In questa categoria si trovano coloranti fluorescenti con un massimo di assorbimento compreso tra 500 e 600 nm. Ad eccezione del colorante pyronina ATTO 520 e della tiorodamina ATTO Thio12, tutti gli altri coloranti sono rhodamine. 

I coloranti possono essere eccitati in modo efficiente nella regione verde, arancione e rossa dello spettro utilizzando sorgenti luminose quali il laser a ioni di argon (514 nm), la lampada a vapori di mercurio (546 nm, 577 nm), il laser He-Ne (543 nm, 594 nm), il laser Nd:YAG raddoppiato in frequenza (532 nm) e vari laser a diodo (520 nm, 530 nm).