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STED und STELLARIS: Superauflösung neu konzipiert

STED und STELLARIS in einem einzigen Instrument bieten Ihnen die Vorteile seiner ausgezeichneten konfokalen Funktionalitäten und des Zugangs zu aufschlussreicher Superauflösung.

POWER 

Untersuchung mehrerer Ereignisse gleichzeitig und molekularer Interaktionen im Nanobereich und über das gesamte Spektrum dank der einzigartigen Kombination aus unseren Weißlichtlasern (WLL) der nächsten Generation, optimiertem Strahlengang, schnellen Power HyD-Detektoren und bis zu 3 STED-Laserlinien.

POTENZIAL

Mit TauSTED, unserem neuen STED-Ansatz auf Basis der Fluoreszenzlebensdauer, der modernste Bildqualität und sanfte Lebendzell-Bedingungen liefert, bringen Sie hochauflösende STED-Bildgebung auf ein neues Niveau.

PRODUKTIVITÄT

Dank der neuen Benutzeroberfläche ImageCompass können Sie erstaunliche konfokale und STED-Bilder einfach aufnehmen und Ihr Experiment mit wenigen Klicks einrichten.

Konfokal TauSTED

TauSTED Xtend: Sharp. Simple. Stunning.

TauSTED Xtend ist der nächste Entwicklungsschritt der TauSTED-Bildgebung. Es kombiniert lebensdauerbasierte Informationen mit einer zusätzlichen räumlichen Komponente. Dies führt zu einem erheblichen Auflösungsgewinn insbesondere bei geringeren STED-Depletionleistungen, und erweitert die Möglichkeiten des Multicolor-Live-Imaging im Nanobereich. Laden Sie die Application Note herunter und erfahren Sie mehr über TauSTED Xtend.

POWER

Lösen Sie Details im Nanobereich in ihrem Kontext auf. Führen Sie längere Live-Imaging-Aufnahmen mit topaktueller Auflösung durch.

POTENTIAL

Verwenden Sie Standardfluorophore und folgen Sie Ihren bevorzugten Protokollen für STED. Führen Sie ein erweitertes Multicolor-Imaging durch, sogar mit nur einer einzigen STED-Laserlinie.

PRODUKTIVITÄT

Überwachen Sie schnelle Prozesse direkt mit Nanoauflösung. Erhalten Sie sofortiges Feedback zu den Ergebnissen, während Sie Ihre Experimente durchführen.

TauSTED Xtend Konfokal

Mehrfarbige fixierte Probe. TauSTED Xtend 775; Vimentin AF 594 (cyan), Phalloidin ATTO 647N (magenta) und NUP107 CF680R (glow). Bildabdeckung: 39 nm. Probe mit freundlicher Genehmigung von Brigitte Bergner, Mariano Gonzales Pisfil, Steffen Dietzel, Core Facility Bioimaging, Biomedical Center, Ludwig-Maximilians-Universität, München, Deutschland

Schonende mehrfarbige Live-Bildgebung im bemerkenswerten Nanomaßstab

Die Bildgebungsdynamik innerhalb lebender Proben ist nach wie vor der anspruchsvollste experimentelle Ansatz. Um wissenschaftlich relevante Ergebnisse zu erzielen, muss das Beleuchtungsschema entsprechend Ihrer Probe und dem Fluorophor niedrig genug sein, um Photobleiche und Phototoxizität zu vermeiden.

Mit STELLARIS, mit seinen Weißlichtlasern der neuesten Generation (WLL), seinen Power HyD-Detektoren und dem Zugang zu Lifetime-Technologien (TauSense, FALCON), sind mehrfarbige Live-Bildgebung und funktionale Bildgebungsexperimente zur Routine in der konfokalen Bildgebung geworden.

Mit TauSTED Xtend können Sie die Anregungs- und STED-Lichtdosis so weit senken, dass Sie biologische Prozesse über längere Zeiträume auch im Nanobereich untersuchen können.

