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Show answer Quali sono le differenze fra un ultramicrotomo e un microtomo standard?

La distinzione principale tra un ultramicrotomo e un microtomo standard risiede nello spessore delle sezioni prodotte e nelle rispettive applicazioni nella ricerca biologica. Un microtomo standard è versatile nel generare sezioni più spesse, utili nell'istologia di routine e nella microscopia ottica, mentre un ultramicrotomo è progettato specificamente per creare sezioni ultrasottili, fino alla scala dei nanometri, che possono essere analizzate con diverse tecniche di microscopia avanzata come la microscopia elettronica a trasmissione (TEM). L'ultramicrotomo utilizza una lama di vetro o di diamante e necessita che i campioni siano temprati per garantire precisione e stabilità durante il sezionamento, . La tempratura è ottenibile mediante il congelamento e/o l'inclusione in resina ed è un'operazione fondamentale per garantire l'imaging ad alta risoluzione, necessaria per studiare in dettaglio le intricate strutture subcellulari.

Show answer In che modo è possibile trasferire le sezioni dall'ultramicrotomo alla griglia?

Per trasferire sezioni ultrasottili da un ultramicrotomo a una griglia per eseguire la microscopia elettronica, è necessario seguire la procedura seguente:

  1. Preparazione delle griglie: assicurarsi che le griglie TEM siano pulite e, se necessario, sottoposte a glow-discharged per verificarne l'idrofilia.
  2. Raccolta delle sezioni: far galleggiare le sezioni ultrasottili sull'acqua per garantire che si mantengano intatte.
  3. Posizionamento della griglia: immergere delicatamente la griglia TEM nell'acqua e prelevare le sezioni dal basso.
  4. Sollevamento della griglia: sollevare con cautela la griglia con una pinza, assicurandosi che le sezioni aderiscano alla stessa.
  5. Esame e conservazione: analizzare le sezioni al microscopio ottico e, se necessario, conservare adeguatamente le griglie.    
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