Microscopi per campo scuro
Quando si lavora al microscopio, il metodo di contrasto più comunemente utilizzato è il campo chiaro. Tuttavia, il campo chiaro solitamente fornisce solo un'immagine a basso contrasto di molti campioni biologici trasparenti. Questo metodo può essere utilizzato anche per molti campioni di materiali trasparenti o riflettenti opachi. In queste immagini a basso contrasto si distinguono pochi dettagli. Il contrasto della microscopia in campo chiaro per i campioni biologici può essere migliorato utilizzando coloranti selettivi, ma spesso sono tossici per le cellule. Grazie al microscopio per campo scuro è possibile visualizzare le strutture di molti tipi di campioni biologici con maggior contrasto senza la necessità di utilizzare nessuna colorazione. La microscopia in campo scuro può anche aumentare il contrasto durante l'acquisizione di immagini in campioni in campo industriale. Il metodo di contrasto in campo oscuro sfrutta la diffrazione o la dispersione della luce da strutture di un campione biologico o da caratteristiche non uniformi nella struttura di un materiale.
I microscopi Leica per campo scuro sono utili per lo studio di cellule o tessuti in diverse applicazioni scientifiche e forensi. La microscopia in campo scuro può essere utile anche per applicazioni nello studio dei materiali e nella scienza della terra.
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Che cos'è il campo scuro?
Il campo scuro è una tecnica di contrasto ottico che rende visibili le strutture anche non colorate nelle cellule di campioni biologici. Le strutture cellulari che appaiono trasparenti con l’illuminazione a campo chiaro possono essere visualizzate con un contrasto migliore e con più dettagli utilizzando il campo scuro. Inoltre, le caratteristiche non uniformi di un materiale trasparente o della superficie di campioni di materiale opaco possono essere osservate più facilmente con il campo scuro rispetto al campo chiaro. Le strutture nella cellula o le caratteristiche del materiale diffondono la luce che interagisce con esse, mentre le aree uniformi permettono alla luce di passare senza diffondersi. Quando si utilizza la microscopia in campo scuro, le strutture cellulari o le caratteristiche del materiale appaiono più luminose e lo sfondo uniforme della cellula o del materiale appare più scuro.
Per cosa si può usare un microscopio per campo scuro? Che tipo di campioni è possibile visualizzare?
Molto spesso i campioni biologici e i tessuti, fissi o vivi, vengono osservati con un microscopio per campo scuro. Inoltre, vari materiali e campioni geologici possono essere osservati in campo scuro. Per maggiori informazioni fare riferimento agli articoli: "Work More Efficiently in Developmental Biology With Stereo Microscopy: Zebrafish, Medaka, and Xenopus" e "How to Adapt Grain Size Analysis of Metallic Alloys to Your Needs"
La luce a forma di anello che passa attraverso l'apertura viene messa a fuoco dal condensatore sul campione biologico o sul materiale da osservare. Porzioni della luce a forma di anello vengono diffratte o disperse da strutture del campione o dalle caratteristiche del campione stesso. La luce diffratta entra nell'obiettivo. Al contrario, la porzione di luce ad anello che passa direttamente attraverso il campione senza subire deviazioni o che viene riflessa dal campione senza dispersioni non viene raccolta dall'obiettivo. La luce diffusa dalle strutture dell'esemplare o dalle caratteristiche del campione apparirà più luminosa rispetto alle aree di sfondo dell'esemplare o del campione in cui non c'è dispersione di luce.
Per ulteriori informazioni, fare riferimento all'articolo: "Metallography - an Introduction"
Domande frequenti sui microscopi per campo scuro
暗场显微镜与传统的明场显微镜相似，不同之处在于暗场显微镜的光源前面有环形孔。暗场照明的光以高入射角照射到标本或样本上，其要么射透样本，要么被其表面反射，然后再通过物镜，最后通过目镜或进入相机传感器。暗场照明会使透明样本的均匀区域或不透明样本的平整表面看上去很暗，因为大多数光在高入射角下都会偏离物镜。一般情况下，透明样本或不透明样本的表面都会有散射光的特征。也是由于这个原因，暗场显微镜的图像中显示的背景较暗，而与这些特征相对应的区域因为散射光进入了物镜，所以看上去较亮。
可以，活的生物标本，如细胞或生物体，使用暗场显微镜更易于观察。
可以，暗场显微镜可以配备相机来记录通过光学对比法观察到的图像。其还可以配备其他配件。如需了解更多信息，请联系当地的徕卡销售代表。
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