Lebende Zellen, die LifeAct-mNeonGreen exprimieren. TauSTED Xtend 589. 6 k-Format, 30 min STED-Bildgebung. Probe mit freundlicher Genehmigung von: M. Heydasch, Institut für Zellbiologie, Universität Bern, Schweiz.

Kleinere Details im Kontext im Nanomaßstab auflösen

Suchen Sie nach Super-Resolutionstrategien, mit denen Sie Ihre biologischen Ziele in Zeit und Raum mit minimalen äußeren Störungen verfolgen können?

TauSTED reduziert die Anregungs- und STED-Lichtdosis bereits erheblich, indem es die Auflösung im Vergleich zur konfokalen Standardbildgebung und zu klassischen gated STED-Ansätzen deutlich verbessert.

TauSTED Xtend geht noch einen Schritt weiter, indem es die bisher maximal erreichbare Auflösung weiter steigert und ein eindeutiges Signal auch bei geringerer STED-Depletionleistung zeigt.

[Translate to German:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488.  Only 0.5% of STED light reveals much more detail.
[Translate to German:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488. Only 0.5% of STED light reveals much more detail.

Auflösung jenseits konventioneller Grenzen

TauSTED analysiert die Fluoreszenz-Lebensdauerinformationen, die bei jedem STED-Experiment erfasst werden, und bildet die STED-Reaktion des Fluorophors in Echtzeit ab. Der Zugriff auf diese Informationen ermöglicht es, die Bildqualität (Signal-Rausch-Verhältnis) zu steigern, Photonen aus dem Hintergrund nach physikalischen Prinzipien zu eliminieren und die Auflösung über die Grenzen der intensitätsbasierten STED hinaus zu steigern, ganz gleich, welche Anregungs- und STED-Linie (589, 660, 775) Sie verwenden.

TauSTED Xtend ist der nächste Schritt bei der Entwicklung der STED-Bildgebung und kombiniert die lebensdauerbasierten Informationen mit einer zusätzlichen räumlichen Komponente. Sie werden einen signifikanten Gewinn an Auflösung erleben, insbesondere bei geringeren STED-Depletionleistungen. So können Sie die Fähigkeiten der Live-Bildgebung im Nanomaßstab deutlich erweitern.

STED- und DNA-Origami-Bildgebung: TauSTED 775 liefert Auflösungen <30&#160;nm von GATTA-Bead R mit einer Nenngröße von 23&#160;nm. Messskala: 1 µm.
STED- und DNA-Origami-Bildgebung: TauSTED 775 liefert Auflösungen <30&#160;nm von GATTA-Bead R mit einer Nenngröße von 23&#160;nm. Messskala: 1 µm.

Verwenden Sie Ihre Standardprotokolle

Möchten Sie Ihre Experimente mithilfe bekannter Protokolle und einer Vielzahl von fluoreszierenden Labeln und Markern, die häufig in der biowissenschaftlichen Forschung verwendet werden, bis in den Nanobereich skalieren?

TauSTED Xtend bietet neue Möglichkeiten für ein- und mehrfarbige Experimente mit grün fluoreszierenden Proteinen und Fluorophoren, die in der biowissenschaftlichen Forschung üblich sind, jedoch derzeit in nanoskopischen Studien noch nicht ausreichend genutzt werden.

Sie können die Palette der Fluorophore – sogar mit einer einzigen STED-Laserlinie –erweitern, und die einzigartigen spektralen Fähigkeiten von STELLARIS nutzen.

STED Konfokal

2c TauSTED Xtend-Bildgebung von Säugetierzellen, die mit CF 440 – Phalloidin (glow) gekennzeichnet und gegen Tubulin, StarGreen (cyan), immungefärbt wurden. Messskala: 2 µm

Erweitern Sie die Anzahl simultaner Ereignisse, die Sie im Nanobereich analysieren können

Die Mehrfarben-Fluoreszenzmarkierung ermöglicht es, Beziehungen zwischen intrazellulären Bestandteilen aufzudecken, da Sie verschiedene Komponenten mit molekularer Spezifität abbilden können.

