Culture cellulaire

L'aspect des cellules

Les cellules animales cultivées en laboratoire se distinguent selon plusieurs critères :

• Leur morphologie est facile à identifier au microscope. Tandis que les fibroblastes ont une forme bipolaire ou multipolaire allongée, les cellules épithéliales présentent un tracé polygonal. Contrairement à ces deux types de cellules, les cellules lymphoblastiques se cultivent en suspension, non fixées à une surface.
• Les différents types cellulaires peuvent être subdivisés en cellules immortalisées, cellules primaires et cellules souches.
• L'organisation cellulaire s'étend de la monoculture 2D simple jusqu'aux sphéroïdes et organoïdes 3D, en passant par la coculture 2D

Quelques exemples de lignées cellulaires utilisées dans la culture cellulaire.

En quoi le travail quotidien consiste-t-il ?

Étant donné que les ingrédients composant le milieu de culture sont consommés par les cellules, il est nécessaire de les renouveler régulièrement. À cette occasion, les cultures cellulaires doivent être soumises à un contrôle visuel de la confluence et de la salubrité permettant également de détecter une contamination microbiologique potentielle.

Une caractéristique des lignées cellulaires immortalisées est leur croissance indéfinie. C'est pourquoi elles doivent être fractionnées de temps à autre (repiquage de cellules) avant d'être transférées dans d'autres supports de culture.

Quel est l'outil dont j'ai besoin ?

Une approche biologique cellulaire commune consiste à transfecter des cellules avec des marqueurs fluorescents pour un examen ultérieur avec un microscope de recherche. Si vous travaillez avec des protéines fluorescentes, votre microscope pour cultures cellulaires a besoin, lui aussi, d'une option de fluorescence par ex. pour contrôler l'efficacité de la transfection.

Pour faciliter les tâches de documentation et de standardisation, le microscope devrait posséder une caméra numérique et, dans l'idéal, avoir la capacité d'enregistrer et de classer les données acquises.

L'espace étant une question importante dans les laboratoires spécialisés dans la culture cellulaire, un microscope pour cultures cellulaires ne devrait pas être trop volumineux afin de pouvoir être placé sous une hotte. De plus, les tendances récentes exigent des microscopes suffisamment petits et robustes pour être utilisés même à l'intérieur d'un incubateur.

Pour la production de biomatériaux, par exemple protéines, vaccins ou anticorps, la culture cellulaire doit être réalisée dans des récipients de grande taille.

Pour satisfaire à ces exigences, un microscope pour culture cellulaire de ce type doit présenter une grande distance de travail et un grand champ de vision. En outre, il doit faire preuve d'une stabilité élevée pour maintenir fermement en place les récipients de grande taille, voire même des récipients empilés. 

Le Leica DM IL LED peut être configuré avec un bras équipé d'un éclairage pour la transmission et très long, vous offrant ainsi la distance de travail dont vous avez besoin pour des récipients de culture cellulaire d'une hauteur maximale de 40 cm.

Applications relatives aux cellules vivantes

La culture cellulaire est dynamique. Comme tout autre système biologique, il est parfois difficile de prévoir l'évolution et le comportement des cellules. C'est pourquoi une surveillance permanente présente des avantages par rapport aux contrôles de culture cellulaire effectués de manière ponctuelle.

Dans ce contexte, les microscopes sont placés dans l'incubateur et sont ainsi en mesure de surveiller les cellules 24h/24. Cette fonction permet de contrôler notamment la confluence de la culture cellulaire depuis n'importe quel endroit au monde et à tout moment.