Microscopie Fluorescente

Microscopie Fluorescente

Microscopie Fluorescente

La fluorescence est l'un des phénomènes physiques les plus couramment utilisés en microscopie biologique et analytique, principalement en raison de sa grande sensibilité et de sa haute spécificité. Découvrez comment les microscopes à fluorescence appuient votre recherche.

Microscopes à lumière fluorescente

Les microscopes à fluorescence utilisés dans les applications de recherche sont basés sur un ensemble de filtres optiques:

  • un filtre d'excitation
  • un séparateur de faisceau dichroïque et
  • un filtre antipollution

Les filtres sont souvent branchés ensemble dans un cube de filtre (microscopes composites) ou dans un support plat (principalement des microscopes stéréo).

Alors que le filtre d'excitation sélectionne les longueurs d'onde pour exciter un colorant particulier dans l'échantillon, le filtre d'émission sert en quelque sorte de contrôle de qualité en ne laissant passer que les longueurs d'onde d'intérêt émises par le fluorophore. Le but du miroir dichroïque est de réfléchir la lumière dans la bande d'excitation et de transmettre la lumière dans la bande d'émission, ce qui permet l'éclairage incidente classique par épifluorescence.

Ce tutoriel sur la fluorescence explique les éléments optiques du trajet lumineux et le mode de fonctionnement de la microscopie à fluorescence en prenant l'exemple d'un microscope inversé qui peut être utilisé pour les méthodes de contraste de lumière transmise et la microscopie à fluorescence.

Stéréomicroscopes à fluorescence

Les stéréomicroscopes à fluorescence de Leica Microsystems utilisent la technologie TripleBeam, un troisième faisceau distinct pour l'éclairage par fluorescence de l'échantillon sans miroir dichroïque.

Par conséquent, un filtre d'excitation pour le faisceau d'illumination et deux filtres d'émission, un pour chaque faisceau d'observation, sont nécessaires.

Caméras pour la microscopie à fluorescence

Pour obtenir des images de fluorescence de haute qualité, il est nécessaire d'utiliser une caméra de fluorescence CCD ou sCMOS appropriée.

Leica Microsystems propose des caméras de fluorescence dédiées à différentes applications.

Logiciel de microscopie par fluorescence

La simplicité de la configuration et du contrôle des expériences devient de plus en plus importante en microscopie de fluorescence.

La plateforme logicielle dédiée Leica Application Suite (LAS) X facilite la mise en place d'expériences, même complexes.

De la configuration à l'analyse des données d'imagerie, LAS X est la plateforme logicielle parfaite.

Microscopes à fluorescence et systèmes d'imagerie 29

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