STED und STELLARIS liefern hervorragende Ergebnisse bei mehrfarbigen Anwendungen. Sie können die besten Farbstoffe im roten Bereich des Spektrums einsetzen, fluoreszierende Proteine im grünen Bereich oder neuartige fluorogene Sonden im orangefarbenen Bereich verwenden. Sie können Studien zur Kolokalisierung mehrerer Spezies durchführen und diese mit Details unterhalb der Beugungsgrenze auflösen.

Unsere spektrale Detektion bietet Ihnen bis zu fünf STED-fähige Power HyD-Detektoren, so dass Sie die Anzahl der molekularen Akteure, die in Zeit und Raum lokalisiert werden sollen, erweitern können. Darüber hinaus garantieren die digitalen Funktionalitäten und die Geschwindigkeit der Power HyD-Detektoren mit einer Totzeit des gesamten Systems von 1,5 ns, dass Sie eine ausgezeichnete Bildqualität in Bezug auf Signal-Rausch-Verhältnis und Hintergrund erhalten, während sie gleichzeitig mindestens zehnmal mehr Photonen pro Pixelverweilzeit erfassen, verglichen mit APDs.

STED für die Entwicklungsbiologie: smFISH* von RNA in einem Drosophilaembryo Totalpräparat. Proben sind direkt markiert,  keine Signalverstärkung. Oben: Dreifarben-TauSTED 775 erfasst das Signal von hb CalFluor 610 (cyan), gt Quasar 670 (grün) und eve Quasar 705 (magenta). Unten: konfokale Abbildung des gesamten Drosophilaembryos. Probe mit freundlicher Genehmigung von Tom Pettini, University of Manchester, UK.
*Einzelmolekül-In-situ-Hybridisierung
STED für die Entwicklungsbiologie: smFISH* von RNA in einem Drosophilaembryo Totalpräparat. Proben sind direkt markiert, keine Signalverstärkung. Oben: Dreifarben-TauSTED 775 erfasst das Signal von hb CalFluor 610 (cyan), gt Quasar 670 (grün) und eve Quasar 705 (magenta). Unten: konfokale Abbildung des gesamten Drosophilaembryos. Probe mit freundlicher Genehmigung von Tom Pettini, University of Manchester, UK.
*Einzelmolekül-In-situ-Hybridisierung

Erweitern Sie die Möglichkeiten von mehrfarbiger STED-Bildgebung mit Lebensdauertrennung

Wenn Sie die STED- und FALCON-Modalitäten auf dem STELLARIS 8 System kombinieren, können Sie die Palette der Fluorophore zur Untersuchung molekularer Wechselwirkungen auf der Nanoebene noch erweitern, da Sie die Spezies anhand ihrer Fluoreszenzlebensdauer trennen können.

Die Emissionsspektren dieser Fluorophore überschneiden sich stark und lassen sich durch herkömmliche Intensitätserfassung nicht unterscheiden. Durch die Kombination von STED-FLIM mit unserer automatisierten Phasertrennung werden die Fluorophore anhand ihrer unterschiedlichen Lebensdauern und eines einzigen Detektors klar getrennt.

STED-Trennung für die Zellbiologie: STED 775 und FALCON STED-Trennung ermöglichen die Trennung von Spezies mit überlappenden Spektren anhand ihrer Fluoreszenzlebensdauer. In U2OS-Zellen, die für TOM20 und Tubulin markiert sind, zeigt die reine Photonenzählung die Intensitätsinformation (grau) und die beiden Strukturen können nicht getrennt werden, während sie mit STED-FLIM klar unterschieden werden (cyan, AF 647- Tubulin; magenta ATTO 647N-TOM20).
STED-Trennung für die Zellbiologie: STED 775 und FALCON STED-Trennung ermöglichen die Trennung von Spezies mit überlappenden Spektren anhand ihrer Fluoreszenzlebensdauer. In U2OS-Zellen, die für TOM20 und Tubulin markiert sind, zeigt die reine Photonenzählung die Intensitätsinformation (grau) und die beiden Strukturen können nicht getrennt werden, während sie mit STED-FLIM klar unterschieden werden (cyan, AF 647- Tubulin; magenta ATTO 647N-TOM20).

