuentos de fotones por sí sola (gris) muestra ambas estructuras como indistintas, mientras que se distinguen claramente con STED-FLIM (cian, tubulina AF647; magenta ATTO 647N-TOM20).

Monitorice sus resultados en tiempo y espacio sobre la marcha

Vea lo que sucede en tiempo real en su experimento, en tiempo y espacio con resolución a nanoescala. Con TauSTED Xtend, puede evaluar procesos rápidos sobre la marcha y recibir información instantánea sobre los resultados mientras realiza sus experimentos.

Garantice el máximo rendimiento STED con la alineación automática del haz con un solo clic, protegiendo su muestra de la irradiación de luz y logrando el posicionamiento óptimo de los focos láser de forma totalmente automatizada.

Obtenga imágenes de grandes áreas al instante con LAS X Navigator y seleccione las regiones de interés para obtener imágenes STED.

Valide sus resultados gracias a las capacidades de STELLARIS, como el acceso a datos brutos (verdad absoluta) y el recuento de fotones rápido y eficiente.

Dinámica citoesquelética en células vivas con TauSTED Xtend 589. Células de neuroblastoma de ratón con LifeAct-mNeonGreen que muestran la dinámica del filamento de actina, línea celular. Cortesía: Prof. Olivier Perutz, Max Heydasch. Universidad de Berna, Suiza.

Imágenes STED 2D y 3D con excelente brillo y resolución

Con Microscopios STELLARIS STED, puede obtener los resultados que necesita en 2D y 3D, ya que la resolución se puede ajustar en x, y, z. Con el fin de asegurar el mejor brillo y resolución en 2D y 3D, nuestros microscopos le ofrecen la mejor óptica para garantizar una óptima superposición de la excitación y función de dispersión de punto STED en todo el espectro y garantizar también que las capacidades de cuantificación no se pierdan debido a correcciones adaptativas.

Las siguientes lentes de objetivo de la clase STED WHITE se han desarrollado especialmente para garantizar unas condiciones óptimas en diversos experimentos con STED:

  • El objetivo de aceite STED WHITE 100x ofrece la máxima resolución y un rendimiento excelente para la obtención diaria de imágenes de muestras fijas.
  • El objetivo de glicerina STED WHITE 93x proporciona corrección adaptativa a las fluctuaciones de temperatura, desajuste del índice de refracción e irregularidades al observar en profundidad la muestra, gracias a la tecnología motCORR con anillo de corrección totalmente motorizado.
  • El objetivo de agua STED WHITE 86x con motCORR también proporciona corrección adaptativa (explicado anteriormente) y es ideal para aplicaciones delicadas con células vivas y espectroscopia de correlación de fluorescencia STED (1).

(1) «Unas tasas elevadas de recuento de fotones mejoran la calidad de la espectroscopia de fluctuación de la fluorescencia de superresolución» F. Schneider et al. J. Phys. D: Aplic. Phys. 53 164003, 2020.

Imágenes STED y ADN origami: la línea TauSTED 775 proporciona resoluciones <30nm en GATTA-Bead R cuyo tamaño nominal es de 23nm. Barra de escala: 1 µm.
Imágenes STED y ADN origami: la línea TauSTED 775 proporciona resoluciones <30nm en GATTA-Bead R cuyo tamaño nominal es de 23nm. Barra de escala: 1 µm.
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