Verfolgen Sie Ihre Ergebnisse sofort in Zeit und Raum

Sehen Sie während Ihres Experiment, was geschieht, wenn es geschieht in Zeit und Raum mit einer Auflösung im Nanobereich. Mit TauSTED Xtend können Sie schnelle Prozesse noch während der Durchführung Ihrer Experimente auswerten und sofortiges Feedback zu den Ergebnissen erhalten.

Gewährleisten Sie höchste STED-Leistung mit der Ein-Klick-Autojustierung, schützen Sie dabei ihre Probe vor Lichteinstrahlung und erreichen Sie vollautomatisch die optimale Positionierung des STED-Lasers .

Mit LAS X Navigator können Sie im Handumdrehen große Bereiche abbilden und Ihre Untersuchungsbereiche für die STED-Bildgebung auswählen.

Validieren Sie Ihre Ergebnisse dank STELLARIS Funktionen wie der Zugriff auf Rohdaten und die schnelle und effiziente Photonenzählung.

Dynamik des Zytoskeletts in lebenden Zellen mit TauSTED Xtend 589. Neuroblastomzellen der Maus mit LifeAct-mNeonGreen zeigen die Dynamik der Aktinfilamente, Zelllinie. Mit freudlicher Genehmigung von: Prof. Olivier Perutz, Max Heydasch. Universität Bern, Schweiz.

2D- und 3D-STED-Bildgebung mit hervorragender Helligkeit und Auflösung

Mit STELLARIS STED-Mikroskopen können Sie sowohl in 2D als auch in 3D die gewünschten Ergebnisse erzielen, da die Auflösung in x, y und z einstellbar ist. Um sicherzustellen, dass Sie die beste Helligkeit und Auflösung in 2D und 3D erhalten, bieten Ihnen unsere Mikroskope die besten Optiken, um eine optimale Überlagerung der Anregungs- und STED-PSF im gesamten Spektrum zu gewährleisten und die Quantifizierungsmöglichkeiten nicht durch adaptive Korrekturen zu verlieren.

Die folgenden Objektive der STED WHITE Klasse wurden speziell entwickelt, um optimale Bedingungen für eine Vielzahl von STED-Experimenten zu gewährleisten:

  • Das STED WHITE 100x Ölimmersionsobjektiv bietet höchste Auflösung und hervorragende Leistung für die tägliche Bildgebung bei fixierten Proben.
  • Das STED WHITE 93x Glyzerinobjektiv bietet eine adaptive Korrektur von Temperaturschwankungen, Brechungsindexfehlern und Inhomogenitäten beim Blick in die Tiefe der Probe, dank der vollmotorisierten Korrekturmanschettentechnologie motCORR.
  • Das STED WHITE 86x Wasserimmersionsobjektiv mit motCORR (siehe oben) bietet auch adaptive Korrektur und ist ideal für schonende Lebendzellanwendungen und STED-FCS (1).

(1) „High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy“, F. Schneider et al. J. Phys. D: Appl. Phys. 53 164003, 2020.

STED- und DNA-Origami-Bildgebung: TauSTED 775 liefert Auflösungen <30&#160;nm von GATTA-Bead R mit einer Nenngröße von 23&#160;nm. Messskala: 1 µm.
STED- und DNA-Origami-Bildgebung: TauSTED 775 liefert Auflösungen <30&#160;nm von GATTA-Bead R mit einer Nenngröße von 23&#160;nm. Messskala: 1 µm.
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